數(shù)字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說,數(shù)字PCR對(duì)結(jié)果的判定不依賴于擴(kuò)增曲線循環(huán)Ct值,不受擴(kuò)增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個(gè)數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。數(shù)字PCR基本原理是將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中,使每個(gè)微滴單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個(gè)單元都會(huì)對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,然后再對(duì)每個(gè)單元進(jìn)行熒光信號(hào)的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對(duì)而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中,這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。 數(shù)字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,歡迎客戶來電!山西體積小數(shù)字PCR維修
相對(duì)于二代測(cè)序、基因芯片和定量PCR而言,數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢(shì):●靈敏度可達(dá)到單個(gè)核酸分子:檢測(cè)限低至0.001%,主要系為數(shù)字PCR可以實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)DNA/RNA的生物濃縮;●無需標(biāo)準(zhǔn)曲線活參照基因進(jìn)行對(duì)比來測(cè)定核算量,可對(duì)靶分子起始量進(jìn)行***定量,直 接獨(dú)處DNA分子的個(gè)數(shù);●適合環(huán)境復(fù)雜樣品的檢測(cè):終點(diǎn)PCR檢測(cè),不依賴Ct值,不依賴擴(kuò)增效率,能克服PCR***劑的影響,避免樣品間的交叉***問題,適合各類復(fù)雜環(huán)境中的樣本進(jìn)行***定量,如動(dòng)血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等;陜西安全數(shù)字PCR要多少錢浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ,有想法可以來我司咨詢!
數(shù)字PCR的應(yīng)用檢驗(yàn)檢疫食品安全?轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)(國標(biāo))?病原菌鑒定?動(dòng)物源性檢測(cè)分析科研?基因表達(dá)差異監(jiān)測(cè)?CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗(yàn)證?甲基化含量鑒定?單細(xì)胞研究:測(cè)序、PCR臨床?**液體活檢:早篩、用藥、監(jiān)測(cè)、復(fù)發(fā)?無創(chuàng)產(chǎn)前篩查:低成本、快速?***性疾病:HBV、HIV定量據(jù)悉,MiniDrop?**團(tuán)隊(duì)由微流控、光學(xué)、機(jī)電學(xué)、化學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)等多學(xué)科交叉領(lǐng)域的**組成,依托精密儀器研發(fā)、生物納米材料與分子生物學(xué)等平臺(tái),以微滴式數(shù)字PCR儀為**,打造了全自動(dòng)液體處理工作站、核酸提取試劑盒等創(chuàng)新產(chǎn)品,致力于解決**、***領(lǐng)域的精細(xì)診斷。
二代測(cè)序輔助建庫目前靶向測(cè)序建庫方法包括擴(kuò)增子方法,在均相溶液中,當(dāng)擴(kuò)增引物增加時(shí),由于擴(kuò)增引物之間的相互作用,從而影響擴(kuò)增的效率;如果將其分散到大量微液滴中擴(kuò)增,將可降低引物間相互作用,提高擴(kuò)增效率。同時(shí)還可以實(shí)現(xiàn)對(duì)于少量模板的有效擴(kuò)增,得到更多的有效測(cè)序數(shù)據(jù)。CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗(yàn)證CRISPR-Cas9技術(shù)的發(fā)明,是基因編輯技術(shù)的一大突破,但如何驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)是否成功,仍需要高靈敏度的檢測(cè)方法,數(shù)字PCR技術(shù)可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團(tuán)隊(duì)發(fā)明了以CRISPR為基礎(chǔ)的SHERLOCK技術(shù)可以對(duì)核酸進(jìn)行高靈敏度的定性檢測(cè),但精確定量評(píng)估時(shí)仍采取了數(shù)字PCR進(jìn)行確認(rèn)。數(shù)字PCR浚和(上海)儀器科技有限公司 服務(wù)值得放心。
基因檢測(cè)**前沿的兩種方法是:高通量測(cè)序(NGS)和數(shù)字PCR(dPCR)。高通量測(cè)序技術(shù)又稱“下一代”測(cè)序技術(shù),可以一次對(duì)幾十萬到幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測(cè)定,功能強(qiáng)大,但是實(shí)驗(yàn)操作較復(fù)雜,數(shù)據(jù)分析難度較大,檢測(cè)周期長,成本較高。數(shù)字PCR技術(shù)是目前**精細(xì)**靈敏的基因檢測(cè)技術(shù),借助微液滴或微腔室,通過單個(gè)模板分子的PCR擴(kuò)增,可實(shí)現(xiàn)不依賴于標(biāo)準(zhǔn)曲線和參照樣本的***定量。與NGS相比,數(shù)字PCR靈敏度高、檢測(cè)速度快、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果易讀、成本低廉等優(yōu)勢(shì)使其更適合臨床檢測(cè),成為精細(xì)醫(yī)療實(shí)現(xiàn)平民化、大眾化的比較好選擇。此外,數(shù)字PCR還在基因表達(dá)差異研究、拷貝數(shù)變異(CNV)研究、低豐度DNA模板分子的精確定量、甲基化含量鑒定、二代測(cè)序輔助建庫、CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗(yàn)證、轉(zhuǎn)基因成分的檢測(cè)、移植排異監(jiān)控、腸道菌群分析以及***基因組檢測(cè)等眾多領(lǐng)域中有著優(yōu)異的應(yīng)用??:?上海)儀器科技有限公司力于提供數(shù)字PCR ,歡迎您的來電哦!山西體積小數(shù)字PCR維修
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數(shù)字PCR(DigtalPCR)是一種核酸定量精密檢測(cè)的新興技術(shù)手段,于20世紀(jì)由Vogelstein等提出。它是將稀釋后的核酸模板分配到大量不同的反應(yīng)單元中,使每個(gè)反應(yīng)單元中有一個(gè)或沒有核酸。利用PCR擴(kuò)增的同時(shí),加入可檢測(cè)熒光。待擴(kuò)增結(jié)束時(shí),使用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采集每個(gè)反應(yīng)單元出現(xiàn)的熒光次數(shù),從而定量檢測(cè)樣本中的核酸濃度。基于分液方式的不同,數(shù)字PCR主要分為3種:微流體數(shù)字PCR(MicrofluidicdigitalPCR,mdPCR)、微滴數(shù)字PCR(DropletdigitalPCR,ddPCR)和芯片數(shù)字PCR(ChipdigitalPCR,cdPCR)。山西體積小數(shù)字PCR維修