三、脂質(zhì)體組成對(duì)轉(zhuǎn)染效率的影響不同脂質(zhì)組成的影響：研究發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)體的組成對(duì)不同類型細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率有影響。例如，四種不同的DOTAP與DOPE重量比的脂質(zhì)體配方對(duì)不同細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染效率不同。Huh7和AGS細(xì)胞的比較好脂質(zhì)體組成是T1P0和T3P1；COS7細(xì)胞是T3P1和T1P1；A549細(xì)胞是T1P1和T1P36。脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)的影響：脂質(zhì)體復(fù)合物的形狀會(huì)隨著DOPE比例的增加從層狀結(jié)構(gòu)變?yōu)榈沽切谓Y(jié)構(gòu)，但在所有使用的細(xì)胞系中，特定結(jié)構(gòu)在轉(zhuǎn)染效率上沒(méi)有明確的優(yōu)勢(shì)6。四、其他因素的影響血清的影響：對(duì)于某些細(xì)胞，血清的存在會(huì)影響轉(zhuǎn)染效率。如Siha細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí)轉(zhuǎn)染效率更高，而在Caco-2細(xì)胞的轉(zhuǎn)染中，血清在本實(shí)驗(yàn)室條件下并不影響轉(zhuǎn)染效率19。細(xì)胞傳代次數(shù)：Caco-2細(xì)胞在2-5次細(xì)胞傳代時(shí)轉(zhuǎn)染效率比較高9。綜上所述，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染對(duì)不同類型細(xì)胞的影響存在多方面的差異，包括轉(zhuǎn)染效率、影響因素以及脂質(zhì)體組成等。在進(jìn)行脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)時(shí)，需要根據(jù)不同的細(xì)胞類型優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，以獲得比較好的轉(zhuǎn)染效果。提高 RNA 轉(zhuǎn)染效率是 RNA 研究領(lǐng)域中的重要課題。Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑幫轉(zhuǎn)染

聯(lián)合使用其他技術(shù)優(yōu)化DNA和RNA轉(zhuǎn)移的轉(zhuǎn)染試劑在肌肉細(xì)胞中的應(yīng)用：在C2C12細(xì)胞中，比較了五種商業(yè)轉(zhuǎn)染試劑（Lipofectamine®3000、Viafect?、Fugene®HD、C2C12CellAvalanche®和JetOPTIMUS®）的轉(zhuǎn)染效率7。通過(guò)優(yōu)化DNA:轉(zhuǎn)染劑比例和細(xì)胞密度，所有試劑都達(dá)到了超過(guò)60%的轉(zhuǎn)染效率，且對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和活力的影響有限。然而，在C2C12細(xì)胞中優(yōu)化的用于DNA轉(zhuǎn)移的條件下，這些試劑對(duì)siRNA的轉(zhuǎn)移效率較低，并且對(duì)原代肌肉細(xì)胞的毒性較高。這提示在使用轉(zhuǎn)染試劑時(shí)，可以通過(guò)聯(lián)合使用其他技術(shù)或優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，以提高轉(zhuǎn)染效率并降低細(xì)胞死亡。例如，可以進(jìn)一步研究不同試劑之間的聯(lián)合使用，或者優(yōu)化轉(zhuǎn)染后的培養(yǎng)條件，以降低細(xì)胞毒性。綜上所述，在不同細(xì)胞模型中提高RNA轉(zhuǎn)染試劑的轉(zhuǎn)染效率同時(shí)降低細(xì)胞死亡，可以通過(guò)選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑、優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件以及聯(lián)合使用其他技術(shù)等方法來(lái)實(shí)現(xiàn)。未來(lái)的研究可以進(jìn)一步深入探討不同細(xì)胞模型中比較好的轉(zhuǎn)染策略，以滿足不同研究領(lǐng)域的需求。福建陽(yáng)離子轉(zhuǎn)染試劑化學(xué)轉(zhuǎn)染的效率可能取決于幾個(gè)因素，如使用的試劑類型、靶細(xì)胞的來(lái)源和性質(zhì)，以及選擇的DNA與試劑比例。

選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑GenMute試劑在人肝*細(xì)胞模型中的應(yīng)用：在人肝*細(xì)胞HepG2和Huh7.5中，研究對(duì)比了脂質(zhì)體類的Lipofectamine?RNAiMAX和HepG2特異性的聚合物類GenMute?兩種轉(zhuǎn)染試劑30。通過(guò)細(xì)胞成像分析發(fā)現(xiàn)，GenMute處理的細(xì)胞對(duì)熒光標(biāo)記的陰性對(duì)照siRNA的攝取高于LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。并且，MTT實(shí)驗(yàn)表明，GenMute轉(zhuǎn)染的細(xì)胞比LipofectamineRNAiMAX處理的細(xì)胞具有更高的存活率。這提示在人肝*細(xì)胞模型中，GenMute試劑可能是更適合的轉(zhuǎn)染試劑，在提高轉(zhuǎn)染效率的同時(shí)降低了細(xì)胞死亡。siRNA共軛殼聚糖納米顆粒在脊髓損傷模型中的應(yīng)用：在創(chuàng)傷性脊髓損傷（SCI）模型中，通過(guò)制備帶有抗體靶向部分的siRNA共軛殼聚糖復(fù)合物，以抑制誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）的表達(dá)，該復(fù)合物主要靶向M1巨噬細(xì)胞31。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Ab-siRNA共軛殼聚糖納米顆粒在體外***降低了M1極化巨噬細(xì)胞中的iNOS表達(dá)，具有高轉(zhuǎn)染效率和低細(xì)胞毒性。在體內(nèi)應(yīng)用該納米顆粒后，SCI后的iNOS表達(dá)和細(xì)胞凋亡均減少。這說(shuō)明在特定的病理模型中，針對(duì)性設(shè)計(jì)的納米顆粒轉(zhuǎn)染試劑可以在提高轉(zhuǎn)染效率的同時(shí)降低細(xì)胞死亡。

其他轉(zhuǎn)染試劑：機(jī)制概述：例如CALNPRNAi轉(zhuǎn)染試劑，其轉(zhuǎn)染機(jī)制可能與傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑不同。該試劑轉(zhuǎn)染效率***高于傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑，同時(shí)毒性比較低。其具體轉(zhuǎn)染機(jī)制可能涉及對(duì)RNA的攝取、細(xì)胞利用率及細(xì)胞毒性的綜合作用。在不同細(xì)胞類型中的表現(xiàn)：目前文獻(xiàn)中未明確提及CALNPRNAi轉(zhuǎn)染試劑在特定細(xì)胞類型中的具體表現(xiàn)，但研究表明該試劑為難轉(zhuǎn)染細(xì)胞的RNA干擾帶來(lái)了新的選擇7。綜上所述，不同RNA轉(zhuǎn)染試劑在不同細(xì)胞類型中的轉(zhuǎn)染機(jī)制存在差異，這些差異主要表現(xiàn)在與RNA的結(jié)合方式、進(jìn)入細(xì)胞的途徑以及在細(xì)胞內(nèi)的釋放和作用方式等方面。了解這些差異對(duì)于選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行特定細(xì)胞類型的RNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)具有重要意義?；诓《镜霓D(zhuǎn)染，或者更具體地稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)，涉及使用病毒載體將特定的核酸序列帶入宿主細(xì)胞。

對(duì)細(xì)胞周期的影響：在微小RNA-1180轉(zhuǎn)染腎*細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中，F(xiàn)CM結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染miR-1180后，位于G0/G1期的細(xì)胞比例明顯增大，而位于S期和G2/M期的細(xì)胞比例明顯下降，表明細(xì)胞周期被阻滯在G0/G1期1。對(duì)轉(zhuǎn)染效率的影響：在脂質(zhì)體介導(dǎo)RNA干擾質(zhì)粒轉(zhuǎn)染雞成骨細(xì)胞條件的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)中，對(duì)轉(zhuǎn)染前細(xì)胞融合度、質(zhì)粒質(zhì)量與脂質(zhì)體體積比及轉(zhuǎn)染時(shí)間進(jìn)行優(yōu)化，在熒光倒置顯微鏡下觀察并計(jì)算轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果表明，在轉(zhuǎn)染前細(xì)胞融合達(dá)到90％以上，質(zhì)粒DNA與脂質(zhì)體比例為1:2.5時(shí)轉(zhuǎn)染效率比較高，并且在轉(zhuǎn)染后48h轉(zhuǎn)染效果比較好3。在篩選更優(yōu)的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的實(shí)驗(yàn)中，分別用RNAiMax及MessageMax將modGFP轉(zhuǎn)染入MEF細(xì)胞，流式分析發(fā)現(xiàn)MessageMax的轉(zhuǎn)染效率為（83.33%±3.23%），略高于RNAiMax的（78.77%±6.12%），兩者沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但是流式分析和熒光顯微鏡觀察均表明MessageMax轉(zhuǎn)染后1周內(nèi)的蛋白翻譯表達(dá)效率更高，是更高效的modRNA轉(zhuǎn)染試劑8。

RNA 轉(zhuǎn)染試劑的效果受到多種因素的影響，包括細(xì)胞類型、轉(zhuǎn)染試劑種類、轉(zhuǎn)染條件等。在實(shí)際應(yīng)用中，需要根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑和優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，以提高轉(zhuǎn)染效率并減少對(duì)細(xì)胞的毒性作用。 常用的物理/機(jī)械轉(zhuǎn)染方法包括電穿孔、聲孔、基因顯微注射和激光照射。大鼠轉(zhuǎn)染試劑

脂質(zhì)顆粒的加入導(dǎo)致內(nèi)體DNA釋放增加。Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑幫轉(zhuǎn)染

優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件MOI值對(duì)Lentivirus載體轉(zhuǎn)染許旺細(xì)胞的影響：以Lentivirus三質(zhì)粒系統(tǒng)構(gòu)建病毒載體，在體外對(duì)原代大鼠許旺細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，研究不同MOI值（***復(fù)數(shù)）對(duì)轉(zhuǎn)染效率的影響32。結(jié)果顯示，在病毒轉(zhuǎn)染3天后，各不同MOI值的培養(yǎng)孔中開(kāi)始出現(xiàn)少量熒光反應(yīng)，第5天時(shí)熒光數(shù)量明顯增多，第7天達(dá)到高峰，第9天與第7天變化不明顯。從細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率來(lái)看，不同的MOI值效果不同，MOI值為5和10時(shí)轉(zhuǎn)染效率較高。這表明在使用Lentivirus載體轉(zhuǎn)染許旺細(xì)胞時(shí)，優(yōu)化MOI值可以提高轉(zhuǎn)染效率。同時(shí)，未提及該轉(zhuǎn)染過(guò)程對(duì)細(xì)胞死亡的影響，但可以通過(guò)進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)，如細(xì)胞活性檢測(cè)等，來(lái)確定在提高轉(zhuǎn)染效率的同時(shí)對(duì)細(xì)胞死亡的影響。Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑幫轉(zhuǎn)染