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常規(guī)HE染色技術(shù)服務(wù)檢測中心:專業(yè)、高效-生物醫(yī)學(xué)
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高效液相色譜分離原理離子對(IonPairChromatography)離子對色譜法是將一種(或多種)與溶質(zhì)分子電荷相反的離子(稱為對離子或反離子)加到流動相或固定相中,使其與溶質(zhì)離子結(jié)合形成疏水型離子對化合物,從而控制溶質(zhì)離子的保留行為。其原理可用下式表示:X水相Y-水相===XY-有機(jī)相式中:X水相--流動相中待分離的有機(jī)離子(也可是陽離子);Y-水相--流動相中帶相反電荷的離子對(如氫氧化四丁基銨、氫氧化十六烷基三甲銨等);XY---形成的離子對化合物。當(dāng)達(dá)平衡時:KXY=[XY-]有機(jī)相/[X]水相[Y-]水相根據(jù)定義,分配系數(shù)為:DX=[XY-]有機(jī)相/[X]水相=KXY[Y-]水相[討論:DX與保留值的關(guān)系]離子對色譜法(特別是反相)解決了以往難以分離的混合物的分離問題,諸如酸、堿和離子、非離子混合物,特別是一些生化試樣如核酸、核苷、生物堿以及藥物等分離。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng),有需求可以來電咨詢!舟山賽默飛世爾液相色譜系統(tǒng)采購
高效液相色譜法有“四高一廣”的特點(diǎn):①高壓:流動相為液體,流經(jīng)色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。②高速:分析速度快、載液流速快,較經(jīng)典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成,一般小于1小時。③高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達(dá)到比較好分離效果,比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。④高靈敏度:紫外檢測器可達(dá)0.01ng,進(jìn)樣量在μL數(shù)量級。⑤應(yīng)用范圍廣:百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析,特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析,顯示出優(yōu)勢。⑥柱子可反復(fù)使用:用一根柱子可分離不同化合物⑦樣品量少、容易回收:樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞,可以收集單一組分或做制備。金華賽默飛世爾液相色譜系統(tǒng)廠家直銷液相色譜系統(tǒng),就選上海禹重實(shí)業(yè)有限公司,讓您滿意,歡迎新老客戶來電!
高效液相色譜的應(yīng)用高效液相色譜應(yīng)用非常,幾乎遍及定量定性分析的各個領(lǐng)域。(1)分離混合物高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。通過與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,高效液相色譜法所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,可分離并同時測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì),能夠分離復(fù)雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發(fā)展,還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對其的分離。(2)生化分析由于高效液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域,并已成為解決生化分析問題**有前途的方法。(3)儀器聯(lián)用高效液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向。高效液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等:高效液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類等.使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。
高效液相色譜相關(guān)術(shù)語峰面積(peakarea,A)—峰與峰底所包圍的面積。保留時間(retentiontime,tR)——從進(jìn)樣開始到某個組分在柱后出現(xiàn)濃度極大值的時間。理論塔板數(shù)(theoreticalplatenumber,N)——用于定量表示色譜柱的分離效率(簡稱柱效)。分離度(resolution,R)——相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值。也叫分辨率,表示相鄰兩峰的分離程度。R≥1.5稱為完全分離?!吨袊幍洹芬?guī)定R應(yīng)大于1.5。拖尾因子(tailingfactor,T)——T=,用以衡量色譜峰的對稱性。也稱為對稱因子(symmetryfactor)或不對稱因子(asymmetryfactor)。《中國藥典》規(guī)定T應(yīng)為0.95~1.05。T1.05為拖尾峰。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司是一家專業(yè)提供液相色譜系統(tǒng)的公司,有想法的可以來電咨詢!
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雙LC的VanquishDuo系統(tǒng)更多細(xì)節(jié)VanquishDuo系統(tǒng)可采用多種分析檢測器,包括質(zhì)譜(MS)、二極管陣列檢測(DAD)、電霧式檢(CAD)、可變波長檢測(VWD)和熒光檢測(FLD)。提供強(qiáng)大的分離性能采用兩個相似的或者不同的色譜柱運(yùn)行樣品以提高通量或盡可能提高其分析效率。也可以額外選配一個柱溫箱,以分別進(jìn)行色譜柱的溫度控制。簡化操作受保護(hù)的ThermoScientific?Viper?免除工具手?jǐn)Q接頭,接近零死體積并且符合人體工程學(xué)的設(shè)計(jì)。二極管陣列檢測(DAD)、電霧式檢(CAD)、可變波長檢測(VWD)和熒光檢測(FLD)。舟山賽默飛世爾液相色譜系統(tǒng)采購
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