二代測(cè)序技術(shù)的一些***研究進(jìn)展② 植物基因組學(xué)研究領(lǐng)域 : 花生四倍體野生種基因組測(cè)序:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)殷冬梅教授團(tuán)隊(duì)和上海交通大學(xué)韋朝春教授團(tuán)隊(duì)聯(lián)合發(fā)布了花生四倍體野生種近乎完整基因組 amon2.0 版本。該研究結(jié)合 ONT 超長(zhǎng)讀段、二代測(cè)序和 Hi-C 等多種測(cè)序技術(shù),使基因組的連續(xù)性、完整性和準(zhǔn)確性都得到了顯著提高,為花生的遺傳馴化和分子育種提供了重要的基因組數(shù)據(jù)信息資源。 長(zhǎng)雄野生稻基因組解析:中科院昆明動(dòng)物所王文研究組與云南省農(nóng)科院糧食作物研究所胡鳳益研究組等中外機(jī)構(gòu)合作,利用二代測(cè)序技術(shù)成功組裝出高質(zhì)量的長(zhǎng)雄野生稻基因組,并對(duì)其與近緣物種的分歧時(shí)間、基因的收...
③二代測(cè)序一般多久出結(jié)果? 3、測(cè)序深度和覆蓋度要求 測(cè)序深度是指每個(gè)堿基被測(cè)序的平均次數(shù),覆蓋度是指測(cè)序獲得的堿基占整個(gè)基因組(或目標(biāo)區(qū)域)的比例。如果要求高測(cè)序深度和高覆蓋度,比如進(jìn)行**全基因組的深度測(cè)序(測(cè)序深度可能達(dá)到100X甚至更高),需要更長(zhǎng)的測(cè)序時(shí)間來(lái)獲取足夠的數(shù)據(jù),并且后續(xù)的數(shù)據(jù)處理和分析也會(huì)更復(fù)雜。而對(duì)于一些簡(jiǎn)單的基因篩查項(xiàng)目,測(cè)序深度要求較低(如10X-20X),相應(yīng)的測(cè)序和分析時(shí)間會(huì)縮短。例如,低深度全外顯子測(cè)序用于篩查常見突變,測(cè)序可能在3-5天完成;而高深度的全外顯子測(cè)序用于檢測(cè)低頻體細(xì)胞突變,可能需要7-10天甚至更久。 二代測(cè)序是一種能夠同時(shí)對(duì)數(shù)...
二代測(cè)序——基因組測(cè)序該測(cè)幾個(gè)G?② 人類全外顯子組測(cè)序 人類全外顯子組*占基因組的1%-2%,大小約為30M-60M左右,但通常需要較高的測(cè)序深度來(lái)確保外顯子區(qū)域的變異檢測(cè)準(zhǔn)確性,一般測(cè)序深度在100X-200X之間,數(shù)據(jù)量大約在3G-12G左右。全外顯子組測(cè)序主要關(guān)注編碼蛋白質(zhì)的外顯子區(qū)域,能夠高效地檢測(cè)出與疾病相關(guān)的基因突變,常用于遺傳病的診斷、**基因突變篩查等研究。 動(dòng)植物基因組測(cè)序 常見動(dòng)植物:對(duì)于一些常見的動(dòng)植物物種,如水稻、小鼠等,其基因組大小與人類基因組相近或更小。全基因組測(cè)序時(shí),測(cè)序深度一般在10X-30X左右,數(shù)據(jù)量在30G-90G之間。如果是...
不同二代測(cè)序技術(shù)平臺(tái)的速度 Illumina 測(cè)序平臺(tái):這是目前市場(chǎng)上應(yīng)用較為***的二代測(cè)序平臺(tái)之一,其測(cè)序速度較快。例如 Illumina NovaSeq 系列,一次運(yùn)行可以在 1-3 天內(nèi)產(chǎn)生大量的數(shù)據(jù),通量可達(dá)數(shù)億甚至數(shù)十億條讀長(zhǎng),能夠滿足大規(guī)?;蚪M學(xué)研究和臨床檢測(cè)的需求。 Roche 454 測(cè)序平臺(tái):Roche 454 測(cè)序系統(tǒng)的測(cè)序速度也較快,其特點(diǎn)是測(cè)序片段比較長(zhǎng),高質(zhì)量的讀長(zhǎng)能達(dá)到 400bp 左右,一次運(yùn)行可以在 24 小時(shí)左右完成對(duì)一定數(shù)量樣本的測(cè)序。 BGISEQ 系列:華大智造的 BGISEQ 系列測(cè)序儀在速度上也有出色表現(xiàn),如全球二代測(cè)序速度...
二代測(cè)序的建庫(kù)步驟① 一、樣本準(zhǔn)備 樣本采集:根據(jù)研究目的采**適的樣本,如血液、組織、細(xì)胞等。例如,在**研究中,可能會(huì)采集**組織和對(duì)應(yīng)的正常組織。對(duì)于血液樣本,一般采用靜脈穿刺采集外周血,收集在含有抗凝劑(如EDTA)的**管中,以防止血液凝固。組織樣本則需要在合適的條件下盡快處理,以保持核酸的完整性。如果是新鮮組織,可將其置于液氮中速凍,然后保存在-80℃冰箱中。 核酸提取:從樣本中提取高質(zhì)量的DNA或RNA。對(duì)于DNA提取,常用的方法有酚-氯仿抽提法和商業(yè)化的DNA提取試劑盒。酚-氯仿抽提法是利用酚和氯仿使蛋白質(zhì)變性,離心后使DNA處于水相,從而實(shí)現(xiàn)分離。試劑盒...
③二代測(cè)序一般多久出結(jié)果? 3、測(cè)序深度和覆蓋度要求 測(cè)序深度是指每個(gè)堿基被測(cè)序的平均次數(shù),覆蓋度是指測(cè)序獲得的堿基占整個(gè)基因組(或目標(biāo)區(qū)域)的比例。如果要求高測(cè)序深度和高覆蓋度,比如進(jìn)行**全基因組的深度測(cè)序(測(cè)序深度可能達(dá)到100X甚至更高),需要更長(zhǎng)的測(cè)序時(shí)間來(lái)獲取足夠的數(shù)據(jù),并且后續(xù)的數(shù)據(jù)處理和分析也會(huì)更復(fù)雜。而對(duì)于一些簡(jiǎn)單的基因篩查項(xiàng)目,測(cè)序深度要求較低(如10X-20X),相應(yīng)的測(cè)序和分析時(shí)間會(huì)縮短。例如,低深度全外顯子測(cè)序用于篩查常見突變,測(cè)序可能在3-5天完成;而高深度的全外顯子測(cè)序用于檢測(cè)低頻體細(xì)胞突變,可能需要7-10天甚至更久。 二代測(cè)序常用于醫(yī)學(xué)篩查或診...
二代測(cè)序——基因組測(cè)序該測(cè)幾個(gè)G?③ 基因組測(cè)序所需的測(cè)序量通常用數(shù)據(jù)量來(lái)衡量,一般以 G 為單位,不同的測(cè)序目的和基因組類型所需要的測(cè)序量有所不同。 微生物基因組測(cè)序細(xì)菌基因組: 細(xì)菌基因組 相對(duì)較小,一般在1M-10M之間,測(cè)序深度通常在50X-100X左右,數(shù)據(jù)量在0.05G-1G左右即可滿足基本的基因組組裝和變異檢測(cè)需求。 ***基因組:***基因組大小差異較大,從幾M到上百M(fèi)都有。對(duì)于較小的***基因組,測(cè)序深度在30X-50X左右,數(shù)據(jù)量在0.1G-5G之間;而對(duì)于較大的***基因組,可能需要適當(dāng)降低測(cè)序深度至10X-20X,數(shù)據(jù)量在1G-20G左...
二代測(cè)序—全外顯子測(cè)序的應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)學(xué)領(lǐng)域:1、疾病診斷:用于診斷各種遺傳性疾病,包括單基因遺傳?。ㄈ缒倚岳w維化、杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良等)和復(fù)雜疾?。ㄈ?*、心血管疾病等)。在**研究中,通過對(duì)**組織和正常組織進(jìn)行全外顯子測(cè)序,可以發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞中的體細(xì)胞突變,這些突變可能是導(dǎo)致**發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵因素,有助于醫(yī)生制定個(gè)性化的治療方案。2、藥物研發(fā):幫助研究人員了解藥物靶點(diǎn)的基因變異情況。例如,如果發(fā)現(xiàn)某些患者的藥物靶點(diǎn)基因外顯子區(qū)域存在突變,可能會(huì)影響藥物的療效,從而可以針對(duì)性地開發(fā)新的藥物或者調(diào)整藥物的使用劑量和方式。 遺傳學(xué)研究:用于研究人類群體的遺傳多樣性,通過對(duì)不同人群的外...
二代測(cè)序——應(yīng)用領(lǐng)域類問題 二代測(cè)序在**研究中的應(yīng)用有哪些:可用于**的早期篩查,通過檢測(cè)血液中的循環(huán)**DNA;進(jìn)行**的診斷分型,確定**的基因突變特征;評(píng)估***效果,監(jiān)測(cè)***過程中腫瘤細(xì)胞的基因變化;預(yù)測(cè)**的預(yù)后,分析與預(yù)后相關(guān)的基因標(biāo)志物;還可用于尋找**的新靶點(diǎn),為靶向***藥物的研發(fā)提供依據(jù)。二代測(cè)序在遺傳病診斷中的優(yōu)勢(shì)和局限性:優(yōu)勢(shì)在于能夠快速、***地檢測(cè)基因組中的變異,包括單核苷酸變異、小插入缺失、拷貝數(shù)變異等,提高了遺傳病的診斷率。局限性在于對(duì)于復(fù)雜基因組區(qū)域的檢測(cè)可能存在困難,如高度重復(fù)序列區(qū)域;檢測(cè)到的變異需要進(jìn)一步的功能驗(yàn)證和臨床解讀,部分變異的致病...
二代測(cè)序的建庫(kù)步驟② 二、片段化處理 物理方法:超聲破碎是常用的物理片段化方法。它通過超聲波的高頻振動(dòng)將核酸分子打斷成合適大小的片段。例如,在一些文庫(kù)構(gòu)建中,將DNA樣本置于超聲破碎儀中,通過調(diào)整超聲功率和時(shí)間,可以將DNA片段化到幾百堿基對(duì)(bp)的長(zhǎng)度范圍,一般在150-300bp左右,這符合二代測(cè)序的讀長(zhǎng)要求。超聲破碎的優(yōu)點(diǎn)是片段大小比較均勻,但操作需要優(yōu)化超聲參數(shù),否則可能會(huì)導(dǎo)致過度破碎或片段大小不一致。 酶切方法:利用限制性內(nèi)切酶進(jìn)行片段化。限制性內(nèi)切酶能夠識(shí)別特定的DNA序列,并在這些序列處切割DNA。例如,用EcoRⅠ酶可以識(shí)別GAATTC序列并進(jìn)行切割。通...
二代測(cè)序的建庫(kù)步驟② 二、片段化處理 物理方法:超聲破碎是常用的物理片段化方法。它通過超聲波的高頻振動(dòng)將核酸分子打斷成合適大小的片段。例如,在一些文庫(kù)構(gòu)建中,將DNA樣本置于超聲破碎儀中,通過調(diào)整超聲功率和時(shí)間,可以將DNA片段化到幾百堿基對(duì)(bp)的長(zhǎng)度范圍,一般在150-300bp左右,這符合二代測(cè)序的讀長(zhǎng)要求。超聲破碎的優(yōu)點(diǎn)是片段大小比較均勻,但操作需要優(yōu)化超聲參數(shù),否則可能會(huì)導(dǎo)致過度破碎或片段大小不一致。 酶切方法:利用限制性內(nèi)切酶進(jìn)行片段化。限制性內(nèi)切酶能夠識(shí)別特定的DNA序列,并在這些序列處切割DNA。例如,用EcoRⅠ酶可以識(shí)別GAATTC序列并進(jìn)行切割。通...
對(duì)于二代測(cè)序的概念是什么? 第二代測(cè)序(Next-generationsequencing,NGS)又稱為高通量測(cè)序(High-throughputsequencing),是基于PCR和基因芯片發(fā)展而來(lái)的DNA測(cè)序技術(shù)。我們都知道一代測(cè)序?yàn)楹铣山K止測(cè)序,而二代測(cè)序開創(chuàng)性的引入了可逆終止末端,從而實(shí)現(xiàn)邊合成邊測(cè)序(SequencingbySynthesis)。二代測(cè)序在DNA復(fù)制過程中通過捕捉新添加的堿基所攜帶的特殊標(biāo)記(一般為熒光分子標(biāo)記)來(lái)確定DNA的序列,現(xiàn)有的技術(shù)平臺(tái)主要包括Roche的454FLX、lllumina的Miseq/Hiseg等。2005年,羅氏推出了二代測(cè)序儀羅...
二代測(cè)序的建庫(kù)步驟④ 四、接頭連接 接頭選擇:根據(jù)測(cè)序平臺(tái)的要求選擇合適的接頭。不同的二代測(cè)序平臺(tái)(如Illumina、IonTorrent等)有各自特定設(shè)計(jì)的接頭。這些接頭包含與測(cè)序平臺(tái)的流動(dòng)池(flowcell)表面互補(bǔ)的序列,用于將DNA片段固定在測(cè)序芯片上,還包含用于區(qū)分不同樣本的索引序列(index)等。 連接反應(yīng):使用DNA連接酶將接頭與DNA片段連接。T4DNA連接酶是常用的連接酶,它可以在ATP(三磷酸腺苷)存在下,將接頭的5'-磷酸基團(tuán)與DNA片段的3'-羥基形成磷酸二酯鍵,從而將接頭連接到DNA片段的兩端。連接反應(yīng)的條件(如溫度、連接酶的用量、反應(yīng)時(shí)間...
二代測(cè)序的建庫(kù)步驟② 二、片段化處理 物理方法:超聲破碎是常用的物理片段化方法。它通過超聲波的高頻振動(dòng)將核酸分子打斷成合適大小的片段。例如,在一些文庫(kù)構(gòu)建中,將DNA樣本置于超聲破碎儀中,通過調(diào)整超聲功率和時(shí)間,可以將DNA片段化到幾百堿基對(duì)(bp)的長(zhǎng)度范圍,一般在150-300bp左右,這符合二代測(cè)序的讀長(zhǎng)要求。超聲破碎的優(yōu)點(diǎn)是片段大小比較均勻,但操作需要優(yōu)化超聲參數(shù),否則可能會(huì)導(dǎo)致過度破碎或片段大小不一致。 酶切方法:利用限制性內(nèi)切酶進(jìn)行片段化。限制性內(nèi)切酶能夠識(shí)別特定的DNA序列,并在這些序列處切割DNA。例如,用EcoRⅠ酶可以識(shí)別GAATTC序列并進(jìn)行切割。通...
二代測(cè)序—全外顯子測(cè)序的局限性 不能檢測(cè)所有的遺傳變異:它只能檢測(cè)外顯子區(qū)域的變異,對(duì)于非外顯子區(qū)域(如內(nèi)含子、基因間區(qū)域)的變異無(wú)法檢測(cè),而這些區(qū)域的某些變異也可能對(duì)基因的表達(dá)和功能產(chǎn)生重要影響,如內(nèi)含子中的突變可能影響基因的剪接。 數(shù)據(jù)分析復(fù)雜:全外顯子測(cè)序會(huì)產(chǎn)生大量的數(shù)據(jù),需要復(fù)雜的生物信息學(xué)工具和方法來(lái)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。包括數(shù)據(jù)的質(zhì)量控制、變異的檢測(cè)和注釋、致病性的評(píng)估等多個(gè)環(huán)節(jié),其中任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題都可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)論。 二代測(cè)序的使用場(chǎng)景都有哪些?云南二代測(cè)序應(yīng)用 一代、二代、三代測(cè)序的技術(shù)原理和技術(shù)特點(diǎn)分別是什么? 技術(shù)原理: 一代—雙脫氧終止法 ...
二代測(cè)序技術(shù)的一些***研究進(jìn)展③ 技術(shù)優(yōu)化與創(chuàng)新領(lǐng)域 測(cè)序準(zhǔn)確性提高:通過改進(jìn)測(cè)序試劑、優(yōu)化測(cè)序反應(yīng)條件以及開發(fā)更先進(jìn)的數(shù)據(jù)分析算法,二代測(cè)序技術(shù)的準(zhǔn)確性不斷提升,能夠更可靠地檢測(cè)到低頻變異和復(fù)雜結(jié)構(gòu)變異等。 成本進(jìn)一步降低:隨著技術(shù)的不斷成熟和市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)的加劇,二代測(cè)序的成本持續(xù)下降,使得更多的研究機(jī)構(gòu)和臨床實(shí)驗(yàn)室能夠廣泛應(yīng)用該技術(shù),推動(dòng)了基因組學(xué)研究和臨床診斷的發(fā)展。 法醫(yī)學(xué)領(lǐng)域 遺傳標(biāo)記檢測(cè):現(xiàn)有的二代測(cè)序技術(shù)平臺(tái)能夠完成 STR 遺傳標(biāo)記、SNP 遺傳標(biāo)記、mtDNA 及 mRNA 等遺傳標(biāo)記的測(cè)序,為法醫(yī)學(xué)個(gè)體識(shí)別、親緣關(guān)系鑒定等提供了更豐富、準(zhǔn)確的...
二代測(cè)序技術(shù)在不同人群中的準(zhǔn)確性有何差異① **患者 優(yōu)勢(shì):對(duì)于**患者,二代測(cè)序技術(shù)準(zhǔn)確性相對(duì)較高,在**的診斷、***及監(jiān)測(cè)等方面應(yīng)用***。比如肺*患者,通過檢測(cè)**組織或血液中的基因突變,可準(zhǔn)確找到如EGFR、ALK等驅(qū)動(dòng)基因突變,為靶向***提供依據(jù),其準(zhǔn)確率通常在90%以上。在軟組織**中,二代測(cè)序能檢測(cè)到**組織的基因信息,包括突變基因、基因表達(dá)情況等,幫助醫(yī)生更準(zhǔn)確地診斷病情,并制定個(gè)性化的***方案。 局限性:腫瘤細(xì)胞的異質(zhì)性會(huì)影響檢測(cè)準(zhǔn)確性,若樣本中腫瘤細(xì)胞比例低或存在多種類型細(xì)胞,可能導(dǎo)致部分基因突變漏檢,影響對(duì)**基因組全貌的評(píng)估。此外,血液樣本中...
關(guān)于二代測(cè)序的簡(jiǎn)介: 二代測(cè)序技術(shù)(Next-Generation Seguencing,NGS)也稱為高通量測(cè)序技術(shù),是一種能夠同時(shí)對(duì)數(shù)百萬(wàn)甚至數(shù)十億個(gè) DNA片段進(jìn)行測(cè)序的方法。與傳統(tǒng)的桑格測(cè)序相比二代測(cè)序技術(shù)具有高通量、高準(zhǔn)確性、高靈敏度和低成本等優(yōu)勢(shì)。 二代測(cè)序技術(shù)在大幅提高了測(cè)序速度的同時(shí),大幅度的降低了測(cè)序成本,保持了高準(zhǔn)確性,以前完成一個(gè)人類基因組的測(cè)序需要3年時(shí)間,而使用二代測(cè)序技術(shù)則需要1周,但其序列讀長(zhǎng)方面比起一代測(cè)序技術(shù)則要短很多,大多只100bp-150bp。 二代測(cè)序需要分析嗎?云南嘉安健達(dá)二代測(cè)序運(yùn)用 宏基因組二代測(cè)序,你了解多少? ...
二代測(cè)序的應(yīng)用領(lǐng)域有哪些? 基因組學(xué)研究:用于全基因組測(cè)序,快速獲取物種的基因組序列信息,研究基因組結(jié)構(gòu)、變異、進(jìn)化等;進(jìn)行全外顯子組測(cè)序,重點(diǎn)關(guān)注編碼蛋白質(zhì)的外顯子區(qū)域,發(fā)現(xiàn)與疾病相關(guān)的基因突變。 轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究:通過對(duì)轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行測(cè)序,可分析基因的表達(dá)水平、可變剪接、新轉(zhuǎn)錄本發(fā)現(xiàn)等,有助于深入了解基因在不同生理和病理狀態(tài)下的表達(dá)調(diào)控機(jī)制。 疾病診斷與***:在遺傳病診斷中,能夠檢測(cè)出導(dǎo)致遺傳病的基因突變,為疾病的診斷、遺傳咨詢和產(chǎn)前診斷提供依據(jù);在**研究中,可分析腫瘤細(xì)胞的基因突變、拷貝數(shù)變異、基因融合等,為**的早期診斷、靶向***和預(yù)后評(píng)估提供支持。 藥物研發(fā)...
二代測(cè)序——基因組測(cè)序該測(cè)幾個(gè)G?② 人類全外顯子組測(cè)序 人類全外顯子組*占基因組的1%-2%,大小約為30M-60M左右,但通常需要較高的測(cè)序深度來(lái)確保外顯子區(qū)域的變異檢測(cè)準(zhǔn)確性,一般測(cè)序深度在100X-200X之間,數(shù)據(jù)量大約在3G-12G左右。全外顯子組測(cè)序主要關(guān)注編碼蛋白質(zhì)的外顯子區(qū)域,能夠高效地檢測(cè)出與疾病相關(guān)的基因突變,常用于遺傳病的診斷、**基因突變篩查等研究。 動(dòng)植物基因組測(cè)序 常見動(dòng)植物:對(duì)于一些常見的動(dòng)植物物種,如水稻、小鼠等,其基因組大小與人類基因組相近或更小。全基因組測(cè)序時(shí),測(cè)序深度一般在10X-30X左右,數(shù)據(jù)量在30G-90G之間。如果是...
二代測(cè)序—全外顯子測(cè)序的優(yōu)勢(shì) 針對(duì)性強(qiáng):它主要聚焦于基因組中編碼蛋白質(zhì)的區(qū)域,這部分區(qū)域雖然只占整個(gè)基因組的 1 - 2% 左右,但包含了大部分與疾病相關(guān)的突變。例如,在研究孟德爾遺傳病時(shí),很多致病突變都位于外顯子區(qū)域,通過全外顯子測(cè)序可以更高效地找到這些突變。 成本效益高:相比于全基因組測(cè)序,全外顯子測(cè)序的成本相對(duì)較低。因?yàn)樗恍枰獙?duì)整個(gè)基因組(包括大量的非編碼區(qū)域)進(jìn)行測(cè)序,在一定程度上減少了數(shù)據(jù)量和測(cè)序成本,同時(shí)又能獲取大部分有重要功能意義的遺傳信息。 二代測(cè)序的成本比一代測(cè)序高嗎?云南嘉安健達(dá)二代測(cè)序技術(shù) 二代測(cè)序的建庫(kù)步驟⑥ 六、文庫(kù)質(zhì)量檢測(cè) 定量檢測(cè):...
二代測(cè)序的建庫(kù)步驟② 二、片段化處理 物理方法:超聲破碎是常用的物理片段化方法。它通過超聲波的高頻振動(dòng)將核酸分子打斷成合適大小的片段。例如,在一些文庫(kù)構(gòu)建中,將DNA樣本置于超聲破碎儀中,通過調(diào)整超聲功率和時(shí)間,可以將DNA片段化到幾百堿基對(duì)(bp)的長(zhǎng)度范圍,一般在150-300bp左右,這符合二代測(cè)序的讀長(zhǎng)要求。超聲破碎的優(yōu)點(diǎn)是片段大小比較均勻,但操作需要優(yōu)化超聲參數(shù),否則可能會(huì)導(dǎo)致過度破碎或片段大小不一致。 酶切方法:利用限制性內(nèi)切酶進(jìn)行片段化。限制性內(nèi)切酶能夠識(shí)別特定的DNA序列,并在這些序列處切割DNA。例如,用EcoRⅠ酶可以識(shí)別GAATTC序列并進(jìn)行切割。通...
二代測(cè)序——蛋白質(zhì)甲基化 概念及位置:蛋白質(zhì)甲基化是指在蛋白質(zhì)的氨基酸殘基上添加甲基基團(tuán)。常見的甲基化修飾位點(diǎn)包括精氨酸(Arg)和賴氨酸(Lys)殘基。 作用 1、調(diào)節(jié)蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用:例如,組蛋白(染色體的組成成分)的甲基化可以改變?nèi)旧|(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能,影響基因的可及性。當(dāng)組蛋白 H3 的賴氨酸殘基(如 H3K4、H3K9 等)發(fā)生甲基化時(shí),會(huì)招募不同的蛋白質(zhì)復(fù)合物,從而***或抑制基因轉(zhuǎn)錄。2、調(diào)節(jié)酶的活性:某些酶的活性可以通過蛋白質(zhì)甲基化來(lái)調(diào)節(jié)。甲基化可能改變酶的活性中心的結(jié)構(gòu)或者影響其與底物的結(jié)合能力。 檢測(cè)方法:質(zhì)譜分析:這是一種***用于檢測(cè)蛋...
一代、二代、三代測(cè)序的區(qū)別分別是什么? 一代測(cè)序是上世紀(jì)70年代由Sanger和Coulson開創(chuàng)的DNA雙脫氧鏈終止法測(cè)序,也稱為Sanger測(cè)序。 二代測(cè)序技術(shù)(NGS)是為了改進(jìn)一代測(cè)序通量過低的問題而出現(xiàn)的,能夠同時(shí)對(duì)上百萬(wàn)甚至數(shù)十億個(gè)DNA分子進(jìn)行測(cè)序?qū)崿F(xiàn)了大規(guī)模、高通量測(cè)序的目標(biāo)。 三代測(cè)序主要有兩種技術(shù)PacBio公司的SMRT和Oxford Nanopore 的納米孔單分子測(cè)序技術(shù),這兩種技術(shù)的測(cè)序讀長(zhǎng)都可以達(dá)到幾-kb的級(jí)別,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于二代測(cè)序技術(shù)。 二代測(cè)序即高通量測(cè)序技術(shù)。安徽二代測(cè)序應(yīng)用 二代測(cè)序——技術(shù)原理類問題 二代測(cè)序與一代測(cè)序的區(qū)別是...
二代測(cè)序不同應(yīng)用場(chǎng)景下的速度有多快? 病原微生物檢測(cè):一般來(lái)說(shuō),二代測(cè)序用于檢測(cè)病原微生物時(shí),能夠在幾個(gè)小時(shí)到一天左右出結(jié)果。比如在快速檢測(cè)血液中的病原微生物時(shí),通常可以在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)獲得檢測(cè)結(jié)果,相比傳統(tǒng)的血液培養(yǎng)方法,時(shí)間大幅縮短,傳統(tǒng)血液培養(yǎng)一般需要幾天到一周的時(shí)間 。 全基因組測(cè)序:如果是對(duì)人類全基因組進(jìn)行測(cè)序,以目前的技術(shù)水平,使用二代測(cè)序技術(shù)完成一個(gè)人的全基因組測(cè)序,一般需要 1-2 天左右的時(shí)間。而在十幾年前,人類全基因組測(cè)序計(jì)劃***完成時(shí),耗費(fèi)了大量的時(shí)間和精力,相比之下二代測(cè)序技術(shù)的速度提升***。 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序:轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的時(shí)間相對(duì)較短,一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)可...
③二代測(cè)序一般多久出結(jié)果? 3、測(cè)序深度和覆蓋度要求 測(cè)序深度是指每個(gè)堿基被測(cè)序的平均次數(shù),覆蓋度是指測(cè)序獲得的堿基占整個(gè)基因組(或目標(biāo)區(qū)域)的比例。如果要求高測(cè)序深度和高覆蓋度,比如進(jìn)行**全基因組的深度測(cè)序(測(cè)序深度可能達(dá)到100X甚至更高),需要更長(zhǎng)的測(cè)序時(shí)間來(lái)獲取足夠的數(shù)據(jù),并且后續(xù)的數(shù)據(jù)處理和分析也會(huì)更復(fù)雜。而對(duì)于一些簡(jiǎn)單的基因篩查項(xiàng)目,測(cè)序深度要求較低(如10X-20X),相應(yīng)的測(cè)序和分析時(shí)間會(huì)縮短。例如,低深度全外顯子測(cè)序用于篩查常見突變,測(cè)序可能在3-5天完成;而高深度的全外顯子測(cè)序用于檢測(cè)低頻體細(xì)胞突變,可能需要7-10天甚至更久。 單細(xì)胞測(cè)序也是二代測(cè)序。蘇...
二代測(cè)序—全外顯子測(cè)序的局限性 不能檢測(cè)所有的遺傳變異:它只能檢測(cè)外顯子區(qū)域的變異,對(duì)于非外顯子區(qū)域(如內(nèi)含子、基因間區(qū)域)的變異無(wú)法檢測(cè),而這些區(qū)域的某些變異也可能對(duì)基因的表達(dá)和功能產(chǎn)生重要影響,如內(nèi)含子中的突變可能影響基因的剪接。 數(shù)據(jù)分析復(fù)雜:全外顯子測(cè)序會(huì)產(chǎn)生大量的數(shù)據(jù),需要復(fù)雜的生物信息學(xué)工具和方法來(lái)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。包括數(shù)據(jù)的質(zhì)量控制、變異的檢測(cè)和注釋、致病性的評(píng)估等多個(gè)環(huán)節(jié),其中任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題都可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)論。 二代測(cè)序又可以稱之為什么?江蘇嘉安健達(dá)二代測(cè)序應(yīng)用 ①二代測(cè)序一般多久出結(jié)果? 二代測(cè)序(Next-GenerationSequencing...
二代測(cè)序——應(yīng)用領(lǐng)域類問題 二代測(cè)序在**研究中的應(yīng)用有哪些:可用于**的早期篩查,通過檢測(cè)血液中的循環(huán)**DNA;進(jìn)行**的診斷分型,確定**的基因突變特征;評(píng)估***效果,監(jiān)測(cè)***過程中腫瘤細(xì)胞的基因變化;預(yù)測(cè)**的預(yù)后,分析與預(yù)后相關(guān)的基因標(biāo)志物;還可用于尋找**的新靶點(diǎn),為靶向***藥物的研發(fā)提供依據(jù)。二代測(cè)序在遺傳病診斷中的優(yōu)勢(shì)和局限性:優(yōu)勢(shì)在于能夠快速、***地檢測(cè)基因組中的變異,包括單核苷酸變異、小插入缺失、拷貝數(shù)變異等,提高了遺傳病的診斷率。局限性在于對(duì)于復(fù)雜基因組區(qū)域的檢測(cè)可能存在困難,如高度重復(fù)序列區(qū)域;檢測(cè)到的變異需要進(jìn)一步的功能驗(yàn)證和臨床解讀,部分變異的致病...
二代測(cè)序技術(shù)在不同人群中的準(zhǔn)確性有何差異④ ***性疾病患者 優(yōu)勢(shì):病原學(xué)二代測(cè)序可準(zhǔn)確檢測(cè)病原體的基因序**定病原體種類和基因型,為***性疾病的診斷和***提供依據(jù),在檢測(cè)罕見病原體、病毒***等方面具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì),有助于快速明確診斷,尤其是對(duì)于一些傳統(tǒng)檢測(cè)方法難以診斷的***性疾病,如不明原因的發(fā)熱、肺炎、腦膜炎等。 局限性:對(duì)于低豐度病原體,可能出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。樣本質(zhì)量、測(cè)序深度和數(shù)據(jù)分析方法等因素也會(huì)影響準(zhǔn)確性,若樣本中病原體含量低或雜質(zhì)多,可能導(dǎo)致檢測(cè)失敗或結(jié)果不準(zhǔn)確 一代、二代、三代測(cè)序的區(qū)別是什么?海南哪里有二代測(cè)序應(yīng)用 二代測(cè)序的優(yōu)勢(shì)和劣勢(shì)分別有...
二代測(cè)序的建庫(kù)步驟⑤ 五、文庫(kù)富集(可選步驟) PCR富集:對(duì)于一些起始樣本量較少或者連接效率較低的情況,可能需要進(jìn)行PCR富集。利用與接頭序列互補(bǔ)的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,增加文庫(kù)中目標(biāo)DNA片段的數(shù)量。在PCR反應(yīng)中,需要注意引物的設(shè)計(jì)要與接頭序列準(zhǔn)確匹配,并且要優(yōu)化PCR循環(huán)數(shù),避免過度擴(kuò)增導(dǎo)致文庫(kù)多樣性降低或引入PCR偏差。一般會(huì)通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定合適的PCR循環(huán)數(shù),例如從10-15個(gè)循環(huán)開始嘗試,通過檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物的量和質(zhì)量來(lái)調(diào)整循環(huán)數(shù)。 二代測(cè)序廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)研發(fā)。廣西二代測(cè)序提供 一代、二代、三代測(cè)序的區(qū)別分別是什么? 一代測(cè)序是上世紀(jì)70年代由Sanger和Cou...