配制方法霉菌瓊脂培養(yǎng)皿的配制通常遵循以下步驟:根據(jù)配方準確稱取各種成分。將成分溶解在適量的蒸餾水中。調(diào)整pH值至適合霉菌生長的范圍(通常pH 5.6-6.0)。高壓滅菌以確保培養(yǎng)基的無菌狀態(tài)。冷卻至適當溫度后,倒入無菌培養(yǎng)皿中,待其凝固。使用方法使用霉菌瓊脂培養(yǎng)皿時,應(yīng)將待檢測的樣本通過稀釋、劃線或涂布等方法接種到培養(yǎng)皿上,然后在適宜的溫度(通常是25-30°C)和濕度條件下培養(yǎng)。培養(yǎng)一定時間后(通常是3-7天),觀察并記錄霉菌的生長情況。注意事項在操作過程中應(yīng)保持無菌技術(shù),避免樣本和培養(yǎng)基的污染。培養(yǎng)皿應(yīng)存放在干燥、避光、清潔的環(huán)境中。根據(jù)霉菌的種類和特性,可能需要調(diào)整培養(yǎng)基的成分和培養(yǎng)條件。霉菌瓊脂培養(yǎng)皿是微生物學實驗室中的重要工具,它有助于科研人員和質(zhì)量控制研究霉菌的生長特性、進行霉菌的鑒定和計數(shù),以及評估霉菌對環(huán)境和產(chǎn)品的污染情況。 改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)皿需要存放在避光、干燥的地方,開封后應(yīng)旋緊瓶蓋以避免吸潮結(jié)塊。萬古霉素溶液
亞硫酸鉍瓊脂平板培養(yǎng)皿(BismuthSulfiteAgar,簡稱BSA)是一種用于選擇性分離培養(yǎng)沙門氏菌的培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**試驗原理**:-亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基通過其成分抑制大腸桿菌、變形桿菌和革蘭氏陽性菌的生長,但對沙門氏菌的生長沒有影響。沙門氏菌能利用葡萄糖,將亞硫酸鹽還原成硫化物并與硫酸亞鐵反應(yīng),使得菌落呈黑色,此外還可以將鉍離子還原成金屬鉍,使菌落呈現(xiàn)金屬光澤,從而使沙門氏菌得到分離。2.**培養(yǎng)基配方**:-培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、牛肉粉、葡萄糖、硫酸亞鐵、亞硫酸鉍、磷酸氫二鈉、亮綠和瓊脂。具體配方為每升含有蛋白胨10.0g、牛肉浸粉5.0g、葡萄糖5.0g、硫酸亞鐵0.3g、磷酸氫二鈉4.0g、瓊脂15.0g、亞硫酸鈉6.0g、檸檬酸鉍銨2.0g、煌綠0.025g、純化水1000mL,pH值為7.5±0.2。3.**使用方法**:-亞硫酸鉍瓊脂平板培養(yǎng)皿為即用型成品平板,拆包即可使用,注意無菌操作。培養(yǎng)基中的檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉反應(yīng)生成不溶物,培養(yǎng)基呈渾濁狀,有黑色沉淀,搖勻后倒平板使用即可。4.**儲存條件與保質(zhì)期**:-亞硫酸鉍瓊脂平板培養(yǎng)皿應(yīng)儲存在2~8℃,避光保存,有效期見包裝。0.05%TTC溶液不同細菌在TSA上的生長特征有區(qū)別,如金黃色葡萄球菌可能產(chǎn)生黃色的色素,大腸埃希氏菌形成無色透明菌落。
連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基(TetrathionateBroth,簡稱TTB)是一種選擇性富集培養(yǎng)基,主要用于分離和富集沙門氏菌。以下是其主要特點:1.**成分組成**:-連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分包括胰酪蛋白胨、動物組織消化物、膽鹽、碳酸鈣和硫代硫酸鈉等。每升培養(yǎng)基中通常包含胰酪蛋白胨2.5g、動物組織消化物2.5g、膽鹽1.0g、碳酸鈣10.0g和硫代硫酸鈉30.0g。2.**選擇性**:-該培養(yǎng)基通過添加去氧膽鹽和亮綠染料等抑制劑,抑制革蘭氏陽性菌的生長,從而提高對沙門氏菌的選擇性。碘-碘酸鉀與硫代硫酸鈉反應(yīng)生成四硫磺酸鹽,阻遏常規(guī)腸道細菌生長。3.**鑒別功能**:-葡萄糖和甘露醇是可發(fā)酵的糖類物質(zhì),輔助腸道致病菌尤其是沙門氏菌的鑒別。連四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基含有碘液和煌綠水溶液,這些添加劑有助于抑制共生生物,從而改善沙門氏菌的分離。4.**應(yīng)用廣**:-主要用于傷寒沙門氏菌和其他沙門氏菌的分離、增菌和鑒定。常用于從糞便、污水等樣品中分離沙門氏菌。5.**配制方法**:-一般將培養(yǎng)基粉末溶解在蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸,分裝后進行高壓滅菌。使用時需現(xiàn)配現(xiàn)用,以保證培養(yǎng)基的穩(wěn)定性和選擇性。
4.**培養(yǎng)條件**:-培養(yǎng)基的制備方法包括稱取基礎(chǔ)培養(yǎng)基14.2g加入180ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取1.2g李斯特氏菌添加劑,加入20ml無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動,使其乳化均勻,將二者分別于121℃高壓滅菌15分鐘。冷至50℃左右時,把李斯特氏菌添加劑加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,并加入李斯特氏菌抑菌劑,混勻,傾入無菌平皿。5.**質(zhì)量控制**:-質(zhì)控菌株在37℃培養(yǎng)24-48小時,單增李斯特氏菌和綿羊李斯特氏菌在該培養(yǎng)基上生長良好,形成藍色菌落,菌落周圍有一不透明環(huán)。其他菌如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和沙門氏菌則不生長或生長不良。6.**儲存條件**:-制備好的固體平板保存于2-8℃,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,保存溫度2-8℃。7.**注意事項**:-嚴格按照標簽說明進行配制培養(yǎng)基,避免混合時培養(yǎng)基和添加劑溫度過高導致平板出現(xiàn)絮狀物。干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。這些特點使得李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基在食品衛(wèi)生微生物檢驗中具有重要的應(yīng)用價值。TBA培養(yǎng)基的pH值也是經(jīng)過優(yōu)化的,以適應(yīng)特定細菌群體的生長需求。
在植物組織培養(yǎng)中,除了脯氨酸,還有多種氨基酸和化合物對植物生長和發(fā)育具有重要作用:1.**氨基酸**:甘氨酸、谷氨酸、精氨酸、半胱氨酸等,它們不僅提供有機氮源,還促進植物生長及不定芽、不定胚的分化。2.**維生素**:如鹽酸硫胺素(VB1)、鹽酸吡哆醇(VB6)、煙酸(VB3)、肌醇等,它們在植物的代謝過程中起催化劑作用。3.**植物生長調(diào)節(jié)劑**:包括生長素(如IAA、IBA、NAA、2,4-D等)和細胞分裂素(如6-BA、KT、ZT、2-ip等),這些調(diào)節(jié)劑控制器官發(fā)育模式,如根和芽的形成。4.**碳源和能源**:蔗糖是常用的碳源,提供能量,同時在高壓滅菌過程中轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟呛凸?,有利于細胞生長和分化。5.**無機營養(yǎng)成分**:大量元素(如氮、磷、鉀、鈣、鎂、硫)和微量元素(如鐵、硼、錳、銅、鉬、鈷)對植物的生長發(fā)育至關(guān)重要。6.**天然有機添加物**:如椰子汁、酵母提取物等,它們可能因品種、產(chǎn)地和成熟度而異,影響實驗的重復性。7.**凝固劑**:瓊脂是常用的凝固劑,用于配制固體培養(yǎng)基,為植物細胞和組織提供穩(wěn)定的生長環(huán)境。8.**抗氧化劑**:如半胱氨酸、抗壞血酸等,用于防止酚類物質(zhì)引起的組織褐變。
胡蘿卜浸出液來源于天然植物,這種培養(yǎng)基被認為是一種較為自然的培養(yǎng)環(huán)境,適合于研究微生物的特性。萬古霉素溶液
LPM瓊脂培養(yǎng)皿是一種選擇性培養(yǎng)基,特別設(shè)計用于分離和培養(yǎng)單增李斯特菌(Listeriamonocytogenes)111214。這種培養(yǎng)基含有特定的成分,可以促進李斯特菌的生長,同時抑制其他微生物的生長。LPM瓊脂培養(yǎng)皿的主要成分包括:氯化鋰(Lithiumchloride):用于抑制革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性菌的生長。苯乙醇(Phenylethanol):同樣具有抑制雜菌的作用。拉氧頭孢(Moxalactam):一種抗生物質(zhì),用于抑制葡萄球菌、桿菌和變形桿菌等的生長。甘氨酸酐(Glycine):有助于提高李斯特菌的回收率。氯化鈉(Sodiumchloride):維持滲透壓平衡。蛋白胨和牛肉浸粉:提供細菌生長所需的碳源和維生素。瓊脂:作為凝固劑,使培養(yǎng)基凝固成固體狀態(tài)。