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外泌體與肺病預(yù)后:在當(dāng)代精細(xì)醫(yī)療的大趨勢下,外泌體的發(fā)現(xiàn)和研究為肺病的早期診斷和治病提供了嶄新的方向。外泌體在液體活檢中的巨大潛力可以為肺病患者的早期發(fā)現(xiàn)和早期診療提供可靠依據(jù)。根據(jù)一些病癥來源的外泌體在肺病的發(fā)生的發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移過程中的作用及相關(guān)機(jī)制的研究,臨床醫(yī)療人員可以針對(duì)不同的患者制定較合適的治病方案,以達(dá)到改善肺病患者生存率,延長肺病患者生存時(shí)間的目的。但是,針對(duì)外泌體的研究還存在諸多的問題有待廣大研究者解決,如:外泌體的純化及標(biāo)記方法、如何尋找外泌體的靶基因、外泌體的作用機(jī)制及信號(hào)通路等??偠灾?,外泌體的研究有著廣闊的前景,基于外泌體與肺病的研究,有望研發(fā)出能夠應(yīng)用于肺病臨床診斷和治病的有效措施,造福更多的患者。由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的囊狀小體,大于一般蛋白質(zhì)。重慶正規(guī)外泌體提取試劑銷售廠家
外泌體鑒定:外泌體分離之后,需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物,多角度進(jìn)行鑒定。l透射電鏡鑒定法:簡稱TEM,適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察,即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形。l納米顆粒追蹤分析法:簡稱NTA,該方法能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度快,檢測后能提供外泌體粒徑和濃度信息。lWesternblot分子標(biāo)志物檢測:外泌體標(biāo)志蛋白包括四跨膜蛋白家族,如CD9、CD63和CD81;細(xì)胞質(zhì)蛋白,如肌動(dòng)蛋白(Actin)和鈣磷脂結(jié)合蛋白(Annexins);天津正規(guī)外泌體提取試劑價(jià)格可將外泌體吸附并分離出來。
由歐洲多國細(xì)胞外囊泡領(lǐng)域的學(xué)者發(fā)起并成立的國際細(xì)胞外囊泡協(xié)會(huì)(ISEV)于2014年在協(xié)會(huì)會(huì)刊JournalofExtracellularVesicles發(fā)表了一個(gè)指導(dǎo)性意見,也就是我們常說的MISEV2014。2018版《指導(dǎo)要求》進(jìn)行了修訂。2018版的《指導(dǎo)要求》首先討論了對(duì)這些細(xì)胞來源的非細(xì)胞具膜結(jié)構(gòu)如何稱呼。學(xué)者們普遍認(rèn)為應(yīng)當(dāng)使用細(xì)胞外囊泡(extracellularvesicle)來稱呼這些具膜囊泡,當(dāng)我們使用常規(guī)方法分離這些結(jié)構(gòu)時(shí)不推薦使用其他的名稱來稱呼它們。
外泌體(exosome),特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中?,F(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有:肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、瘤細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等。外泌體在免疫中抗原呈遞、瘤的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用。同時(shí),不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA和脂質(zhì)運(yùn)輸來完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介,根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類,包括外泌體、微泡和凋亡小體。其中,外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡,由多種細(xì)胞分泌,內(nèi)含有特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、細(xì)胞因子或遺傳物質(zhì)。來源于不同的組織的外泌體不光具有其特異性蛋白分子,而且還包含其行使功能的關(guān)鍵分子。通過超速離心(120000g/分鐘)20小時(shí)以上才能獲得足夠的外泌體量。
外泌體在肺病進(jìn)程中的作用:肺病細(xì)胞來源外泌體(LCC-exosome)可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進(jìn)一些病癥的生長。據(jù)相關(guān)報(bào)道稱,LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,促進(jìn)一些病癥血管的生成;而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動(dòng)脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進(jìn)肺病的生血管作用。此外,有研究發(fā)現(xiàn),外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達(dá)增加,促使人正常支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)EMT,從而使肺支氣管正常上皮細(xì)胞出現(xiàn)增殖,遷移能力。色譜法。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設(shè)備,應(yīng)用不普遍活細(xì)胞分泌到胞外的囊泡樣小體,含有多種蛋白和核酸分子(DNA、RNA、以及miRNA)。鄭州正規(guī)外泌體提取試劑哪家便宜
外泌體在免疫中抗原呈遞、一些病癥的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用。重慶正規(guī)外泌體提取試劑銷售廠家
外泌體:該研究主要是做了牡蠣基因組測序,并揭示其應(yīng)激適應(yīng)和殼結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性。其中涉及,所鑒定的259種殼蛋白中的84%不是經(jīng)典分泌蛋白;它們可能是細(xì)胞的一部分或被外泌體沉積而來。259個(gè)殼蛋白中的61個(gè)與外泌體數(shù)據(jù)庫中的蛋白質(zhì)匹配,支持了外泌體的存在。在礦化前緣處觀察到含有方解石晶體的細(xì)胞和外泌體樣囊泡,盡管它們?cè)跉ば纬芍械闹匾允怯袪幾h的。這項(xiàng)研究為它們?cè)跉?nèi)的存在及其可能參與殼形成提供了分子證據(jù)。Hedgehog(Hh)蛋白的保守家族作為短距離和長距離分泌的形態(tài)發(fā)生素,在胚胎發(fā)育過程中控制組織構(gòu)型和分化。成熟的Hh攜帶疏水性棕櫚酸和對(duì)其細(xì)胞外擴(kuò)散至關(guān)重要的膽固醇修飾。重慶正規(guī)外泌體提取試劑銷售廠家