TSA0.25%青霉素酶培養(yǎng)皿(TryptoseSoyaAgarwithPenicillin)是一種用于微生物檢測的培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**成分組成**:-TSA培養(yǎng)基的主要成分包括胰酪蛋白胨、大豆木瓜蛋白酶消化物、氯化鈉、瓊脂和青霉素酶。具體配方為每升含有胰酪蛋白胨15g,大豆木瓜蛋白酶消化物5g,氯化鈉5g,瓊脂15g,青霉素酶100萬IU,蒸餾水1000ml,pH值調至7.3±0.2(25℃)。2.**用途**:-該培養(yǎng)基主要用于醫(yī)藥環(huán)境監(jiān)測、空氣沉降菌檢測、設備、車間、人員、包裝材料等表面微生物的測定。3.**包裝方式**:-通常采用一次性無菌塑料平皿或接觸皿,輻照滅菌,確保無菌性。4.**保存條件**:-保存溫度為2-25℃,避免高溫和直接陽光照射。5.**微生物生長特征**:-不同細菌在含青霉素酶TSA培養(yǎng)基平板上的生長特征不同。例如,金黃色葡萄球菌會產生黃色的色素,大腸埃希氏菌形成無色透明大菌落,鼠傷寒沙門氏菌和枯草芽孢桿菌形成無色大菌落,銅綠假單胞菌產生綠色的色素。6.**微生物靈敏度試驗**:-接種質控菌株后,放置在30-35℃需氧條件下培養(yǎng)18-24小時,進行微生物靈敏度試驗。紅色球形孢囊菌可能具有獨特的孢子形狀、顏色和大小,孢囊的形態(tài)特征,這些特征有助于其在顯微鏡下的識別。馬丁瓊脂
薩氏液體培養(yǎng)基SDY(SabouraudDextroseMediumwithYeastExtract)在實驗室中的滅菌方法應該遵循以下步驟:1.**稱量培養(yǎng)基**:首先,根據(jù)需要的體積,稱量適量的薩氏液體培養(yǎng)基SDY干粉,通常為60克干粉培養(yǎng)基用于制備1升培養(yǎng)基。2.**溶解**:將稱量好的干粉加入到蒸餾水或去離子水中,加熱并攪拌直至完全溶解。注意,薩氏液體培養(yǎng)基SDY的配方中通常包含蛋白胨10.0g、酵母提取物10.0g、葡萄糖40.0g,pH值控制在6.0±0.2(25℃)。3.**調整pH值**:在使用前,根據(jù)需要調整培養(yǎng)基的pH值至7.0,以適應的生長條件。4.**分裝**:將溶解并調整好pH值的培養(yǎng)基分裝到適合的容器中,準備進行滅菌。5.**滅菌**:有兩種推薦的滅菌方法,一種是在121℃下高溫滅菌15分鐘,另一種是在115℃下滅菌20至30分鐘。6.**注意事項**:-滅菌過程中應注意無菌操作,避免微生物污染。-滅菌后應讓培養(yǎng)基冷卻至室溫,并儲存在適當?shù)臈l件下。-使用時應注意個人防護,穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩,以避免粉塵引起的不適。通過遵循這些步驟,可以確保薩氏液體培養(yǎng)基SDY在實驗室中得到正確的滅菌處理,為培養(yǎng)提供適宜的環(huán)境。大腸桿菌/大腸菌群液體顯色培養(yǎng)基胡蘿卜浸出液來源于天然植物,這種培養(yǎng)基被認為是一種較為自然的培養(yǎng)環(huán)境,適合于研究微生物的特性。
MMA培養(yǎng)皿通常指的是含有改良McBride培養(yǎng)基(ModifiedMcBrideAgar,簡稱MMA)的培養(yǎng)皿,這是一種用于分離和培養(yǎng)單核細胞增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes,簡稱L.monocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。成分與原理MMA培養(yǎng)基的主要成分包括:胰蛋白胨:提供氮源和氨基酸。酵母浸粉:提供維生素和生長因子。氯化鈉:提供電解質和維持滲透壓。磷酸氫二鉀:緩沖體系的一部分。硫酸鎂:作為某些酶的輔助因子。甘露醇:作為可發(fā)酵的碳源。多粘菌素B:抑制革蘭氏陰性菌和部分革蘭氏陽性菌。萘酚亞甲基藍:作為指示劑,可檢測還原作用。瓊脂:作為凝固劑。MMA培養(yǎng)基通過其選擇性抑制成分,如多粘菌素B,可以抑制大部分非李斯特菌的生長,而為李斯特菌提供適宜的生長環(huán)境。用途MMA培養(yǎng)皿主要用于:食品樣本中李斯特菌的分離:在食品工業(yè)中,用于檢測和監(jiān)控李斯特菌的污染。環(huán)境樣本的監(jiān)測:用于檢測加工環(huán)境和設備中可能存在的李斯特菌。臨床樣本的檢測:在醫(yī)院和臨床實驗室中,用于分離和鑒定李斯特菌。
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基是一種專門用于檢測和分離單核細胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**用途**:-用于李斯特氏菌的顯色培養(yǎng),特別是在食品和藥品中快速檢測單增李斯特氏菌。單增李斯特氏菌在該培養(yǎng)基上顯藍色,外部有一不透明環(huán)。2.**成分組成**:-培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、氯化鈉、瓊脂、氯化鋰和抑菌劑。具體配方為每升含有營養(yǎng)物質70.0克、顯色劑6.0克,pH值控制在7.2±0.2(25℃)。3.**顯色原理**:-根據(jù)單增李斯特氏菌生長代謝產生其特有葡萄糖甘酶及酯酶的特征,在培養(yǎng)基中加入相應的酶顯色底物。單增李斯特氏菌在該培養(yǎng)基上生長,產生特有的菌落形態(tài):菌落呈藍綠色,其周圍有一不透明環(huán),從而使單增李斯特氏菌得到分離鑒別。葡萄糖天冬酰胺瓊脂培養(yǎng)基適用于從土壤中分離放線菌,也可用于培養(yǎng)鏈霉菌,觀察菌落形態(tài)特征和色素產生 。
在配制改良高氏二號培養(yǎng)基時,如果遇到成分沉淀問題,可以采取以下措施進行處理:1.**充分溶解**:確保所有成分在加入之前已經(jīng)充分溶解。對于不易溶解的成分,如瓊脂,需要在加熱條件下不斷攪拌直至完全溶解。2.**調整溶解順序**:根據(jù)各成分的溶解特性,調整添加順序。通常先溶解無機鹽和維生素,再加入有機物質。3.**使用輔助溶劑**:對于某些難溶成分,可以考慮使用適當?shù)娜軇┗蛑軇﹣韼椭芙狻?.**避免混合沉淀**:在混合不同成分時,要注意避免因成分相互作用而產生沉淀。例如,避免將鈣鹽和磷酸鹽直接混合。5.**控制pH值**:pH值的變化可能會影響某些成分的溶解度,因此在調節(jié)pH值時要小心,確保在成分完全溶解后再進行。6.**分步滅菌**:如果培養(yǎng)基中某些成分不耐熱,可以考慮分步滅菌。即先滅菌大部分成分,冷卻后再添加不耐熱的成分。7.**過濾**:如果沉淀物已經(jīng)形成,可以通過過濾來去除。使用適當孔徑的濾紙或濾網(wǎng)過濾培養(yǎng)基。8.**攪拌**:在溶解和加熱過程中,持續(xù)攪拌可以減少沉淀的形成。9.**使用螯合劑**:對于易氧化的成分,如硫酸亞鐵,可以使用螯合劑(如EDTA)來防止沉淀和氧化。TSA+青霉素酶培養(yǎng)皿主要用于器皿、設備和表面的無菌檢測,特別適用于青霉素類物質殘留的環(huán)境微生物監(jiān)測 。Dey/Engley中和肉湯基礎
制備改良CCD瓊脂培養(yǎng)皿時需要將干粉成分溶解在蒸餾水中,經(jīng)過高壓滅菌,并在冷卻至45-50℃時加入添加劑。馬丁瓊脂
亞硫酸鉍瓊脂平板培養(yǎng)皿(BismuthSulfiteAgar,簡稱BSA)是一種用于選擇性分離培養(yǎng)沙門氏菌的培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**試驗原理**:-亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基通過其成分抑制大腸桿菌、變形桿菌和革蘭氏陽性菌的生長,但對沙門氏菌的生長沒有影響。沙門氏菌能利用葡萄糖,將亞硫酸鹽還原成硫化物并與硫酸亞鐵反應,使得菌落呈黑色,此外還可以將鉍離子還原成金屬鉍,使菌落呈現(xiàn)金屬光澤,從而使沙門氏菌得到分離。2.**培養(yǎng)基配方**:-培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、牛肉粉、葡萄糖、硫酸亞鐵、亞硫酸鉍、磷酸氫二鈉、亮綠和瓊脂。具體配方為每升含有蛋白胨10.0g、牛肉浸粉5.0g、葡萄糖5.0g、硫酸亞鐵0.3g、磷酸氫二鈉4.0g、瓊脂15.0g、亞硫酸鈉6.0g、檸檬酸鉍銨2.0g、煌綠0.025g、純化水1000mL,pH值為7.5±0.2。3.**使用方法**:-亞硫酸鉍瓊脂平板培養(yǎng)皿為即用型成品平板,拆包即可使用,注意無菌操作。培養(yǎng)基中的檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉反應生成不溶物,培養(yǎng)基呈渾濁狀,有黑色沉淀,搖勻后倒平板使用即可。4.**儲存條件與保質期**:-亞硫酸鉍瓊脂平板培養(yǎng)皿應儲存在2~8℃,避光保存,有效期見包裝。馬丁瓊脂