可以通過多個(gè)超濾管同時(shí)超濾來降低濃度,而后者通過改變不同的緩沖液直到?jīng)]有蛋白質(zhì)沉淀。用來濃縮蛋白質(zhì)的。如果要更換緩沖液,當(dāng)總蛋白溶液濃縮到1毫升左右時(shí),輕輕添加一個(gè)新的緩沖液〈用0.22um超濾膜超濾后〉,然后連續(xù)濃縮到1毫升左右。濃縮液的之后體積取決于所需的蛋白質(zhì)濃度,通常不超過500 ul,但也要濃縮到200 ul以下。根據(jù)每次至少10次的體積濃度計(jì)算,1000次以上的3次基本可以達(dá)到更換緩沖器的目的。提取之后濃縮蛋白的操作在冰上進(jìn)行。黃色設(shè)備頭(200ul)用于提取之后的蛋白質(zhì)濃縮物。設(shè)備頭沿設(shè)備頭邊緣輕輕插入。將蛋白溶液輕輕吹勻。注意不要觸摸超濾膜。吸取濃縮液,一次較多吸200 ul,...
超濾管,即超濾離心管,是生物、化學(xué)實(shí)驗(yàn)室非常重要的分離裝置。超濾管可以去除蛋白質(zhì)及大分子雜質(zhì),經(jīng)常用于蛋白濃縮和更換緩沖液的操作,超濾是實(shí)驗(yàn)室常用的分離技術(shù),是一種加壓膜分離技術(shù),膜孔徑介于微濾和反滲透之間,通過膜表面的微孔結(jié)構(gòu)對(duì)物質(zhì)進(jìn)行選擇性分離。在一定壓力下,小分子物質(zhì)可穿過一定孔徑的特制薄膜,而大分子物質(zhì)不能透過,從而將小分子與生物大分子分開,實(shí)現(xiàn)濾除微小固型顆粒物、大分子、病毒以及細(xì)菌等微生物的目的。超濾管一般由蓋子、過濾器和離心管三個(gè)部分組成。超濾管具有快速超過濾功能,能夠達(dá)到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液或復(fù)雜的樣本組合中進(jìn)行濃縮液回收,其豎式設(shè)計(jì)以及可用的濾膜表面面積能夠提供快速的...
超濾管,即超濾離心管,是生物、化學(xué)實(shí)驗(yàn)室非常重要的分離裝置。超濾管可以去除蛋白質(zhì)及大分子雜質(zhì),經(jīng)常用于蛋白濃縮和更換緩沖液的操作,超濾是實(shí)驗(yàn)室常用的分離技術(shù),是一種加壓膜分離技術(shù),膜孔徑介于微濾和反滲透之間,通過膜表面的微孔結(jié)構(gòu)對(duì)物質(zhì)進(jìn)行選擇性分離。在一定壓力下,小分子物質(zhì)可穿過一定孔徑的特制薄膜,而大分子物質(zhì)不能透過,從而將小分子與生物大分子分開,實(shí)現(xiàn)濾除微小固型顆粒物、大分子、病毒以及細(xì)菌等微生物的目的。超濾管一般由蓋子、過濾器和離心管三個(gè)部分組成。超濾管具有快速超過濾功能,能夠達(dá)到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液或復(fù)雜的樣本組合中進(jìn)行濃縮液回收,其豎式設(shè)計(jì)以及可用的濾膜表面面積能夠提供快速的...
超濾離心管的原理:根據(jù)標(biāo)稱分子量限值(NMWL)的不同,典型處理時(shí)間為10-30分鐘。超濾膜的垂直設(shè)計(jì)也較大程度降低了溶質(zhì)極化造成的濾膜結(jié)垢;Chemicalbook死體積設(shè)計(jì)能有效防止過度離心使樣本干掉而造成樣本損失。收集濾出液后,濃縮樣本(截留部分)可通過一個(gè)簡便的倒置(上下反轉(zhuǎn))離心步驟而實(shí)現(xiàn)高效回收。超濾離心管的應(yīng)用:1)濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(DNA/RNA樣本,單鏈或雙鏈)、噬菌體等微生物樣本2)純化組織培養(yǎng)提取液或細(xì)胞裂解液中的大分子成分,去除反應(yīng)液中的引物、接頭或分子標(biāo)記,在HPLC前去除蛋白質(zhì)。3)除鹽,緩沖液更換,或滲濾。使用前應(yīng)先對(duì)超濾膜進(jìn)行濕潤化處理,以免損壞其結(jié)...
超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,不超過目標(biāo)分子量的一半。因?yàn)槌瑸V膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,離心高壓下也可能滲漏,因此截留孔徑越小,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心。如果同時(shí)需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過長時(shí)間或者過速離心,雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計(jì),可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。離心機(jī)轉(zhuǎn)速會(huì)影響到超濾效果,因此需要根據(jù)實(shí)...
超濾管,即超濾離心管,是生物、化學(xué)實(shí)驗(yàn)室非常重要的分離裝置。超濾管可以去除蛋白質(zhì)及大分子雜質(zhì),經(jīng)常用于蛋白濃縮和更換緩沖液的操作,超濾是實(shí)驗(yàn)室常用的分離技術(shù),是一種加壓膜分離技術(shù),膜孔徑介于微濾和反滲透之間,通過膜表面的微孔結(jié)構(gòu)對(duì)物質(zhì)進(jìn)行選擇性分離。在一定壓力下,小分子物質(zhì)可穿過一定孔徑的特制薄膜,而大分子物質(zhì)不能透過,從而將小分子與生物大分子分開,實(shí)現(xiàn)濾除微小固型顆粒物、大分子、病毒以及細(xì)菌等微生物的目的。超濾管一般由蓋子、過濾器和離心管三個(gè)部分組成。超濾管具有快速超過濾功能,能夠達(dá)到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液或復(fù)雜的樣本組合中進(jìn)行濃縮液回收,其豎式設(shè)計(jì)以及可用的濾膜表面面積能夠提供快速的...
超濾離心管應(yīng)用:1、組成部分:該裝置包括一個(gè)蓋子、一個(gè)過濾器和一個(gè)50ML的離心管。2、帶有擺桶式或定角式轉(zhuǎn)子的離心器以及可以容納50mL試管的樣本腔/試管座。①注意:為了避免在離心過程中損壞裝置,在旋轉(zhuǎn)前請(qǐng)檢查間隙。 3、帶有200微升(μL)的移液管,用于濃縮液回收適用性。①注意:該產(chǎn)品未經(jīng)消毒,只供一次使用,保質(zhì)期3年。為確保對(duì)預(yù)定用途的適用性,建議進(jìn)行初步的回收和截留試驗(yàn)。4、濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本。5、凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分,從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或分子標(biāo)記,在HPLC之前去除蛋白...
一種超濾離心管,包括主管,主管為頂部開口底部封閉結(jié)構(gòu),主管開口處安裝有頂蓋,主管內(nèi)安裝有內(nèi)管,內(nèi)管上下貫通,內(nèi)管底面貼合有超濾膜,超濾膜將內(nèi)管底面包覆,超濾膜底面貼合有支撐板,超濾膜位于內(nèi)管底面與支撐板之間,內(nèi)管底部安裝有底托,內(nèi)管配合底托將超濾膜、支撐板壓緊,內(nèi)管、超濾膜、支撐板、底托與主管中位于底托以下的容腔空間連通。本實(shí)用新型中,有效將樣本溶液和濾液經(jīng)離心和超濾分離,分離純度高。本產(chǎn)品由于超濾膜垂直與管體,超濾膜的另一側(cè)為支撐網(wǎng),支撐網(wǎng)設(shè)有大量網(wǎng)孔,支撐網(wǎng)的另一側(cè)直接為出液口,大口徑的出液口極大效率的增加濾液通量,并且拆卸方便,超濾膜易于更換,其他部件易于清洗,可重復(fù)使用,經(jīng)濟(jì)環(huán)保。濟(jì)環(huán)...
離心機(jī)的加速度調(diào)至較低檔,減小對(duì)膜的壓力。注意,一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后,方可離開離心機(jī),否則離心機(jī)出問題時(shí),無法一時(shí)間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整(角轉(zhuǎn)離心機(jī)的情況是膜與軸垂直)。在實(shí)際使用中,一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。當(dāng)濃縮到剩下1ml時(shí),取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍(lán)色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。使用...
質(zhì)量和重心都應(yīng)該平衡。注意速度和加速度不要太快,否則會(huì)直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心預(yù)冷至4度〉。膜和旋轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明進(jìn)行調(diào)整(對(duì)于角向離心機(jī),膜垂直于軸〉。在實(shí)際應(yīng)用中,一般的速度開度比手動(dòng)低,可以延長離心管的使用壽命。4。當(dāng)濃縮到剩余的1毫升時(shí),取中國產(chǎn)的504.1l布拉德福德溶液,加104 l流過,看是否變藍(lán),以判斷ur管是否漏蛋白。如果管道泄漏,重新倒入上層,然后流過新管道開始超濾。為了準(zhǔn)確確定管道是否泄漏,用5 mg/ml BSA離心10分鐘,然后將其穿過,大致運(yùn)行膠水或Bradf ord,繼續(xù)添加剩余的蛋白質(zhì)溶液以濃縮(在冰上操作以防止蛋白質(zhì)加熱〉,直到所有濃縮物都添加完畢...
超濾管采用其特有的再生纖維素膜,定義為:一個(gè)確定NMWL 的超濾膜應(yīng)該截留至少90% 以上的這個(gè)大小的球形分子,即100kDa的球形蛋白用100k的再生纖維素膜得率超過90%。請(qǐng)仔細(xì)查看以下默克生命科學(xué)官方數(shù)據(jù):(以0.5mL的AU0.5為例,其它型號(hào)截留分子量的選擇原則一致,具體離心力和離心時(shí)間不同。截留分子量選小啦!看到這個(gè)表,你是否發(fā)現(xiàn)原來抱怨超濾管流速偏慢的根源來自對(duì)于截留分子量定義的誤解。膜孔徑要小于目的分子這是一原則。如果分子有近似球形的立體結(jié)構(gòu)(而非明顯的線性分子),在再生纖維素超濾膜體系內(nèi),選擇“等于”或“略小于”目的分子的截留分子量的超濾管是較佳選擇,這樣操作起來又快又好,既...
市場上常見離心管主要分為兩種:即:塑料離心管 和玻璃離心管,也有少數(shù)是鋼制離心管。使用玻璃管時(shí)離心力不宜過大,需要墊橡膠墊,防止管子破碎,高速離心機(jī)一般不選用玻璃管。離心管蓋子封閉性不夠好,液體就不能加滿(針對(duì)高速離心機(jī)且使用角轉(zhuǎn)子)以防外溢,失去平衡。外溢后果是污染轉(zhuǎn)子和離心腔,影響感應(yīng)器正常工作。超速離心時(shí),液體一定要加滿離心管,因?yàn)槌x需要抽高真空,只有加滿才能避免離心管變形。而鋼制離心管強(qiáng)度大,不變形,能抗熱,抗凍,抗化學(xué)腐蝕,它的應(yīng)用也是相當(dāng)普遍但使用時(shí)同樣也應(yīng)避免接觸強(qiáng)腐蝕性的化學(xué)藥品,如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等。盡量避免這些化學(xué)物質(zhì)的腐蝕。超濾離心管還可用于檢測空氣樣本中的微粒子、有機(jī)化合物...
超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可將離心管放入離心機(jī)反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收;截留分子量普遍,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;新推出產(chǎn)品膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時(shí)候,輕輕加入新的Buffer(經(jīng)0.22um超濾膜超濾),再 濃縮至1...
以下是處理超濾管,重復(fù)利用超濾管的步驟。倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用設(shè)備頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀懸起,然后倒掉,不可用自來水猛沖】然后加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個(gè)小時(shí),再換新的水,放置幾個(gè)小時(shí),不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內(nèi)壁再用MilliQ水洗干凈。取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml。離心管,排出部分水...
超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,不過對(duì)于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(90%),并達(dá)到30倍的濃縮。產(chǎn)品特點(diǎn):超濾離心管設(shè)計(jì)用于體外診斷,包括分析濃縮血清、尿液、腦脊液和其他體液;*內(nèi)附膜可高效回收分子量范圍的有效成分;*截留回收率高達(dá)80%以上;*標(biāo)注濃縮量為200μl;*使用固定轉(zhuǎn)子離心機(jī)時(shí),較大處理樣本量為10ml,較大RCF為5000xg;*使用吊桶式離心機(jī)時(shí),較大處理樣本量為12ml,較大RCF為4000xg;*熱密封膜較大限度地減少了下游提取物;*垂直膜的設(shè)計(jì)減少濃縮所用時(shí)間(10-15分鐘);*管體有帶刻度印刷標(biāo)識(shí)及可寫入文字的白色的區(qū)域;*經(jīng)過嚴(yán)格的泄漏測試。...
玻璃離心管玻璃離心管是由玻璃制成的,不同廠家可能使用的玻璃成分不同,所以強(qiáng)度上可能會(huì)略有差異。我們的普通玻璃試管可以承受的相對(duì)離心力(RCF) 通常小于3000g ,而硼硅玻璃管一般可以承受超過10000g 以上的相對(duì)離心力。但由于玻璃離心管質(zhì)量易碎,所以玻璃管一般不用于高速離心機(jī),用得也不多。由于玻璃本身的特性,它具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性,能與酸、堿和有機(jī)溶劑和平共存。玻璃管外形穩(wěn)定,能承受一定程度的擠壓,但不能抵抗碰撞,在 高速離心時(shí)容易破碎,雖然能抵抗高溫,能抵抗熱沖擊,但在溫度突然劇烈變化的環(huán)境中也很容易斷裂。超濾離心管適用于小到大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室操作,并可進(jìn)行批量處理以提高效率。衢州高離心力...
注意:超濾離心管中的濾膜一旦潤濕 后應(yīng)避免變干。如果在預(yù)清洗后不是立即使用,則讓液體保留在濾膜上,直到使用。6.使用方法:1).將超濾內(nèi)管插入所提供的一個(gè)微量離心管中。2).向超濾管內(nèi)管中加入不超過500 μL的樣本,并蓋上蓋子。3).將蓋好蓋子的超濾管放入離心轉(zhuǎn)子中,讓蓋子的連接帶朝著轉(zhuǎn)子的中間;用一個(gè)類似的超濾管平衡。4).以14,000 x g離心約10-30分鐘,具體時(shí)間取決于所使用超濾管的NMWL。5).離心結(jié)束后將整個(gè)超濾管從離心機(jī)中取出,取出內(nèi)管。6).為了回收濃縮后的溶質(zhì),將內(nèi)管倒過來插在-個(gè)干凈的微量離心管中。放在離心機(jī)中,讓打開的蓋子朝著轉(zhuǎn)子的中間;用一個(gè)類似的超濾管進(jìn)行平...
其實(shí),離心管是離心機(jī)中較重要的配件之一,它主要是用來承裝實(shí)驗(yàn)樣品的,我們使用離心機(jī)時(shí),首先需要用到的就是轉(zhuǎn)子,轉(zhuǎn)子里面需要放的就是離心管了。之所以說離心管是離心機(jī)較重要的配件之一是因?yàn)?,如果沒有離心管,樣品就沒辦法承裝。那么,了解過離心管的作用之后,你知道離心管應(yīng)該如何選擇嗎?相信連用過離心機(jī)的朋友都不會(huì)很清楚。那么接下來小編帶你了解一下離心管應(yīng)該如何選擇。想要了解離心管如何選擇就要先說到材質(zhì),離心管的材質(zhì)一般分為三種,一種是塑料離心管,第二種是玻璃離心管,第三種是鋼制離心管。超濾離心管還可用于檢測藥品樣品中的殘留物和污染物,并進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)測和控制。衢州30K超濾離心管排行榜多肽超濾離心管,垂直...
超濾管,即超濾離心管,是生物、化學(xué)實(shí)驗(yàn)室非常重要的分離裝置。超濾管可以去除蛋白質(zhì)及大分子雜質(zhì),經(jīng)常用于蛋白濃縮和更換緩沖液的操作,超濾是實(shí)驗(yàn)室常用的分離技術(shù),是一種加壓膜分離技術(shù),膜孔徑介于微濾和反滲透之間,通過膜表面的微孔結(jié)構(gòu)對(duì)物質(zhì)進(jìn)行選擇性分離。在一定壓力下,小分子物質(zhì)可穿過一定孔徑的特制薄膜,而大分子物質(zhì)不能透過,從而將小分子與生物大分子分開,實(shí)現(xiàn)濾除微小固型顆粒物、大分子、病毒以及細(xì)菌等微生物的目的。超濾管一般由蓋子、過濾器和離心管三個(gè)部分組成。超濾管具有快速超過濾功能,能夠達(dá)到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液或復(fù)雜的樣本組合中進(jìn)行濃縮液回收,其豎式設(shè)計(jì)以及可用的濾膜表面面積能夠提供快速的...
按用途可分:制備型離心管和分析型離心管。大量離心管(500mL、250mL)。普通離心管(50mL、15mL)。微量離心管(2mL、1.5mL、0.65mL、0.2mL) 塑料離心管,玻璃離心管,鋼制離心管。1、塑料離心管。塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺點(diǎn)是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,使用壽命短。塑料離心管都有管蓋,它的作用是防止樣品外泄,尤其是用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時(shí)防止樣品外泄是很重要的一點(diǎn);管蓋還有一個(gè)作用是防止樣品揮發(fā)以及支持離心管,防止離心管變形。在挑選這一點(diǎn)的時(shí)候還要注意檢查管蓋是否嚴(yán)密,在試驗(yàn)時(shí)能否蓋嚴(yán),以到達(dá)倒置不漏液;我們都知道...
使用后用0.1M NaOH泡24h,然后20%乙醇浸泡保存。這個(gè)我是聽老板們說的,的確乙醇泡完后孔徑會(huì)增大,基本就是5-10KD較大,也就是說如果你的蛋白在21KD以上,應(yīng)該沒問題?;蛘呖梢圆挥靡掖寂?,用NaOH洗之后直接用無菌水保存,每周換一下液體,應(yīng)該沒有問題??纯凑f明書不就結(jié)了!我原來在CRO的時(shí)候一直是重復(fù)用的,也沒見什么不好??!短期會(huì)用的話,用20%的乙醇泡著,回頭拼命用millipore的水充干凈,然后在用樣品緩沖液平衡一下就好,至于有些人說的改變孔徑,也沒那么大影響的,你至少跟目的蛋白分子量差別3倍的截留分子量才安全的不是嗎?1個(gè)月以內(nèi)不用的話,建議用100mM的NaOH保存!更...
一般來說,超濾的回收率可達(dá)90%以上。樣本損失大多是由于濾膜表面和容器表面的非特異性吸附引起的。因此,選擇口碑好、優(yōu)良品質(zhì)的濃縮離心管非常重要。作為過濾方面的老牌公司,提供了多種濃縮離心管,可對(duì)50 μl到60 ml的樣本進(jìn)行高效的濃縮和脫鹽。它配備了(改良的聚醚砜)膜,確保低的非特異性吸附和高的回收率。當(dāng)然,這個(gè)的前提是你選對(duì)了濃縮離心管。濃縮離心管,適合處理不同體積的樣本。你可以根據(jù)你的樣本量來選擇。不過,如果樣本濃度低體積大,可以選擇較小容積的濃縮離心管多次重復(fù)加樣離心。一旦樣本體積確定,下一步就是選擇適當(dāng)?shù)腗WCO。對(duì)于蛋白質(zhì)而言,建議所選濾膜的MWCO是欲截留分子大小的1/6-1/3...
超濾離心管應(yīng)用:除鹽、滲濾或更換緩沖液;濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株 DNA/RNA 樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本;凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分,從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或分子標(biāo)記,在 HPLC 之前去除蛋白質(zhì)。產(chǎn)品組成:超濾離心管包括一個(gè)蓋子、一個(gè)過濾器和一個(gè)離心管。產(chǎn)品特點(diǎn):較高的樣品回收率 (> 90% 的樣品回收率 );垂直膜的設(shè)計(jì)減少濃縮所用時(shí)間(10-15分鐘);經(jīng)過嚴(yán)格的泄漏測試;無 DNase、RNase,無熱原、無內(nèi)元素。使用這個(gè)超濾管,廠家強(qiáng)調(diào)一定是一次性的,這個(gè)超濾管必須只能使用一次,不能重復(fù)使用!超濾離心管可以用于提取土壤...
離心技術(shù)主要用于各種生物樣品的分離和制備,生物樣品懸浮液盛放在離心管中在高速旋轉(zhuǎn)下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(如細(xì)胞器、生物大分子的沉淀等) 以一定的速度沉降,從而與溶液得以分離。而離心管就是離心試驗(yàn)中必備的實(shí)驗(yàn)耗材之一。含有帶電的或者疏水結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)更易于不可逆結(jié)合到不同表面。對(duì)超濾離心管表面做鈍化預(yù)處理可降低蛋白質(zhì)在膜表面的吸附性損失,大多數(shù)情況下,在濃縮稀蛋白溶液之前預(yù)處理柱子可以提高回收率,因?yàn)槿芤嚎商顫M膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點(diǎn)。鈍化的方法是預(yù)先用較高容積的鈍化溶液預(yù)浸泡柱子1小時(shí)以上,蒸餾水徹底沖洗柱子,再用蒸餾水離心一次以徹底除去可能殘留在膜上的鈍化溶液。注意...
超濾離心管應(yīng)用:除鹽、滲濾或更換緩沖液;濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株 DNA/RNA 樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本;凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分,從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或分子標(biāo)記,在 HPLC 之前去除蛋白質(zhì)。產(chǎn)品組成:超濾離心管包括一個(gè)蓋子、一個(gè)過濾器和一個(gè)離心管。產(chǎn)品特點(diǎn):較高的樣品回收率 (> 90% 的樣品回收率 );垂直膜的設(shè)計(jì)減少濃縮所用時(shí)間(10-15分鐘);經(jīng)過嚴(yán)格的泄漏測試;無 DNase、RNase,無熱原、無內(nèi)元素。使用這個(gè)超濾管,廠家強(qiáng)調(diào)一定是一次性的,這個(gè)超濾管必須只能使用一次,不能重復(fù)使用!超濾離心管還可用于生產(chǎn)工藝...
選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機(jī)預(yù)冷至4度)。超濾離心管通常被用于天然藥...
玻璃離心管:使用玻璃管時(shí)離心力不宜過大,需要墊橡膠墊,防止管子破碎,高速離心機(jī)一般不選用玻璃管。離心管蓋子封閉性不夠好,液體就不能加滿(針對(duì)高速離心機(jī)且使用角轉(zhuǎn)子)以防外溢,失去平衡。外溢后果是污染轉(zhuǎn)子和離心腔,影響感應(yīng)器正常工作。超速離心時(shí),液體一定要加滿離心管,因?yàn)槌x需要抽高真空,只有加滿才能避免離心管變形。塑料離心管:塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出樣本。缺點(diǎn)是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,使用壽命短。塑料的離心管又有PP(聚丙烯)、PC (聚碳酸酯),PE (聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對(duì)來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀的看到樣品離心...
一般來說,我們較常用的離心管就是塑料離心管,塑料離心管的優(yōu)缺點(diǎn)也很明顯,優(yōu)點(diǎn)是它的硬度較小,可以利用穿刺法來得到我們需要的物質(zhì)。但這也正是它的缺點(diǎn),因?yàn)橛捕刃。运哺菀鬃冃危垢g性也差,所以它的壽命是比較短的。塑料離心管的還可以按照材質(zhì)來選擇,分別有聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)這三種材質(zhì)。一般大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室都是將塑料離心管做一次性使用,但一般的實(shí)驗(yàn)室還是會(huì)循環(huán)使用,不推薦循環(huán)使用,因?yàn)檫@樣會(huì)造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不準(zhǔn)確性,但如果非要做循環(huán)使用的話小編還是建議使用pp材質(zhì)的離心管,然后經(jīng)過高壓高溫進(jìn)行消毒,pp材質(zhì)是上述三種材質(zhì)中較好的,所以在選擇的時(shí)候我們盡量選擇pp材質(zhì)的...
質(zhì)量和重心都應(yīng)該平衡。注意速度和加速度不要太快,否則會(huì)直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心預(yù)冷至4度〉。膜和旋轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明進(jìn)行調(diào)整(對(duì)于角向離心機(jī),膜垂直于軸〉。在實(shí)際應(yīng)用中,一般的速度開度比手動(dòng)低,可以延長離心管的使用壽命。4。當(dāng)濃縮到剩余的1毫升時(shí),取中國產(chǎn)的504.1l布拉德福德溶液,加104 l流過,看是否變藍(lán),以判斷ur管是否漏蛋白。如果管道泄漏,重新倒入上層,然后流過新管道開始超濾。為了準(zhǔn)確確定管道是否泄漏,用5 mg/ml BSA離心10分鐘,然后將其穿過,大致運(yùn)行膠水或Bradf ord,繼續(xù)添加剩余的蛋白質(zhì)溶液以濃縮(在冰上操作以防止蛋白質(zhì)加熱〉,直到所有濃縮物都添加完畢...
超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可將離心管放入離心機(jī)反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收;截留分子量普遍,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;較新推出ZL產(chǎn)品Hydrosart膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意遵循正確的操作程序和安全規(guī)定,以避免意外傷害或污染。北京30K超濾離心管公司超濾離心管通常...