L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必要的一種營養(yǎng),但其在溶液中不安定,會(huì)自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對(duì)細(xì)胞危害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定,不會(huì)自發(fā)的降解。細(xì)胞運(yùn)用其機(jī)制是:在細(xì)胞培訓(xùn)時(shí),細(xì)胞會(huì)日益向培養(yǎng)液中獲釋一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細(xì)胞會(huì)將這兩種水解產(chǎn)物吸收運(yùn)用。細(xì)胞運(yùn)用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)方針相像,連續(xù)的將低濃度水準(zhǔn)的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不會(huì)生成剩余的氨,更有利于細(xì)胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以取而代之等摩爾的L-谷氨酰胺,適用于所有的細(xì)胞,幾乎無須適應(yīng),并且可以延長細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間,縮減傳代次數(shù),即節(jié)約了時(shí)間也節(jié)省了錢財(cái)。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培訓(xùn)的細(xì)胞相比之下,活性減低得更慢。延滯期稍為延長的緣故是肽酶的釋放和二肽的消化需一定的時(shí)間。NEAA(非須要氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能下降細(xì)胞培育時(shí)細(xì)胞自身生產(chǎn)非須要氨基酸的副作用,有效性推動(dòng)細(xì)胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需。M199特別適用于非轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng),也常用于病毒學(xué)、以及大鼠胰腺上皮細(xì)胞和小鼠晶狀體組織的培養(yǎng)。山東RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)
1640是培養(yǎng)基代號(hào)。RPMI-1640是改進(jìn)型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和ai細(xì)胞的培養(yǎng),包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和ai細(xì)胞,是使用常為廣的培養(yǎng)基之一。
針對(duì)廣的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。
RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會(huì)自發(fā)降解,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長。
山東RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)RPMI-1640是改進(jìn)型的McCoy ‘s 5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)。
隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,方便快捷。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑,對(duì)細(xì)胞無毒性作用,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時(shí)間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動(dòng)較大對(duì)細(xì)胞生長產(chǎn)生不利的影響??捎糜跓oCO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時(shí)酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時(shí)使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點(diǎn),使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會(huì)干擾流式細(xì)胞分析時(shí)候的檢測。此外,一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會(huì)干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,青霉素能夠干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,對(duì)革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細(xì)菌核糖體30S亞單位結(jié)合,抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成,對(duì)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對(duì)革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預(yù)防絕大部分的細(xì)菌污染。
無血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細(xì)胞貼壁生長,包括以下幾大類物質(zhì):1)促貼壁物質(zhì):一般為細(xì)胞外基質(zhì),如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細(xì)胞功能的分化因子,對(duì)許多細(xì)胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進(jìn)來自中胚層細(xì)胞的貼壁與分化,這些細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞、肉瘤細(xì)胞、粒細(xì)胞、腎上皮細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、CHO細(xì)胞、成肌細(xì)胞等。2)促生長因子:針對(duì)不同細(xì)胞添加不同的生長因子。也是刺激細(xì)胞生長、維持細(xì)胞功能的重要物質(zhì),有些是許多細(xì)胞必不可少的,如胰島素。3)酶抑制劑:培養(yǎng)貼壁生長的細(xì)胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養(yǎng)基中需含酶抑制劑,以終止酶的消化作用,達(dá)到保護(hù)細(xì)胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。4)結(jié)合蛋白和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白:常見如轉(zhuǎn)鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大,可增加培養(yǎng)基的粘度,保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷。許多旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常見的。Fischer’s培養(yǎng)基含有多類細(xì)胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機(jī)鹽等多種成分。
培養(yǎng)液的滲透壓是一個(gè)非常重要的因素,細(xì)胞通??赡褪?60mOsm/kg~320mOsm/kg。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動(dòng)。特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會(huì)明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì)。向培養(yǎng)液中添加HEPES時(shí)需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。緩沖系統(tǒng)大多數(shù)細(xì)胞所需pH在-。但是,細(xì)胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類不同而不同。成纖維細(xì)胞喜歡較高pH(-),而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH(-)。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與CO2體系進(jìn)行緩沖,因此,氣相中的CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為;如果CO2濃度維持在10%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為。細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊,以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液,在pH-范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,但是非常昂貴,在高濃度時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉()共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下,細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色。RPMI RPMI 1640 培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨(dú)特的效果,是因?yàn)槠渲泻羞€原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。上海醫(yī)療細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商
針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的 McCoy’s 5A改良培養(yǎng)基。山東RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)
CMRL培養(yǎng)基是由康諾特醫(yī)學(xué)研究室(ConnaughtMedicalResearchLaboratories)設(shè)計(jì)出來的,初用于L細(xì)胞(Earle)的無血清培養(yǎng)。CMRL培養(yǎng)基添加馬血清或小牛血清后,特別適用于猴腎細(xì)胞的克隆培養(yǎng)以及其他哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的培養(yǎng)。本產(chǎn)品含有多類細(xì)胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機(jī)鹽等多種成分,但不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長因子,故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。注意事項(xiàng)本產(chǎn)品經(jīng)過濾除菌,使用時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染;為保持本產(chǎn)品的比較好使用效果,請(qǐng)勿進(jìn)行凍融處理;本產(chǎn)品用于科研或進(jìn)一步研究使用,不用于診斷和。山東RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)
深圳市華晨陽科技有限公司是一家集基因檢測、分子診斷、干細(xì)胞研發(fā)生產(chǎn)銷售于一體的國家高新技術(shù)企業(yè)。公司擁有20多項(xiàng)**,部分專利已經(jīng)轉(zhuǎn)化應(yīng)用于市場。公司于2016在深圳沙井恒昌榮高新產(chǎn)業(yè)園建立新的GMP廠房及研發(fā)實(shí)驗(yàn)室。產(chǎn)品主要應(yīng)用于基因檢測、醫(yī)院、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、生物制藥、出入境檢驗(yàn)檢疫、診斷試劑、公安刑偵法醫(yī)等。近年來,公司不斷加大自主研發(fā)投入,積極引進(jìn)人才和技術(shù),并與國內(nèi)外多家科研院所以及醫(yī)院有著緊密合作,促進(jìn)產(chǎn)學(xué)研成果轉(zhuǎn)化。
公司通過中國CFDA,美國FDA,歐盟CE,以及SGS,TUV實(shí)地認(rèn)證,擁有進(jìn)出口權(quán),本著“質(zhì)量至上,求實(shí)創(chuàng)新,質(zhì)量服務(wù),合作共贏”產(chǎn)品遠(yuǎn)銷全球,并獲得廣大客戶一致認(rèn)可。
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