病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹PAS染色:PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。PAS染色利用高碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色,顯示糖原定位。染色步驟1.石蠟切片脫蠟至水(細(xì)胞涂片,冰凍切片直接水洗);2.蒸餾水洗;3.過碘酸酒清夜10min;4.自來水沖洗10min;5.Schiff氏液10min;6.流水沖洗5min;7.用哈瑞蘇木精或邁耶蘇木精染核3min(細(xì)胞核染色過深可用鹽酸酒精分...
病理實(shí)驗(yàn)外包,染色常見染色介紹天狼星紅染色:主要由天狼星紅染色液、Mayer蘇木素染色液組成,主要用于各種組織病變時(shí)對(duì)膠原纖維異?;蚶w維增生的研究中,在普通光學(xué)顯微鏡下心臟血管等組織的膠原纖維被染成紅色,在偏振光鏡下對(duì)各種纖維化病變的分型和分級(jí)研究有一定的幫助作用。采用免疫組化技術(shù)也可顯示Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維,但所用抗體昂貴,操作費(fèi)時(shí),而采用天狼星紅染色試劑便宜,操作簡單。天狼星紅染色液操作步驟1、組織固定于10%福爾馬林固定液,常規(guī)脫水包埋。2、切片厚6μm,常規(guī)脫蠟至水。3、天狼星紅染色液滴染1h。4、流水稍沖洗,去除切片表面染液。5、Mayer蘇木素染色液染細(xì)胞核8~10min。6、流水沖洗...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹油紅O染色:油紅O脂肪染色法是指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內(nèi)的脂肪常采用油紅O進(jìn)行染色的方法,油紅O為脂溶性染料,在脂肪內(nèi)能高度溶解,可特異性的使組織內(nèi)甘油三酯等中性脂肪著色。肝細(xì)胞內(nèi)的脂肪滴呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色1.標(biāo)本人或動(dòng)物的肝組織等,甲醛—鈣液固定,冰凍切片,厚10μm。2.改良的油紅O染色液油紅O0.5g,50%乙醇100ml。將油紅O溶于乙醇內(nèi),且不斷攪拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶內(nèi)保存?zhèn)溆谩?.染色步驟①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油紅O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自來水終止分化;④蘇木素復(fù)染核,自來水返藍(lán),甘油...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色HE染色常見問題:Q5:細(xì)胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過度氧化;或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液。或在流動(dòng)自來水(一般自來水PH7.5-7.8),或在稀釋的氨水溶液,或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡,這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果。Q6:伊紅染色較淡答:伊紅的PH改變了(PH可能已大于5);或反藍(lán)液體未漂洗干凈,殘留后影響胞漿嗜酸性染色;或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久。對(duì)策:檢查伊紅染色液PH,可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示,調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟。病理實(shí)驗(yàn)外包,組織檢測,南京英瀚斯生物科技有限公司。甘肅靠譜的病理實(shí)驗(yàn)外包...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹普魯士藍(lán)染色:普魯士藍(lán)染色(Prussianbluereaction)又稱為含鐵血黃素染色,即經(jīng)過亞鐵**鉀和稀酸處理后可以產(chǎn)生藍(lán)色,常見于吞噬細(xì)胞內(nèi)會(huì)間質(zhì)內(nèi),主要顯示三價(jià)鐵鹽。Perls普魯士藍(lán)是非常經(jīng)典的組織化學(xué)反應(yīng),是顯示組織內(nèi)三價(jià)鐵的一種敏感、傳統(tǒng)優(yōu)良的方法,其染色原理為:亞鐵**鉀溶液使三價(jià)鐵離子從蛋白質(zhì)中被稀鹽酸分離出來,三價(jià)鐵與亞鐵**鉀反應(yīng),生成一種不溶解的藍(lán)色化合物即三價(jià)鐵的亞鐵**物普魯士藍(lán),所以該反應(yīng)被稱為普魯士藍(lán)反應(yīng)。三價(jià)鐵的亞鐵**物是一種很穩(wěn)定的化合物,在反應(yīng)后可用紅色染色劑進(jìn)行復(fù)染,如核固紅、伊紅、中性紅等。Perlsstain常...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹掃描電鏡檢測:掃描電子顯微鏡的制造是依據(jù)電子與物質(zhì)的相互作用。當(dāng)一束高能的人射電子轟擊物質(zhì)表面時(shí),被激發(fā)的區(qū)域?qū)a(chǎn)生二次電子、俄歇電子、特征x射線和連續(xù)譜X射線、背散射電子、透射電子,以及在可見、紫外、紅外光區(qū)域產(chǎn)生的電磁輻射。同時(shí),也可產(chǎn)生電子-空穴對(duì)、晶格振動(dòng) (聲子)、電子振蕩 (等離子體)。原則上講,利用電子和物質(zhì)的相互作用,可以獲取被測樣品本身的各種物理、化學(xué)性質(zhì)的信息,如形貌、組成、晶體結(jié)構(gòu)、電子結(jié)構(gòu)和內(nèi)部電場或磁場等等。掃描電子顯微鏡 (scanning electron microscope, SEM) 是一種用于高分辨率微區(qū)形貌分析的大型精密...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色免疫組化染色的分類:1)按標(biāo)記物質(zhì)的種類,如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、免疫酶標(biāo)法和免疫金銀法等。2)按染色步驟可分為直接法(又稱一步法)和間接法(二步、三步或多步法)。與直接法相比,間接法的靈敏度提高了許多。3)按結(jié)合方式可分為抗原-抗體結(jié)合,如過氧化物酶-抗過氧化物酶(***)法;親和連接,如卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物(ABC)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)(SP)法等,其中SP法是比較常用的方法;聚合物鏈接,如即用型二步法,此方法尤其適合于內(nèi)源性生物素含量高的組織抗原檢...
病理實(shí)驗(yàn)外包比較常見的實(shí)驗(yàn)是免疫組化染色,免疫組織化學(xué)的突出優(yōu)點(diǎn)。1.高度的特異性:抗原--抗體反應(yīng)是特異性比較強(qiáng)的反應(yīng)之一。免疫組織化學(xué)所用的抗體必須是特異性強(qiáng)的多價(jià)或單價(jià)抗體,具有高度的識(shí)別能力,在抗原識(shí)別上可達(dá)到單個(gè)氨基酸的水平。2.敏感性高:現(xiàn)代免疫組織化學(xué)采用各種有效方法比較大限度保存細(xì)胞或組織內(nèi)待檢物質(zhì)的抗原性,或采用各種增敏方法,或使用高敏感、高親和力的抗體等手段,保證可檢出細(xì)胞內(nèi)超微量的抗原成分,用顯微鏡觀察結(jié)果。因此,它是在細(xì)胞、分子水平或基因水平的檢測技術(shù)。3.方法步驟統(tǒng)一:若掌握一種基本的技術(shù)操作方法步驟,則一通百通。4.形態(tài)、機(jī)能和代謝密切結(jié)合:免疫組化是一種綜合性檢測...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹VonKossa染色:簡介:鈣結(jié)節(jié)的形成為成骨細(xì)胞特有,Vonkossa染色法是染色礦化結(jié)節(jié)的經(jīng)典方法,利用硝酸銀與鈣鹽的復(fù)分解反應(yīng)形成可被還原的銀鹽,在強(qiáng)光或紫外光下或者強(qiáng)還原劑作用下使其還原為黑色的金屬銀。簡要流程:石蠟切片/細(xì)胞爬片/冷凍切片→脫蠟至水→硝酸銀滴染→蘇木素染核→伊紅染色→脫水、透明、封片(中性樹膠)→Vonkossa染**(鈣鹽沉積區(qū)域呈黑色或棕黑色,細(xì)胞核呈藍(lán)色,背景呈紅色;或者鈣鹽沉積區(qū)域呈黑色或棕黑色,背景呈紅色)。VonKossa染色利用金屬離子置換反應(yīng)檢測組織中鈣鹽沉積,由硝酸銀溶液中的銀離子置換組織中沉積的鈣離子。該染色可用于...
病理實(shí)驗(yàn)外包,冰凍切片取樣實(shí)驗(yàn)步驟:一、取材應(yīng)盡可能快地采取新鮮的材料,防止組織發(fā)生死后變化。二、速凍1.將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內(nèi)(直徑約2cm)。2.如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒組織,然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內(nèi)。3.當(dāng)盒底部接觸液氮時(shí)即開始?xì)饣序v,此時(shí)小盒保持原位切勿浸入液氮中,大約10~20s組織即迅速冰結(jié)成塊。4在制成凍塊后,即可置入恒冷箱切片機(jī)冰凍切片。5.若需要保存,應(yīng)快速以鋁箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱貯存?zhèn)溆?。三、固?.樣品托上涂一層OCT包埋膠,將速凍組織置于其上,4℃冰箱預(yù)冷5~10min讓OCT膠浸透組織。2.取下組織置于錫箔或者...
病理實(shí)驗(yàn)外包,冰凍切片取樣實(shí)驗(yàn)步驟:一、取材應(yīng)盡可能快地采取新鮮的材料,防止組織發(fā)生死后變化。二、速凍1.將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內(nèi)(直徑約2cm)。2.如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒組織,然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內(nèi)。3.當(dāng)盒底部接觸液氮時(shí)即開始?xì)饣序v,此時(shí)小盒保持原位切勿浸入液氮中,大約10~20s組織即迅速冰結(jié)成塊。4在制成凍塊后,即可置入恒冷箱切片機(jī)冰凍切片。5.若需要保存,應(yīng)快速以鋁箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱貯存?zhèn)溆?。三、固?.樣品托上涂一層OCT包埋膠,將速凍組織置于其上,4℃冰箱預(yù)冷5~10min讓OCT膠浸透組織。2.取下組織置于錫箔或者...
病理實(shí)驗(yàn)外包比較常見的病理染色實(shí)驗(yàn)是免疫組化染色,用標(biāo)記的特異性抗體對(duì)組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中某些化學(xué)成分的分布和含量進(jìn)行組織和細(xì)胞的定性、定位或定量研究,這種技術(shù)稱為免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry)技術(shù)或免疫細(xì)胞化學(xué)(immunocytochemistry)技術(shù)。根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理,組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合,再利用一抗與標(biāo)記生物素、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng),***通過顯色反應(yīng)或熒光來顯示細(xì)胞或組織中化學(xué)成分,在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,從而能夠在細(xì)胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。免疫組化的特...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹TTC染色:TTC染色是TTC和活細(xì)胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶反應(yīng),生成紅色的甲月贊,用來表示細(xì)胞的活力。配制多為2%,染色要避光,37度條件下,它是評(píng)價(jià)腦缺血損傷常用的指標(biāo)。TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感復(fù)合物,1894年初次合成用來檢測種子的生存能力,1958年開始用來染色檢測哺乳動(dòng)物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色,而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降,不能反應(yīng),故不會(huì)產(chǎn)生變化呈蒼白。TTC可以被活細(xì)胞中的具有還原活性的酶(好像主要是琥珀酸脫氫酶)還原生成粉紅色的還原產(chǎn)物,所以活組織部...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色網(wǎng)狀纖維染色Gordon-Sweets銀氨染色法黑色:網(wǎng)狀纖維紅色:胞核(核固紅復(fù)染)黃棕色:膠原纖維淡紅色:細(xì)胞質(zhì)(紅液復(fù)染)彈性纖維染色Gomori醛復(fù)紅染色法*甲醛生理鹽水液固定的染色效果比較好顯示彈性、膠原纖維的雙重組合染色法藍(lán)綠色:彈性纖維紅色:膠原纖維黃色:背景糖類染色過碘酸-Schiff(PAS)染色法紅色:糖原及其他PAS反應(yīng)陽性物質(zhì)藍(lán)色:細(xì)胞核南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。英瀚斯生物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包。病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色服務(wù),HE染色。吉林推薦的病理實(shí)驗(yàn)外包病理實(shí)驗(yàn)外包中,HE染色,比較常見的病理染色。蘇木精-伊紅染色法(hematoxylin-...
●原因:①組織脫水,透明不夠。②浸蠟時(shí)間過長、浸蠟溫度過高。③組織脫出是由于脫水、透明時(shí)間不夠,或組織中含有乙醇等,石蠟不易滲入組織中故導(dǎo)致石蠟與組織分離。④二甲苯使用時(shí)間過久?!窠鉀Q方法:①必須按組織大小厚薄選擇脫水、透明時(shí)間。②依組織的性質(zhì)和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)確定浸蠟時(shí)間、控制包埋溫度。一般這種情況難以補(bǔ)救。③脫水,透明滲蠟不夠,應(yīng)重新熔化,退回入二甲苯和酒精,再進(jìn)行滲蠟包埋。④更換二甲苯。2.切片皺褶太多且不能完全展開●原因:①石蠟太軟或室溫過高。②切片刀上粘有殘余的石蠟,刀口不干凈。③組織浸蠟時(shí)間不夠或脫水、透明不夠。④切片刀不鋒利?!窠鉀Q方法:①可將蠟塊放入冰箱中冰凍后切片。并在切片時(shí)一邊切片...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色fish染色介紹,熒光原位雜交技術(shù)(fluorescence in situ hybridization),簡稱FISH。 是利用熒光標(biāo)記的特異核酸探針與細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的靶DNA分子或RNA分子雜交,通過在熒光顯微鏡或共聚焦激光掃描儀下觀察熒光信號(hào),來確定與特異探針雜交后被染色的細(xì)胞或細(xì)胞器的形態(tài)和分布,或者是結(jié)合了熒光探針的DNA區(qū)域或RNA分子在染色體或其他細(xì)胞器中的定位。FISH比較常使用的靶序列是16S rRNA,根據(jù)rRNA目標(biāo)區(qū)域可設(shè)計(jì)寡核苷酸探針,進(jìn)行種屬特異性鑒定;將處理好的樣品置于熒光顯微鏡下,選擇分散較好的區(qū)域來觀察。三色(或者更多)熒光激發(fā)下,觀察到不同...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色HE染色常見問題:Q1:HE染色比較常見的紅藍(lán)失調(diào)答:(1)偏藍(lán)色:蘇木素染色過深,分化不夠;伊紅試劑過期;伊紅染色時(shí)間太短,分化過度。(2)偏紅色:蘇木素染色過淺,分化過度;組織固定不佳,細(xì)胞核不著色;脫蠟不徹底,蘇木素染不上;蘇木素氧化成熟不夠;伊紅染色過深,分化不足。Q2:HE染色后出現(xiàn)的大白色斑塊或斑點(diǎn)答:脫蠟前烤片溫度偏低,時(shí)間過短,蠟未完全融化;切片在脫蠟溶劑中停留時(shí)間過短;脫蠟溶劑使用太久,得更新。病理實(shí)驗(yàn)外包檢測,選擇一家專業(yè)放心的實(shí)驗(yàn)平臺(tái),真實(shí)靠譜。浙江專業(yè)的病理實(shí)驗(yàn)外包病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹掃描電鏡檢測:掃描電子顯微鏡的制造是依據(jù)電子與物質(zhì)...
病理實(shí)驗(yàn)外包比較常見的實(shí)驗(yàn)是免疫組化染色,免疫組織化學(xué)的突出優(yōu)點(diǎn)。1.高度的特異性:抗原--抗體反應(yīng)是特異性比較強(qiáng)的反應(yīng)之一。免疫組織化學(xué)所用的抗體必須是特異性強(qiáng)的多價(jià)或單價(jià)抗體,具有高度的識(shí)別能力,在抗原識(shí)別上可達(dá)到單個(gè)氨基酸的水平。2.敏感性高:現(xiàn)代免疫組織化學(xué)采用各種有效方法比較大限度保存細(xì)胞或組織內(nèi)待檢物質(zhì)的抗原性,或采用各種增敏方法,或使用高敏感、高親和力的抗體等手段,保證可檢出細(xì)胞內(nèi)超微量的抗原成分,用顯微鏡觀察結(jié)果。因此,它是在細(xì)胞、分子水平或基因水平的檢測技術(shù)。3.方法步驟統(tǒng)一:若掌握一種基本的技術(shù)操作方法步驟,則一通百通。4.形態(tài)、機(jī)能和代謝密切結(jié)合:免疫組化是一種綜合性檢測...
病理實(shí)驗(yàn)外包常見染色介紹Warthin-Starry銀染:Warthin-Starry銀染染色原理在于螺旋體表面的黏蛋白與銀結(jié)合,呈黑色。染色結(jié)果:菌絲及顆粒呈黑色,背景呈黃色。銀染一種是檢測聚丙烯酰胺凝膠中蛋白質(zhì)的方法,其原理是銀離子在堿性pH環(huán)境下被還原成金屬銀,沉淀在蛋白質(zhì)的表面上顯色。銀染的方法種類很多,有文獻(xiàn)報(bào)道的就有100多種。但是其準(zhǔn)確的染色機(jī)制還不是特別地清楚。由于銀染的靈敏度很高,可染出膠上低于1ng的蛋白質(zhì)點(diǎn),故普遍地用在2D凝膠分析上,及極低蛋白含量測定的垂直凝膠中。主要是用于垂直凝膠電泳中低豐度蛋白的檢測,如內(nèi)源性GST-Pulldown、Co-IP等實(shí)驗(yàn)中相互作用蛋白...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色組織脫水注意事項(xiàng):1.脫水必須在有蓋的玻璃品中進(jìn)行,防止吸收空氣中的水分。2.在更換高一級(jí)的脫水劑時(shí),比較好不要移動(dòng)材料以免損壞,可用吸管吸出器皿中的脫水劑,再用吸水吸盡器皿內(nèi)剩余液,然后于皿中加入高一級(jí)脫水劑。3.在低濃度酒精中,每級(jí)停留不宜太長,否則易使組織變軟,助長材料的解體。4.在高濃度或純酒精中,每級(jí)停留的時(shí)間也不宜太長,否則會(huì)使組織變脆,影響切片。5.如需過夜,應(yīng)停留在70%酒精中。6.脫水必須徹底,否則不易透明,甚至使透明劑內(nèi)出現(xiàn)白色混濁現(xiàn)象病理實(shí)驗(yàn)外包,科研實(shí)驗(yàn)好幫手。湖北靠譜的病理實(shí)驗(yàn)外包實(shí)驗(yàn)室病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色fish染色介紹,熒光原位雜交技術(shù)(f...
病理實(shí)驗(yàn)外包,冰凍切片取樣實(shí)驗(yàn)步驟:一、取材應(yīng)盡可能快地采取新鮮的材料,防止組織發(fā)生死后變化。二、速凍1.將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內(nèi)(直徑約2cm)。2.如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒組織,然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內(nèi)。3.當(dāng)盒底部接觸液氮時(shí)即開始?xì)饣序v,此時(shí)小盒保持原位切勿浸入液氮中,大約10~20s組織即迅速冰結(jié)成塊。4在制成凍塊后,即可置入恒冷箱切片機(jī)冰凍切片。5.若需要保存,應(yīng)快速以鋁箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱貯存?zhèn)溆?。三、固?.樣品托上涂一層OCT包埋膠,將速凍組織置于其上,4℃冰箱預(yù)冷5~10min讓OCT膠浸透組織。2.取下組織置于錫箔或者...
病理實(shí)驗(yàn)外包,染色常見染色介紹天狼星紅染色:主要由天狼星紅染色液、Mayer蘇木素染色液組成,主要用于各種組織病變時(shí)對(duì)膠原纖維異常或纖維增生的研究中,在普通光學(xué)顯微鏡下心臟血管等組織的膠原纖維被染成紅色,在偏振光鏡下對(duì)各種纖維化病變的分型和分級(jí)研究有一定的幫助作用。采用免疫組化技術(shù)也可顯示Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維,但所用抗體昂貴,操作費(fèi)時(shí),而采用天狼星紅染色試劑便宜,操作簡單。天狼星紅染色液操作步驟1、組織固定于10%福爾馬林固定液,常規(guī)脫水包埋。2、切片厚6μm,常規(guī)脫蠟至水。3、天狼星紅染色液滴染1h。4、流水稍沖洗,去除切片表面染液。5、Mayer蘇木素染色液染細(xì)胞核8~10min。6、流水沖洗...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色黏液物質(zhì)(黏多糖)染色1.Mowry阿爾辛藍(lán)過碘酸雪夫(ABPAS)染色法(1956)紅色:中性黏液物質(zhì)藍(lán)色:酸性黏液物質(zhì)紫紅色:混合性黏液物質(zhì)2.愛先藍(lán)(PH2.5)法藍(lán)色:唾液酸、弱硫酸化黏液物質(zhì)、一般粘液紅色:胞核不著色:強(qiáng)硫酸化黏液物質(zhì)3、愛先藍(lán)(PH1.0)法藍(lán)色:含硫酸黏液物質(zhì)不著色:非硫酸化酸性黏液物質(zhì)紅色:復(fù)染后的胞核南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。細(xì)胞組技術(shù)人員畢業(yè)于東南大學(xué)、華中科技大學(xué)等**高校生物學(xué)相關(guān)專業(yè),具有碩士研究生以上學(xué)歷,熟練掌握細(xì)胞學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn),可開展多種細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 病理實(shí)驗(yàn)外包檢測-南京英瀚斯-第三方檢測機(jī)構(gòu)。黑龍江哪家...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹普魯士藍(lán)染色:普魯士藍(lán)染色(Prussianbluereaction)又稱為含鐵血黃素染色,即經(jīng)過亞鐵**鉀和稀酸處理后可以產(chǎn)生藍(lán)色,常見于吞噬細(xì)胞內(nèi)會(huì)間質(zhì)內(nèi),主要顯示三價(jià)鐵鹽。Perls普魯士藍(lán)是非常經(jīng)典的組織化學(xué)反應(yīng),是顯示組織內(nèi)三價(jià)鐵的一種敏感、傳統(tǒng)優(yōu)良的方法,其染色原理為:亞鐵**鉀溶液使三價(jià)鐵離子從蛋白質(zhì)中被稀鹽酸分離出來,三價(jià)鐵與亞鐵**鉀反應(yīng),生成一種不溶解的藍(lán)色化合物即三價(jià)鐵的亞鐵**物普魯士藍(lán),所以該反應(yīng)被稱為普魯士藍(lán)反應(yīng)。三價(jià)鐵的亞鐵**物是一種很穩(wěn)定的化合物,在反應(yīng)后可用紅色染色劑進(jìn)行復(fù)染,如核固紅、伊紅、中性紅等。Perlsstain常...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹油紅O染色:油紅O脂肪染色法是指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內(nèi)的脂肪常采用油紅O進(jìn)行染色的方法,油紅O為脂溶性染料,在脂肪內(nèi)能高度溶解,可特異性的使組織內(nèi)甘油三酯等中性脂肪著色。肝細(xì)胞內(nèi)的脂肪滴呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色1.標(biāo)本人或動(dòng)物的肝組織等,甲醛—鈣液固定,冰凍切片,厚10μm。2.改良的油紅O染色液油紅O0.5g,50%乙醇100ml。將油紅O溶于乙醇內(nèi),且不斷攪拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶內(nèi)保存?zhèn)溆谩?.染色步驟①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油紅O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自來水終止分化;④蘇木素復(fù)染核,自來水返藍(lán),甘油...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹VonKossa染色:簡介:鈣結(jié)節(jié)的形成為成骨細(xì)胞特有,Vonkossa染色法是染色礦化結(jié)節(jié)的經(jīng)典方法,利用硝酸銀與鈣鹽的復(fù)分解反應(yīng)形成可被還原的銀鹽,在強(qiáng)光或紫外光下或者強(qiáng)還原劑作用下使其還原為黑色的金屬銀。簡要流程:石蠟切片/細(xì)胞爬片/冷凍切片→脫蠟至水→硝酸銀滴染→蘇木素染核→伊紅染色→脫水、透明、封片(中性樹膠)→Vonkossa染**(鈣鹽沉積區(qū)域呈黑色或棕黑色,細(xì)胞核呈藍(lán)色,背景呈紅色;或者鈣鹽沉積區(qū)域呈黑色或棕黑色,背景呈紅色)。VonKossa染色利用金屬離子置換反應(yīng)檢測組織中鈣鹽沉積,由硝酸銀溶液中的銀離子置換組織中沉積的鈣離子。該染色可用于...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色切片常見問題及解決方法:1.切片彎曲且不能形成直帶●原因:①蠟塊上下或左右兩邊不平行。②蠟塊與切片刀刀口不平行。③組織塊外形不整齊。④切片刀各處的鋒利程度不一致?!窠鉀Q方法:①將蠟塊四邊反復(fù)修平對(duì)稱。②調(diào)節(jié)蠟塊夾持器,使其與切片刀平行。③修整組織塊時(shí),注意修切整齊。④移動(dòng)切片刀,更換刀口位置。2.切片上出現(xiàn)裂紋●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②組織中可能含有較硬之物質(zhì),如固定液之結(jié)晶石灰質(zhì)。③包埋時(shí)石蠟凍結(jié)太慢?!窠鉀Q方法:①切片刀某處有缺口,可調(diào)換刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口過多且不平整,可先將刀鋒垂直在磨刀石上輕輕磨數(shù)次,然后按常規(guī)磨刀田。②組織中硬性物質(zhì)...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色常見染色介紹PAS染色:PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。PAS染色利用高碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色,顯示糖原定位。染色步驟1.石蠟切片脫蠟至水(細(xì)胞涂片,冰凍切片直接水洗);2.蒸餾水洗;3.過碘酸酒清夜10min;4.自來水沖洗10min;5.Schiff氏液10min;6.流水沖洗5min;7.用哈瑞蘇木精或邁耶蘇木精染核3min(細(xì)胞核染色過深可用鹽酸酒精分...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色冰凍切片介紹;冰凍切片是指將組織在冷凍狀態(tài)下直接用切片機(jī)切片。它實(shí)際上是以水為包埋劑,將組織進(jìn)行冰凍至堅(jiān)硬后切片的。在冰凍切片前組織不經(jīng)過任何化學(xué)藥品處理或加熱過程,明顯縮短了制片時(shí)間。同時(shí),由于此法不需要經(jīng)過脫水、透明和浸蠟等步驟,因而較適合于脂肪、神經(jīng)組織和一些組織化學(xué)的制片,并作為快速切片的方法應(yīng)用在臨床診斷。一、取材應(yīng)盡可能快地采取新鮮的材料,防止組織發(fā)生死后變化。二、速凍1.將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內(nèi)(直徑約2cm)。2.如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒組織,然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內(nèi)。3.當(dāng)盒底部接觸液氮時(shí)即開始?xì)饣序v,此時(shí)小盒保持原...
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色組織樣本保存液多聚甲醛的配置:4%多聚甲醛固定液(4%ParaformaldehydeFixSolution,4%PFAFixSolution)是一種普遍用于免疫組化(Immunohistochemistry,IHC)、免疫熒光(Immunofluorescence,IF)、免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry,IC)、流式分析(Fluorescence-activatedcellsorting,FACS)等檢測時(shí)組織、組織切片、細(xì)胞等生物樣品固定的溶液??棇W(xué)上,4%的多聚甲醛穿透力強(qiáng),固定均勻,能使組織硬化,有利于切片。該固定劑造成的組織收縮少,損傷小,...