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Mueller-Hinton瓊脂培養(yǎng)皿

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-09-08

溴十六烷三甲銨瓊脂基礎(chǔ)(CetrimideAgar)是一種用于微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**用途**:主要用于銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)的選擇性分離和培養(yǎng)。2.**原理**:明膠胰酶水解物提供氮源;氯化鎂和硫酸鉀可刺激綠色的色素的產(chǎn)生;溴化十六烷三甲銨作為選擇性抑菌劑,對(duì)多種革蘭氏陽(yáng)性菌和部分革蘭氏陰性菌具有抑制作用,特別是對(duì)非銅綠假單胞菌的細(xì)菌;甘油作為碳源;瓊脂作為凝固劑。3.**配方**:典型的配方包括明膠胰酶水解物、氯化鎂、硫酸鉀、溴化十六烷三甲銨和瓊脂。pH值控制在7.4±0.2(25℃)。4.**實(shí)驗(yàn)方法**:將培養(yǎng)基干粉溶解于蒸餾水中,加入甘油,煮沸使混合均勻,分裝三角瓶,進(jìn)行高壓滅菌,冷卻至45-50℃時(shí)傾入無(wú)菌平皿。5.**結(jié)果觀察**:銅綠假單胞菌在該培養(yǎng)基上通常形成具有綠色的色素的菌落,而其他非目標(biāo)細(xì)菌則受到抑制。6.**注意事項(xiàng)**:本培養(yǎng)基為細(xì)菌鑒定的一部分,需做其他補(bǔ)充試驗(yàn)以確保鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性。7.**儲(chǔ)存條件**:通常在干燥、避光的條件下儲(chǔ)存,以保持其有效性。

改良的配方提高了培養(yǎng)基的靈敏性和適用性。通過更加準(zhǔn)確的成分控制,優(yōu)化了其抑菌效果、增強(qiáng)了生長(zhǎng)因子。Mueller-Hinton瓊脂培養(yǎng)皿

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LB瓊脂(Miller)是一種用于實(shí)驗(yàn)室的微生物培養(yǎng)基,特別適合于大腸桿菌(E.coli)的培養(yǎng)。這種培養(yǎng)基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化鈉,以及作為凝固劑的瓊脂。Miller配方的特點(diǎn)是含有較高的氯化鈉濃度,這有助于選擇性地培養(yǎng)某些細(xì)菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化鈉(NaCl):10.0g-瓊脂(Agar):15.0g**制備方法**:1.將40克LB瓊脂粉末加入到1升蒸餾水中。2.加熱至沸騰,同時(shí)攪拌以確保粉末完全溶解。3.在121°C下高壓滅菌15分鐘。4.滅菌后,冷卻至50°C,然后分裝到無(wú)菌培養(yǎng)皿中。**應(yīng)用**:-適用于非選擇性培養(yǎng)大腸桿菌菌株,用于克隆、質(zhì)粒DNA制備和重組蛋白生產(chǎn)。-當(dāng)加入適當(dāng)?shù)目股镔|(zhì)時(shí),也適合選擇性培養(yǎng)。**特點(diǎn)**:-無(wú)需復(fù)雜配置,快速溶解,方便使用。-經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,適合大量培養(yǎng)基的制備。**儲(chǔ)存條件**:-通常建議在常溫(10-30℃)下儲(chǔ)存。LB瓊脂(Miller)因其營(yíng)養(yǎng)豐富、制備簡(jiǎn)單的應(yīng)用,成為分子生物學(xué)和微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基之一。在實(shí)際使用時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書或相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作,以確保培養(yǎng)效果。毛蘚菌瓊脂6號(hào)平板DC培養(yǎng)基主要用于分離大腸桿菌等腸道革蘭氏陰性細(xì)菌,因?yàn)檫@些細(xì)菌對(duì)去氧膽酸鹽的敏感性較低。

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麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MacConkeyAgar,簡(jiǎn)稱MAC)是一種具有中等選擇性的培養(yǎng)基,主要用于分離和鑒定革蘭氏陰性桿菌,尤其是腸道致病菌。以下是它的一些特點(diǎn)和用途:1.**成分**:麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、胨、豬膽鹽(或牛、羊膽鹽)、氯化鈉、瓊脂、乳糖、結(jié)晶紫和中性紅。這些成分共同作用,為細(xì)菌提供生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng),同時(shí)具有選擇性和鑒別性。2.**選擇性**:膽鹽和結(jié)晶紫的添加可以抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng),而促進(jìn)某些革蘭氏陰性菌(如大腸桿菌和沙門氏菌)的生長(zhǎng)。3.**鑒別性**:乳糖作為可發(fā)酵的糖類,與中性紅結(jié)合,可以區(qū)分發(fā)酵乳糖和不發(fā)酵乳糖的細(xì)菌。發(fā)酵乳糖的細(xì)菌會(huì)產(chǎn)生酸性環(huán)境,使中性紅從無(wú)色變?yōu)榧t色,從而形成特征性的菌落顏色。4.**菌落特征**:在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上,大腸桿菌通常形成紅色或粉紅色的菌落,而沙門氏菌和志賀氏菌則形成無(wú)色或淡色的菌落。5.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值一般調(diào)節(jié)至7.2±0.2(25℃)。6.**用途**:主要用于糞便、分泌物中腸道致病菌及腸球菌的分離培養(yǎng),也用于檢測(cè)或驗(yàn)證水、乳品和其他材料中的大腸菌群滴度。

木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD)是一種選擇性培養(yǎng)基,用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng),以下是其特點(diǎn):1.**用途**:專門用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng),也適用于其他腸道菌的選擇性分離。2.**成分**:包含酵母浸粉、L-賴氨酸、乳糖、蔗糖、木糖、氯化鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鐵銨、去氧膽酸鹽、苯酚紅和瓊脂,pH值控制在7.4±0.2(25℃)。3.**檢驗(yàn)原理**:酵母浸粉提供維生素和輔助因子,木糖、乳糖和蔗糖作為可發(fā)酵碳源。賴氨酸的加入有助于鑒別沙門氏菌。沙門氏菌發(fā)酵木糖產(chǎn)酸,產(chǎn)生的脫羧酶使賴氨酸脫羧,導(dǎo)致pH升高。硫代硫酸鈉及檸檬酸鐵銨與硫化氫反應(yīng),產(chǎn)生黑色硫化鐵,苯酚紅作為pH指示劑,去氧膽酸鹽抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng)。4.**用法**:稱取57g培養(yǎng)基,溶解在1000ml蒸餾水中,不要過分加熱,冷至50-55℃時(shí)傾入無(wú)菌平皿,部分開蓋干燥2小時(shí),然后蓋上備用。無(wú)需高壓滅菌,在24小時(shí)內(nèi)使用。5.**微生物質(zhì)控**:使用質(zhì)控菌株進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn),如腸炎沙門氏菌CMCC50760、大腸埃希氏菌ATCC25922、福氏志賀氏菌CMCC51572等,觀察其在XLD培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特征。EMB培養(yǎng)基成為鑒定腸道細(xì)菌的一種常用工具,特別是在食品衛(wèi)生和臨床微生物學(xué)方面。

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葉酸測(cè)定培養(yǎng)基是一種專門用于測(cè)定食品中葉酸含量的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**營(yíng)養(yǎng)成分**:該培養(yǎng)基包含酪蛋白氨基酸和葡萄糖作為氮源和碳源,乙酸鈉作為選擇劑和能量物質(zhì),以及氯化鈉、硫酸錳等鹽離子和多種維生素成分,為鼠李糖乳桿菌(Lactobacillusrhamnosus)等微生物提供所需的生長(zhǎng)因子。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至6.8±0.2,以適應(yīng)特定微生物的生長(zhǎng)需求。3.**用途**:主要用于食品中葉酸的微生物測(cè)定,如GB5009.211-2022《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中葉酸的測(cè)定》中所述。4.**制備方法**:通常將干粉培養(yǎng)基與蒸餾水或去離子水混合,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝試管中,每管5ml,加入標(biāo)準(zhǔn)品或測(cè)試樣品,用無(wú)菌蒸餾水或去離子水調(diào)整體積至10ml,121℃高壓滅菌5分鐘。5.**質(zhì)量控制**:使用特定的質(zhì)控菌株(如鼠李糖乳桿菌ATCC7469)接種待測(cè)試培養(yǎng)基,在36±1℃下培養(yǎng)20-40小時(shí),觀察生長(zhǎng)情況,如肉湯混濁和試管呈梯度渾濁。6.**儲(chǔ)存條件**:應(yīng)在避光、干燥處儲(chǔ)存,未開封保質(zhì)期通常為三年。7.**注意事項(xiàng)**:在配制和使用過程中,應(yīng)遵循無(wú)菌操作,避免污染,確保水的潔凈程度,因?yàn)樗械娜~酸殘留或容器的污染直接影響試驗(yàn)結(jié)果。瓊脂培養(yǎng)基的制備: 將瓊脂培養(yǎng)基中加入去氧膽酸鹽等特定成分,以制備適合特定實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡呐囵B(yǎng)基。LPM瓊脂 含七葉苷與檸檬酸鐵銨平板

使用VRBA培養(yǎng)皿時(shí),通常將待測(cè)樣品涂布在培養(yǎng)皿表面,然后進(jìn)行培養(yǎng),觀察并鑒定產(chǎn)生的菌落。Mueller-Hinton瓊脂培養(yǎng)皿

大豆酪蛋白肉湯培養(yǎng)基(TrypticSoyBroth,TSB)是一種通用的微生物培養(yǎng)基,應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng),特別是在藥品抑菌劑效力檢測(cè)中用于細(xì)菌檢測(cè)。以下是其特點(diǎn)介紹:1.**成分**:TSB培養(yǎng)基含有胰酪胨、大豆木瓜蛋白酶消化物、葡萄糖、磷酸氫二鉀和氯化鈉。胰酪胨和大豆木瓜蛋白酶消化物提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;葡萄糖作為碳源;磷酸氫二鉀作為緩沖劑;氯化鈉維持均衡的滲透壓。2.**pH值**:TSB培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)整至7.3±0.2(25℃),適合多種微生物的生長(zhǎng)。3.**用途**:TSB培養(yǎng)基適用于的細(xì)菌培養(yǎng),包括需氧菌和厭氧菌。它特別用于消毒劑消毒效果的測(cè)試、蠟樣芽孢桿菌的多管發(fā)酵法測(cè)定、溶血性鏈球菌選擇性增菌培養(yǎng)等。4.**制備方法**:將TSB培養(yǎng)基粉末稱量后溶解于蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸以幫助溶解,然后進(jìn)行高壓滅菌。5.**質(zhì)量控制**:在使用TSB培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)進(jìn)行微生物靈敏度試驗(yàn),以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn)。6.**儲(chǔ)存條件**:TSB培養(yǎng)基應(yīng)在干燥、避光的條件下儲(chǔ)存,通常在室溫下保存。7.**有效期**:在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存條件下,TSB培養(yǎng)基的有效期通常為三年

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