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石蠟切片優(yōu)點(diǎn)較多，但在制片過(guò)程中要經(jīng)過(guò)酒精、二甲苯等有機(jī)溶劑處理，組織內(nèi)抗原活性失去較多，有人采用冷凍干燥包埋法（Freezedryingembeddingmethed），可以保存組織內(nèi)可溶性物質(zhì)，防止蛋白變性和酶的失活，從而減少了抗原的丟失。該法是將新鮮組織...

病理切片的制作步驟注意事項(xiàng)：負(fù)責(zé)組織處理的技術(shù)員從醫(yī)生手中收標(biāo)本時(shí)，必須清點(diǎn)查對(duì)，無(wú)誤后簽收；組織脫水、包埋、切片、染色、封片等，均應(yīng)按照技術(shù)規(guī)范進(jìn)行，對(duì)每道工序，都必須查對(duì)組織數(shù)量，檢查是否遺漏、丟失；大小標(biāo)本必須分開(kāi)處理，大標(biāo)本固定時(shí)間不得少于6小時(shí)；小標(biāo)...

CyFlow Analyser倍性分析儀：1、染色速度快：DNA倍體標(biāo)本上機(jī)檢測(cè)小于2分鐘 。2、配備365nm光源，高效激發(fā)DAPI染料，避免RNA的影響和次生代謝物的影響 。3、配備532nm光源，高效激發(fā)PI染料，激發(fā)效率遠(yuǎn)超488nm和561激光器。 ...

較簡(jiǎn)單的流式細(xì)胞儀可用于檢測(cè)細(xì)胞特征，包括細(xì)胞大小、細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞周期和細(xì)胞表型分析等。該技術(shù)可為研究人員提供單個(gè)細(xì)胞的高度特異性信息。從表達(dá)綠色熒光蛋白的細(xì)胞系到來(lái)源于組織的異質(zhì)細(xì)胞群體，都是典型的流式樣品類(lèi)型。實(shí)現(xiàn)高效流式細(xì)胞分析的關(guān)鍵要求是將樣品制備成單...

流式細(xì)胞分析是一種現(xiàn)代分析技術(shù)，其在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被范圍廣使用，具有“實(shí)驗(yàn)室的 CT”之稱(chēng)。雖然流式細(xì)胞術(shù)在植物研究中起步較晚，但由于它具有制樣簡(jiǎn)單用量少、操作高效快速且數(shù)據(jù)重復(fù)性高等優(yōu)勢(shì)，已逐漸發(fā)展為一種常用的植物基因組大小或植物倍性研究方法。植物的核 D...

較簡(jiǎn)單的流式細(xì)胞儀可用于檢測(cè)細(xì)胞特征，包括細(xì)胞大小、細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞周期和細(xì)胞表型分析等。該技術(shù)可為研究人員提供單個(gè)細(xì)胞的高度特異性信息。從表達(dá)綠色熒光蛋白的細(xì)胞系到來(lái)源于組織的異質(zhì)細(xì)胞群體，都是典型的流式樣品類(lèi)型。實(shí)現(xiàn)高效流式細(xì)胞分析的關(guān)鍵要求是將樣品制備成單...

流式細(xì)胞儀主要由流動(dòng)室及液流系統(tǒng)、激光器及光學(xué)系統(tǒng)、光電管及檢測(cè)系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)及分析系統(tǒng)組成。流式細(xì)胞儀的流體系統(tǒng)負(fù)責(zé)將樣品從樣品管轉(zhuǎn)移到流動(dòng)池。一旦通過(guò)流動(dòng)池（并通過(guò)激光束），樣品將被分選出來(lái)（在細(xì)胞分選儀中）或移到廢液中。光學(xué)系統(tǒng)的元件包括激發(fā)光源、透鏡和濾...

CyFlow Ploidy Analysere倍性分析儀一機(jī)全能：1、特殊設(shè)計(jì)，專(zhuān)為醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)、育種及水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域提供完美的倍性和周期解決方案2、配備365nm光源，高效激發(fā)DAPI染料，避免RNA的影響和次生代謝物的影響3、配備532nm光源，高效激發(fā)P...

CyFlow Ploidy Analyser Demo倍性分析儀注意事項(xiàng)：1、儀器的外殼不要隨意打開(kāi)；、2實(shí)驗(yàn)樣品的前處理要和儀器盡量避開(kāi)，比方液體飛濺損傷儀器；3、上機(jī)操作請(qǐng)一定要進(jìn)行應(yīng)用培訓(xùn)，或者請(qǐng)參加過(guò)培訓(xùn)的老師、同學(xué)進(jìn)行指導(dǎo)，切不可單獨(dú)上機(jī)；、4制作好...

倍性分析儀的優(yōu)勢(shì)：1、檢測(cè)范圍廣，可檢測(cè)顆粒范圍為50nm-200um；2、型號(hào)選擇多，更多元化的選擇，可根據(jù)用戶(hù)需求量身定制3、激光干擾少，空間立體激發(fā)，多個(gè)光源互不干擾4、測(cè)試結(jié)果準(zhǔn)，參數(shù)更優(yōu)，有較高效的532nm的激光器適用于PI染料，高靈敏度的激光光源...

作為時(shí)下的熱點(diǎn)技術(shù)，數(shù)字PCR是將核酸樣品分配到大量單獨(dú)、平行的微反應(yīng)單元（nL，納升級(jí)別）中，使得每個(gè)反應(yīng)單元中盡可能含有1個(gè)模板分子，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行擴(kuò)增、檢測(cè)和分布統(tǒng)計(jì)，從而實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)分子的比較 計(jì)數(shù)。（圖：數(shù)字PCR技術(shù)原理）根據(jù)微反應(yīng)單元的不同形式，數(shù)...

數(shù)字PCR系統(tǒng)的分散方式?jīng)Q定了分散數(shù)量，其結(jié)果基于統(tǒng)計(jì)的方法進(jìn)行定量，增加反應(yīng)單元數(shù)量（統(tǒng)計(jì)樣本量），可以增加其檢測(cè)的容量和動(dòng)態(tài)檢測(cè)線(xiàn)性范圍達(dá)到和qPCR相近的動(dòng)態(tài)范圍，同時(shí)減小一個(gè)反應(yīng)單元中包含多個(gè)分子所造成的誤差，達(dá)到提高靈敏度和準(zhǔn)確度。影響dPCR定量結(jié)...

數(shù)字PCR產(chǎn)品的發(fā)展，為不同場(chǎng)景下的多樣化核酸檢測(cè)需求提供了新的思路，尤其是在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)方面，在 性疾病早期檢測(cè)、病癥的液體活檢、無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢查等領(lǐng)域展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。實(shí)現(xiàn) 性疾病早期高效檢測(cè)——以病毒為例，有病毒檢測(cè)、和臨床樣本病毒載量評(píng)估H...

PCR（PolymeraseChainReaction）技術(shù)，即聚合酶連反應(yīng)，是一種擴(kuò)大和復(fù)制目的片段DNA的技術(shù)，其發(fā)現(xiàn)對(duì)于生命科學(xué)的發(fā)展具有重要的意義。而3D數(shù)字PCR到底是什么鬼？它其實(shí)是出現(xiàn)的一款PCR儀，其具有對(duì)目的DNA分子做出定量的優(yōu)點(diǎn)，進(jìn)而提供...

數(shù)字聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（digitalpolymerchainreaction，dPCR）技術(shù)因具有高靈敏度、受基質(zhì)干擾少等優(yōu)勢(shì)而被廣用于轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)。本研究綜述了數(shù)字PCR技術(shù)的原理、系統(tǒng)各部件的優(yōu)劣勢(shì)，梳理了數(shù)字PCR技術(shù)在轉(zhuǎn)基因檢測(cè)與溯源技術(shù)（標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)）方...

微滴數(shù)字PCR主要是將兩種互不相溶的液體，以其中一種作為連續(xù)相（油），另一種作為分散相（水），在水/油兩相表面張力和剪切共同作用下分散相以微小體積單元的形式存在于連續(xù)中，從而成液滴。這種液滴式的反應(yīng)腔室具有體積小、樣品間無(wú)擴(kuò)散等優(yōu)勢(shì)。在ddPCR中，利用微滴發(fā)...

數(shù)字PCR實(shí)驗(yàn)步驟包括：1）試劑配制：將10xdPCRBuffer、dPCR酶、引物和探針、無(wú)核酸酶水混合成dPCR預(yù)混液，并分裝到8聯(lián)排管中或96孔板中；將各待測(cè)樣本的核酸模板、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照分別加入相應(yīng)的8聯(lián)排管中或96孔板中；2）芯片進(jìn)樣：在小海龜B...

企業(yè)宗旨：成為數(shù)字PCR的，更好地服務(wù)于體外診斷行業(yè)，讓檢測(cè)更簡(jiǎn)單！企業(yè)價(jià)值觀(guān)：用戶(hù)，質(zhì)量為本；潛力而為，主動(dòng)開(kāi)拓；高效執(zhí)行，負(fù)責(zé)到底。發(fā)展歷程：2016年，企業(yè)成立2017年，數(shù)字PCR系統(tǒng)研制成功2018年，產(chǎn)品線(xiàn)成熟2019年，生產(chǎn)線(xiàn)建成“讓檢測(cè)，更簡(jiǎn)單...

20世紀(jì)末，Vogelstein等提出數(shù)字PCR(digitalPCR，dPCR)的概念，通過(guò)將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬(wàn)份，分配到不同的反應(yīng)單元，每個(gè)單元至少包含一個(gè)拷貝的目標(biāo)分子(DNA模板)，在每個(gè)反應(yīng)單元中分別對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增結(jié)束后對(duì)各個(gè)反應(yīng)...

在定量PCR時(shí)，我們常常糾結(jié)一個(gè)問(wèn)題，究竟是相對(duì)定量還是***定量呢？如今，你無(wú)需糾結(jié)了，因?yàn)閿?shù)字PCR（digitalPCR）來(lái)了。盡管這兩種技術(shù)有些類(lèi)似，都是估計(jì)起始樣品中的核酸量，但它們有一個(gè)重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)或參照基因來(lái)測(cè)定核酸量，而...

數(shù)字PCR的引物和探針設(shè)計(jì)規(guī)則同熒光定量PCR是類(lèi)似的，具體規(guī)則如下：1、查找和選擇目標(biāo)序列設(shè)計(jì)引物和探針的第一步是得到感興趣基因的核酸序列。找到基因保守區(qū)域：基因的保守區(qū)域是指來(lái)自同一屬/種/亞型的、在某個(gè)基因上堿基序列差別很小或沒(méi)有差別的區(qū)域。根據(jù)需要，使...

在PCR進(jìn)行的過(guò)程中，首先是引物和探針?lè)謩e結(jié)合，然后開(kāi)始擴(kuò)增。如果一個(gè)微滴當(dāng)中有目標(biāo)基因的片段，Taqman探針就會(huì)被酶切碎，熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)分離。在后面的檢測(cè)過(guò)程中，熒光基團(tuán)被激發(fā)光路激發(fā)之后就會(huì)發(fā)熒光。如果沒(méi)有，Taqman探針就不會(huì)被切碎，在后面的檢測(cè)...

由于現(xiàn)有的商業(yè)化數(shù)字PCR設(shè)備在物理上只設(shè)置了2個(gè)檢測(cè)通道，所以存在一個(gè)明顯的短板：不能同時(shí)進(jìn)行多個(gè)位點(diǎn)的檢測(cè)。在樣品多位點(diǎn)的檢測(cè)中，就需要更多的起始樣品，但臨床上組織的樣品非常有限。相比之下熒光定量PCR儀上就很容易實(shí)現(xiàn)多重檢測(cè)。為了考察利用數(shù)字PCR實(shí)現(xiàn)多...

染料法是指在qPCR反應(yīng)體系中加入一種與雙鏈DNA分子結(jié)合的熒光染料，包括SYBR?Green I、BEBO和LC Green TMI等染料，它們可以與雙鏈DNA（double strands DNA，dsDNA）的小溝非特異性結(jié)合，激發(fā)較強(qiáng)的熒光產(chǎn)生。經(jīng)熒光...

相對(duì)定量實(shí)驗(yàn)方法包括兩種重要方法：ΔΔCT Method：使用內(nèi)參基因定量所研究樣品和參照樣品的目的基因。內(nèi)參基因與目的基因可以同時(shí)反應(yīng)，也可以單獨(dú)反應(yīng)；雙標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法：對(duì)每個(gè)樣品的內(nèi)參基因和目的基因都做定量，求出每個(gè)樣品中內(nèi)參基因和目的基因的數(shù)量，然后根據(jù)相對(duì)...

qpcr的檢測(cè)原理：qPCR主要是使用插入染料或熒光探針(例如TaqMan)，利用實(shí)時(shí)積累的熒光信號(hào)監(jiān)測(cè)整個(gè)擴(kuò)增過(guò)程，然后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)來(lái)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析。qPCR 主要是依賴(lài)于標(biāo)準(zhǔn)品制備標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，進(jìn)而去確定未知樣品的濃度，因此是一種相對(duì)定量的方法。隨著P...

而在指數(shù)增長(zhǎng)期，由于底物充足，聚合酶活性高，反應(yīng)產(chǎn)物以指數(shù)形式積累，且與初始模板量存在定量關(guān)系，因此，在該時(shí)期對(duì)模板起始量進(jìn)行定量分析準(zhǔn)確且重復(fù)性比較好。Ct值，是在指數(shù)增長(zhǎng)期內(nèi)，熒光信號(hào)到達(dá)熒光檢測(cè)閾值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)，其中C循環(huán)(Cycle)，t閾值（th...

SYBR Green I染料試劑：SYBR Green I染料法采用了Applied Biosystems SYBR Green I染料，一種可以在PCR循環(huán)過(guò)程中隨著PCR產(chǎn)物的累計(jì)而對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)的高度特異性雙鏈DNA結(jié)合染料。TaqMan和SYBR Gre...

所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）是一種在DNA擴(kuò)增反應(yīng)中，以熒光化學(xué)物...

免疫沉淀——捕獲并分離蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物使用抗體捕獲蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物中的目標(biāo)蛋白質(zhì)是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵因素。抗體免疫沉淀并從細(xì)胞核組分中分離蛋白質(zhì)，去除不相關(guān)的細(xì)胞物質(zhì)。使用抗體結(jié)合磁珠完成所得抗體-蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物的純化。經(jīng)過(guò)孵育后，充分洗滌磁珠-抗體...