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科研前沿的探索者-細(xì)胞遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)服務(wù)檢測(cè)中心
營養(yǎng)瓊脂方瓶(羅氏瓶)通常是指營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的一種包裝形式,適合實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物培養(yǎng)使用。營養(yǎng)瓊脂是一種基礎(chǔ)培養(yǎng)基,用于非苛養(yǎng)微生物的培養(yǎng),以及在生化或血清學(xué)測(cè)試前的質(zhì)量控制和純度檢查。以下是營養(yǎng)瓊脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化鈉:5.0g/L-瓊脂:15.0g/L-終pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-稱取33g營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-攪拌加熱煮沸至完全溶解。-分裝到方瓶(羅氏瓶)中,通常分裝量為100mL或500mL。-121℃高壓滅菌15分鐘。3.**使用方法**:-滅菌完成后,取出方瓶并冷卻至大約40-45°C。-如果需要富集,可在滅菌后加入血液或其他生物液體。-在無菌條件下,將培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中或作為液體培養(yǎng)基使用。-培養(yǎng)基凝固后,可將培養(yǎng)皿放置在熱空氣烤箱中,用較低溫度烘烤幾分鐘,以去除使用前培養(yǎng)皿上的任何水分。4.**儲(chǔ)存方法**:-粉末形式的培養(yǎng)基應(yīng)儲(chǔ)存在10至30°C之間,容器需緊密封閉。-制備好的培養(yǎng)基應(yīng)在20-30°C的環(huán)境中儲(chǔ)存。血瓊脂基礎(chǔ)2號(hào)可用于觀察細(xì)菌生長引起的溶血現(xiàn)象,這有助于細(xì)菌的鑒定。PLET瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
霉菌培養(yǎng)基中的凝固劑展現(xiàn)出好的的適配性,恰似為霉菌構(gòu)建的 “理想棲息平臺(tái)”。常用的凝固劑如瓊脂,其獨(dú)特的物理化學(xué)性質(zhì)使其在培養(yǎng)基中能夠形成穩(wěn)定的凝膠結(jié)構(gòu),為霉菌提供了良好的生長支撐。這種凝膠狀態(tài)不僅能夠固定霉菌的位置,防止其在培養(yǎng)過程中過度擴(kuò)散,便于觀察和研究霉菌的菌落形態(tài)、生長速率和代謝特征;而且具有適宜的孔隙率,允許氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)在培養(yǎng)基中自由擴(kuò)散,滿足霉菌生長對(duì)氣體交換和營養(yǎng)攝取的需求。同時(shí),凝固劑的用量可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行精確調(diào)整,以適應(yīng)不同霉菌種類和培養(yǎng)目的的要求。例如,對(duì)于一些需要較高氧氣含量的霉菌培養(yǎng),可以適當(dāng)降低凝固劑的用量,增加培養(yǎng)基的透氣性;而對(duì)于一些需要精確控制生長位置的霉菌培養(yǎng),則可以增加凝固劑的用量,提高培養(yǎng)基的硬度和穩(wěn)定性。這種強(qiáng)適配性的凝固劑為霉菌的培養(yǎng)提供了多樣化的選擇,有助于優(yōu)化霉菌的培養(yǎng)條件,提高培養(yǎng)效果,推動(dòng)霉菌相關(guān)研究和應(yīng)用的發(fā)展。KF平板巴氏芽孢桿菌的芽孢因其高抵抗力和在惡劣條件下存活的能力,在生物技術(shù)領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用潛力。
霉菌培養(yǎng)基的碳源構(gòu)成猶如一座豐富的 “營養(yǎng)寶庫”,為霉菌生長提供多元選擇。它不僅含有常見的葡萄糖、蔗糖等糖類,還涵蓋了淀粉、纖維素等復(fù)雜多糖。這些碳源在霉菌生長過程中發(fā)揮著不同作用。簡單糖類能快速供能,滿足霉菌初期快速增殖的能量需求;而復(fù)雜多糖則隨著培養(yǎng)進(jìn)程逐漸被霉菌分泌的酶分解利用,持續(xù)為其生長提供穩(wěn)定碳源。例如,在工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)青霉素時(shí),米曲霉可利用培養(yǎng)基中的淀粉,經(jīng)酶解后轉(zhuǎn)化為可吸收的糖類,維持長時(shí)間的代謝活動(dòng),保障青霉素的高效合成,這種多樣的碳源構(gòu)成適應(yīng)了霉菌復(fù)雜的代謝特性,使其在不同生長階段都能獲取充足能量,促進(jìn)霉菌的茁壯成長與產(chǎn)物合成。
PALCAM瓊脂基礎(chǔ)(PalcamAgarBase)是一種用于分離單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。它的特點(diǎn)如下:1.**成分**:PALCAM瓊脂基礎(chǔ)包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、玉米淀粉、肉胃酶消化物、酵母膏粉、氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、檸檬酸鐵銨、七葉苷、氯化鋰、酚紅和瓊脂等成分。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),為李斯特氏菌提供適宜的生長環(huán)境。3.**選擇性**:氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如鹽酸吖啶黃素、硫酸多粘菌素B和頭孢他啶)能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽性菌,從而提高對(duì)李斯特氏菌的選擇性。4.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。5.**配制方法**:通常稱取71.9g培養(yǎng)基粉末,加入1升蒸餾水,加熱至完全溶解,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。使用時(shí),冷卻至50℃,加入配套的添加劑,混勻后傾入無菌培養(yǎng)皿。6.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在PALCAM瓊脂上生長時(shí),會(huì)水解七葉苷生成黑色的6,7-二羥基香豆素,形成灰綠色菌落,中心凹陷,周圍有黑色環(huán)。
肉浸液肉湯是一種基礎(chǔ)的微生物培養(yǎng)基,其主要特點(diǎn)和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉湯主要由絞碎牛肉、氯化鈉、蛋白胨和磷酸氫二鉀組成,再加上一定量的蒸餾水。具體配比為:絞碎牛肉500g、氯化鈉5g、蛋白胨10g、磷酸氫二鉀2g、蒸餾水1000mL。2.**制作方法**:首先將絞碎的去筋膜無油脂牛肉與蒸餾水混合后放冰箱過夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小時(shí),使肉渣完全凝結(jié)成塊,用絨布過濾,并擠壓收集全部濾液,加水補(bǔ)足原量。然后加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并過濾,分裝燒瓶,121℃高壓滅菌30分鐘。3.**用途**:肉浸液肉湯通常用于培養(yǎng)那些營養(yǎng)要求不是特別高的細(xì)菌,如溶血性鏈球菌及其他營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了細(xì)菌生長所需的氮源、維生素和生長因子。4.**培養(yǎng)特征**:在肉浸液肉湯中,細(xì)菌可以很好地生長,通常表現(xiàn)為肉湯混濁,這是由于細(xì)菌的代謝活動(dòng)導(dǎo)致的。5.**儲(chǔ)存**:肉浸液肉湯的脫水培養(yǎng)基應(yīng)避光儲(chǔ)存于25℃下陰涼干燥處,開過封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)蓋緊瓶蓋注意密封儲(chǔ)存??耸想p糖鐵試驗(yàn)時(shí)間通常控制在18-24小時(shí),以確保細(xì)菌發(fā)酵充分且不過度,避免影響判斷結(jié)果。BPA培養(yǎng)皿
TGC液體培養(yǎng)基不僅用于無菌試驗(yàn),還可用于牛奶和乳制品中霉菌及酵母菌總數(shù)的測(cè)定。PLET瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
DTA培養(yǎng)基,也稱為葡萄糖胰蛋白胨瓊脂,是一種用于分離培養(yǎng)嗜熱菌芽孢的培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**用途**:DTA培養(yǎng)基主要用于乳制品中嗜熱需氧芽孢菌計(jì)數(shù),以及嗜熱菌芽孢(包括需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢)的分離培養(yǎng)。2.**成分**:其配方包含胰酪蛋白胨、葡萄糖、瓊脂和溴甲酚紫。具體成分為每升培養(yǎng)基中包含胰酪蛋白胨10.0克、葡萄糖5.0克、瓊脂15.0克和溴甲酚紫0.04克。3.**pH值**:DTA培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在6.7±0.1(25℃)。4.**檢驗(yàn)原理**:胰酪蛋白胨提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為可發(fā)酵的糖,溴甲酚紫作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。5.**用法**:稱取DTA培養(yǎng)基30.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。6.**生長特征**:嗜熱脂肪芽孢桿菌在DTA培養(yǎng)基上的生長特征為黃色菌落。7.**質(zhì)量控制**:進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn)時(shí),按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種質(zhì)控菌株,放置55℃需氧培養(yǎng)48小時(shí)?;厥章视?jì)算時(shí),用TSA瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基。8.**儲(chǔ)存條件**:DTA培養(yǎng)基應(yīng)貯存于避光、干燥處,用后立即旋緊瓶蓋;貯存期三年。PLET瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿