培養(yǎng)基中谷氨酰胺作用及使用方法?幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求,細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應置-20℃ 冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基 4℃冰箱儲存兩周以上時,應重新加入原來量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,是一個L-谷氨酰胺的衍生物,其不穩(wěn)定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解,如果在相同條件下,L-谷氨酰胺幾乎完全降解。在有些情況下,培養(yǎng)基還需要進行一些化學處理。Preston肉湯添加劑
半組合培養(yǎng)基:指一類主要以化學試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基:1.液體培養(yǎng)基:80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。2.固體培養(yǎng)基:一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。3.半固體培養(yǎng)基:指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。4.脫水培養(yǎng)基:又稱預制干燥培養(yǎng)基,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。ER培養(yǎng)基 含瓊脂培養(yǎng)基的傳遞需要在制備和使用期間保持良好的無菌技術(shù),避免細菌交叉污染。
半固體培養(yǎng)基(half-solid medium) 在液體培養(yǎng)基中加人0.2%~0.5%的瓊脂粉,加熱溶解后冷卻即成,以倒置不流動的較軟狀態(tài)為宜,一般供細菌動力試驗、菌種傳代、保存和儲運標本之用。固體培養(yǎng)基(solid medium) 培養(yǎng)基中含有足量的凝固劑(瓊脂粉>0.5%),在常溫下能保持固體狀態(tài)。此類培養(yǎng)基大都用于微生物的分離、純化、藥敏試驗及菌苗制造。如營養(yǎng)瓊脂、營養(yǎng)斜面、SS瓊脂、TCBS瓊脂等。此外,還有一些特殊用途的培養(yǎng)基,如用血清或雞蛋做凝固劑配成的呂氏血清斜面培養(yǎng)基、雞蛋斜面培養(yǎng)基等。
培養(yǎng)細胞時應使用5%還是10%CO2,或者根本沒有影響?一般培養(yǎng)基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應使用的CO2濃度。當培養(yǎng)基中 NaHCO3含量為每公升3.7g時,細胞培養(yǎng)時應使用10% CO2;當培養(yǎng)基中NaHCO3 為每公升1.5g時,則應使用5%CO2培養(yǎng)細胞。NaHCO3的作用:培養(yǎng)基中使用了 NaHCO3-CO2 緩沖系統(tǒng),并采用開放培養(yǎng),使細胞代謝產(chǎn)生的CO2及時溢出培養(yǎng)瓶,再通過穩(wěn)定調(diào)節(jié)溫箱中CO2濃度(5%) ,與培養(yǎng)基中的NaHCO3處于平衡狀態(tài),從而調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH值。NEAA:非必須氨基酸,NEAA(非必需氨基酸) 是含幾種非必需氨基酸的合劑,添加到的原培養(yǎng)基不同,NEAA 也有不同的種類,比如添加至MEM的NEAA,含L-Alanine、L-Asparagine、L-Aspartic Acid、 L-Glutamic Acid、L-Glycine、L-Proline、L-Serine?;瘜W制劑和生物制劑都可以用于制備培養(yǎng)基,例如氨基酸、蔗糖和酵母提取物。
培養(yǎng)基按成分分類有哪些?上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,根據(jù)培養(yǎng)基的組成成分,可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基兩大類。天然培養(yǎng)基(native medium) 含有不完全明了化學成分的天然物質(zhì)。如蛋白胨、牛肉膏(粉)、肉浸液、玉米漿、血液、馬鈴薯等。用此類材料配成的培養(yǎng)基很難做到不同批號之間質(zhì)量的穩(wěn)定一致,因此在選用原料時務必注明其商品名稱、生產(chǎn)廠家及批號,對不同來源的原料應先做小樣試驗。此種培養(yǎng)基成本較低,細菌繁殖較好,一般細菌培養(yǎng)以選用天然培養(yǎng)基為主。培養(yǎng)基還可以根據(jù)所需生長的微生物類別,加入特定的營養(yǎng)物質(zhì),例如血清、血紅蛋白等等。甘氨酸溶液
孟德爾-韋伯利法可以計算培養(yǎng)基的可利用能量。Preston肉湯添加劑
1951年厄爾開發(fā)了供動物細胞體外生長的人工合成培養(yǎng)基(MEM)。合成培養(yǎng)基的種類相當多。合成培養(yǎng)基成分已知,便于對實驗條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代,因此,細胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。動物血清成分復雜,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清對細胞生長很有效,但后期對培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質(zhì)量的動物血清來源有限,成本高,限制了它的大量使用。無血清培養(yǎng)基不加動物血清,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細胞生長有效因子等。Preston肉湯添加劑
上海瑞楚生物科技有限公司目前已成為一家集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售相結(jié)合的貿(mào)易型企業(yè)。公司成立于2012-11-29,自成立以來一直秉承自我研發(fā)與技術(shù)引進相結(jié)合的科技發(fā)展戰(zhàn)略。公司主要產(chǎn)品有培養(yǎng)基,菌種,標準品,酶等,公司工程技術(shù)人員、行政管理人員、產(chǎn)品制造及售后服務人員均有多年行業(yè)經(jīng)驗。并與上下游企業(yè)保持密切的合作關(guān)系。瑞楚生物致力于開拓國內(nèi)市場,與化工行業(yè)內(nèi)企業(yè)建立長期穩(wěn)定的伙伴關(guān)系,公司以產(chǎn)品質(zhì)量及良好的售后服務,獲得客戶及業(yè)內(nèi)的一致好評。上海瑞楚生物科技有限公司通過多年的深耕細作,企業(yè)已通過化工質(zhì)量體系認證,確保公司各類產(chǎn)品以高技術(shù)、高性能、高精密度服務于廣大客戶。歡迎各界朋友蒞臨參觀、 指導和業(yè)務洽談。