CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點(diǎn),但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準(zhǔn)確性。CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn):3.1標(biāo)本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時間過長、過短對**質(zhì)量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設(shè)計的無毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內(nèi)送檢驗科。(5)標(biāo)本置于37℃水浴.精子運(yùn)動參數(shù)具有溫度敏感性,因此要求計數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時間準(zhǔn)確,因**樣本隨放置時間的延長,精子活動力及活動率有減少的趨勢。標(biāo)本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進(jìn)行分析。(7)檢測精子活動力,標(biāo)本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標(biāo)本,通常會增加碰撞的頻率,并可能由此出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標(biāo)本。所有操作人員都應(yīng)接受規(guī)范的CASA分析儀使用培訓(xùn),嚴(yán)格按照使用指南進(jìn)行操作?。上海CASA精子分析DSL
精子分析儀工作原理以灰度識別CASA為例,采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合,**標(biāo)本液化后吸入計數(shù),通過顯微鏡放大后,用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動、靜態(tài)圖像后輸入計算機(jī)。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運(yùn)動移位及運(yùn)動參數(shù),對采集圖像進(jìn)行精子密度、活動力、活動率、運(yùn)動特征等幾十項檢驗項目動態(tài)分析,由計算機(jī)處理后,打印出“**分析檢查報告以及精子動態(tài)特征分布圖”。一次能對1000個精子進(jìn)行動態(tài)檢測分析,2-3分鐘即可完成檢測[1]。優(yōu)點(diǎn):操作簡便,用量少,檢測速度快,重復(fù)性優(yōu)于人工檢測,并且能夠快速、準(zhǔn)確的測定精子密度、活力、精子分級等,還可提供精子運(yùn)動狀態(tài)的多種參數(shù)等。缺點(diǎn):影響分析結(jié)果的因素較多,除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外,不同的精子計數(shù)池的相對準(zhǔn)確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果。北京兔子精子分析DSLHamilton Thorne精子分析儀采用先進(jìn)的光學(xué)成像,能夠?qū)崟r分析精子的動力學(xué)參數(shù),提供有效的精子質(zhì)量評估。
男科實驗室中通常所指的質(zhì)量包含三個方面:實驗室內(nèi)部質(zhì)量、醫(yī)生處置的質(zhì)量以及結(jié)果的質(zhì)量[3]。1.實驗室內(nèi)部質(zhì)量與**分析有關(guān)的實驗室內(nèi)部質(zhì)量主要是工作人員的素質(zhì)和所采用儀器的質(zhì)量。工作人員應(yīng)經(jīng)過特殊的培訓(xùn)?儀器必須處于正常狀態(tài)、確保準(zhǔn)確的結(jié)果?操作應(yīng)符合規(guī)程[4]。CASA系統(tǒng)本身的質(zhì)量難于評定。硬件?如顯微鏡、影像攝影機(jī)和計算機(jī)經(jīng)檢查便可確定其可靠性。但軟件并非如此?軟件中存在不確定的因素?算法是軟件中**重要的部分?通常制造者保守這些秘密;因此?有關(guān)軟件的數(shù)學(xué)上、信息性的、統(tǒng)計學(xué)的或生物測量方面的檢查實驗室難于進(jìn)行。
精液顯微鏡檢查(1)精子存活率:排精后30~60分鐘,正常精子存活率應(yīng)為80%~90%,精子存活率降低是導(dǎo)致不育的重要原因。(2)精子活動力:指精子活動狀態(tài),也是指活動精子的質(zhì)量。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動力分為4級:①精子活動好,運(yùn)動迅速,活潑有力,直線向前運(yùn)動;②精子活動較好,運(yùn)動速度尚可,游動方向不定,呈直線或非直線運(yùn)動,帶有回旋;③精子運(yùn)動不良,運(yùn)動遲緩,原地打轉(zhuǎn)或抖動,向前運(yùn)動能力差;④死精子,精子完全不活動。正常精子活動力應(yīng)在③級以上,若>40%的精子活動不良(③、④)級,常是導(dǎo)致男性不育的重要原因。精子活動力低,主要見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***,應(yīng)用某些藥物如抗瘧藥、雄***等所致。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),擺動性(WOB)?:實際的曲線路徑關(guān)于平均路徑的擺動值。
二、生化及免疫學(xué)檢驗:5、精漿肉堿測定【正常參考值】濃度為239.56±l05.59umol/L?!九R床意義】精漿肉堿測定精漿中的肉堿主要由附睪分泌,其次是精囊。精漿中肉堿分為游離肉堿和乙酰肉堿二種,附睪中含高濃度的肉堿,主要與精子在附睪成熟時所需的能量來源有關(guān)?,F(xiàn)認(rèn)為精漿肉堿含量和果糖含量的變化,常反映附睪、精囊的功能。精漿肉堿及果糖含量正常,表明附睪、精囊功能正常。當(dāng)肉堿含量高于正常的50%,而果糖含量降低,則提示精囊功能障礙,附睪功能正常;精漿肉堿約為正常含量的50%左右,果糖含量正常,說明附睪功能障礙,精囊功能正常;而肉堿急劇下降,果糖含量亦減少,表示精囊、附睪功能均發(fā)生障礙。6、抗精子抗體(AsAb)測定【正常參考值】陰性?!九R床意義】AsAb檢測對不育原因檢查有重要臨床意義。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb,可抑制精子的活動,干擾精子的運(yùn)行,阻礙精子穿透及精卵結(jié)合,使受精發(fā)生障礙。即使已經(jīng)受精,也可能影響發(fā)育中的胚胎,造成免疫性流產(chǎn)。不育夫婦AsAb陽性者占25%-30%,當(dāng)精子輸出管道受阻、睪丸損傷、炎癥、附睪等生殖系***時,系精子外逸而產(chǎn)生的自身抗體。精子分析儀能分析與精子運(yùn)動功能相關(guān)的各種參數(shù)。上海計數(shù)精子分析精子動力分析
精子分析系統(tǒng)較傳統(tǒng)的分析法比較,具有速度快、量比性好、準(zhǔn)確性高、為臨床和科研提供客觀的檢測依據(jù)。上海CASA精子分析DSL
世界衛(wèi)生組織(WHO)《人類精液及精子—宮頸粘液相互作用實驗室檢驗手冊》于1980年***出版,以滿足臨床與科研對人類精液標(biāo)準(zhǔn)化檢測程序日益增長的需求。該手冊是人類精液實驗室檢查和處理程序及方法的標(biāo)準(zhǔn)操作指南,旨在提高精液分析的質(zhì)量和提高不同實驗室結(jié)果的可比性。在過去40年里,該手冊進(jìn)行了4次修訂與補(bǔ)充(1987年、1992年、1999年和2010年),內(nèi)容涉及精液檢查的標(biāo)準(zhǔn)化操作程序、精子功能、精漿生化、精液處理與冷凍以及質(zhì)量保證等,已成為國際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn),被世界各地臨床和實驗室***使用。中國衛(wèi)生部已在2003年將其納入人類輔助生殖技術(shù)規(guī)范。WHO《人類精液檢查與處理實驗室手冊(第5版)》精液參考值的數(shù)據(jù)是來自全球3大洲8個國家的前瞻性、多中心臨床研究的結(jié)果,通過循證醫(yī)學(xué)研究獲得的精液參數(shù)參考值具有里程碑式意義。自2010年出版以來成為WHO很受歡迎的出版物之一,即使在**近幾年其下載量也在穩(wěn)步增長。它是男科實驗室及全球范圍內(nèi)開展精液分析操作的其他實驗室、醫(yī)院和研究機(jī)構(gòu)使用的標(biāo)準(zhǔn)操作手冊。該手冊在國際大會、科學(xué)會議、以及WHO合作中心、專業(yè)學(xué)會和其他學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)的培訓(xùn)項目中進(jìn)行了***傳播。截止到2021年,已被3000余篇同行評議論文和評論引用。上海CASA精子分析DSL