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來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-05-31

    所有反應(yīng)孔背景信號(hào)好、Ct值都在19~25之間,熒光擴(kuò)增曲線呈典型的S型,說明本發(fā)明實(shí)例1提供的血液樣本快速提取法用于熒光PCR擴(kuò)增的方法具有較好的可行性。將四份不同來源不同的人血液樣本進(jìn)行熒光PCR擴(kuò)增檢測(cè),每份樣本平行三次,結(jié)果分別如圖2、圖3、圖4、圖5所示,由圖可見,每個(gè)樣本的平行實(shí)驗(yàn),其曲線的Ct值很接近且≤25。說明本發(fā)明實(shí)例提供的血液樣本快速提取法用于熒光PCR擴(kuò)增的方法有可靠的重復(fù)性以及較好的均一性。實(shí)施例2與市場(chǎng)現(xiàn)有的血液基因組提取試劑盒產(chǎn)品對(duì)比。本發(fā)明的具體步驟如下:將**管顛倒混勻后,吸取100μL血液至,加入200μL的核酸釋放劑(20mM~80mM的氫氧化鈉溶液、~、~、~、~***鈉、~3%甲酰胺),渦旋混勻,然后5000g離心30s,棄上清,獲得細(xì)胞沉淀;然后再加入200μL核酸釋放劑,渦旋1min至沉淀完全散開,5000g離心30s,棄上清;向細(xì)胞沉淀中加入50μL核酸釋放劑,渦旋振蕩1min,室溫放置5min,12000g離心30s,取上清液即為提取的血液基因組DNA;取上清液3μL,加入到配制好的熒光PCR反應(yīng)液,于ABI7500熒光PCR儀中進(jìn)行擴(kuò)增。選用某公司的血液基因組提取試劑盒作為方法比對(duì),具體操作過程:將取血管顛倒混勻數(shù)次,吸取200μL血液于。這款口腔拭子目前非常多的用于疾病篩查,基因檢測(cè),分子診斷,HIV采集細(xì)胞,BINGDU 微生物等采集。江蘇海綿口腔拭子廠家直銷

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    紫藍(lán)色結(jié)節(jié)、瘺孔等,分泌物量、性質(zhì)、顏色、氣味等,陰道有無橫隔、縱隔、斜隔、狹窄、閉鎖、雙陰道等畸形,宮頸大小、形狀、色澤,有無糜爛、舊裂、贅生物、紫藍(lán)色結(jié)節(jié)及接觸性出血等,宮頸管分泌物性狀,宮頸陰道段長(zhǎng)度及雙宮頸畸形等。盆腔檢查檢查前先排便,排便困難者可先導(dǎo)尿及服用緩瀉劑,有陰道出血者需先消毒外陰并戴無菌手套;月經(jīng)期一般不做盆腔及陰道檢查;未婚者一般*作肛門指診檢查。

(1)雙合診:即陰道腹部雙合診。檢查者戴無菌手套,以示指、中指蘸潤(rùn)滑液后順陰道后壁輕輕插入,檢查陰道有無腫塊、狹窄、瘢痕、彈性等,子宮頸高度、大小、質(zhì)地、硬度,有無舉痛,后穹窿是否飽滿,軟硬度,有無彈性,結(jié)節(jié)、腫塊、浸潤(rùn)、觸痛。然后將另1手置于下腹壁與陰道內(nèi)手指配合檢查盆腔生殖器先作宮體觸診,注意子宮體大小、位置、形狀、硬度、活動(dòng)度及有無壓痛。將內(nèi)診指放在一側(cè)穹窿,雙手檢查附件與宮旁組織有無增厚、壓痛、包塊,如有腫塊需查清大小、活動(dòng)度、質(zhì)地、形狀,有無觸痛以及與子宮有無粘連,有無向周圍組織臟器浸潤(rùn)等,先查不痛的一側(cè),然后再查對(duì)側(cè)。

(2)三合診:又稱陰道直腸腹部三合診。用示指插入陰道、中指插入肛門內(nèi)觸診。 河北正規(guī)口腔拭子批發(fā)口腔拭子適用于采集任何年齡段人群的DNA樣本。

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    加入20μteinaseK溶液,混勻。加入200μL緩沖液GB,充分顛倒混勻,在56℃放置14min(期間顛倒混合樣品數(shù)次),溶液應(yīng)變清亮,若未完全變清亮,延長(zhǎng)裂解時(shí)間至完全變清亮。加人200μL無水乙醇,充分振蕩混勻10s,此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀。將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個(gè)吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12,000rpm離心30s,倒掉廢液,將吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD(已加入無水乙醇),12,000rpm離心30s,棄廢液,將吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW(已加入無水乙醇),12,000rpm離心30s,棄廢液,將吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm(~13,400×g)離心2min。將吸附柱放置新的,以徹底晾干吸附柱中殘余的漂洗液。向吸附柱中懸空滴加50~200μL洗脫緩沖液,室溫放置2~5分鐘,12,000rpm(~13,400×g)離心2min,將溶液收集到離心管中,測(cè)定濃度及純度后,取3μL,加入到配制好的熒光PCR反應(yīng)液,于ABI7500熒光PCR儀中進(jìn)行擴(kuò)增。用本發(fā)明和對(duì)照產(chǎn)品對(duì)8份樣本同時(shí)進(jìn)行熒光PCR擴(kuò)增。結(jié)果如圖6,本發(fā)明所有反應(yīng)孔背景信號(hào)好、Ct值都在21~25之間,熒光擴(kuò)增曲線呈典型的S型。這款口腔拭子是經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn),封閉式獨(dú)立包裝,無菌、無酶、保證結(jié)果可靠。

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