1.基本檢查:是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法,不僅是男科實(shí)驗(yàn)室,任何開展精液檢查的實(shí)驗(yàn)室都能遵循。精子計(jì)數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的方法,但計(jì)數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法,伊紅染色和低滲腫脹實(shí)驗(yàn)只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對(duì)于精子活動(dòng)率大于40%的樣本沒有必要做存活率評(píng)估。與第5版手冊(cè)中淡粉色判讀為活精子不同,明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明,鑒別快速前向運(yùn)動(dòng)精子非常重要。因此,關(guān)于精子活力分級(jí),第6版手冊(cè)建議恢復(fù)到快速前向運(yùn)動(dòng)、慢速前向運(yùn)動(dòng)、非前向運(yùn)動(dòng)和不活動(dòng)4個(gè)活力級(jí)別,但精子活動(dòng)率的參考值范圍卻依然是按前向運(yùn)動(dòng)(PR)、非前向運(yùn)動(dòng)(NP)、不活動(dòng)(IM)3個(gè)活力級(jí)別計(jì)算。第6版手冊(cè)強(qiáng)調(diào),精子形態(tài)學(xué)評(píng)估的價(jià)值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(shù)(ART)結(jié)局的預(yù)后,還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對(duì)于3%和5%的精子“正常”形態(tài)率的判斷,則要求必須由訓(xùn)練有素的人員評(píng)估1500個(gè)精子來完成;對(duì)于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數(shù)20%的精液,應(yīng)單獨(dú)計(jì)算并在報(bào)告中注明;精子分析儀節(jié)省時(shí)間,提高實(shí)驗(yàn)室的工作效率,讓醫(yī)生和科研人員更快速地獲取實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果。南京Hamilton Thorne精子分析WOB
擴(kuò)展性檢查:可以在某些情況下由實(shí)驗(yàn)室選擇或根據(jù)臨床醫(yī)生的特殊要求而使用的項(xiàng)目。手冊(cè)增加了精子DNA損傷、遺傳學(xué)和炎癥細(xì)胞等相關(guān)檢查項(xiàng)目。提出了基因突變是導(dǎo)致不育和精液常規(guī)檢查異常的原因。新增了精液相關(guān)細(xì)胞因子、趨化因子等檢測(cè)的方法、試劑、檢測(cè)步驟等內(nèi)容。在精液參數(shù)異常的男性中普遍存在精子DNA損傷,并且已有報(bào)道指出其與精液參數(shù)正常男性的不育有關(guān)。由于與精液質(zhì)量相關(guān),精子DNA損傷檢測(cè)是男性不育檢查中的重要補(bǔ)充內(nèi)容,已成為男科學(xué)基礎(chǔ)和臨床中論述**多、**有前景的精子損傷分子標(biāo)志物之一。本版手冊(cè)增加了大量篇幅對(duì)其原理和檢測(cè)方法進(jìn)行了描述。新增了基因和基因組測(cè)序內(nèi)容。臨床上,越來越多的人意識(shí)到染色體異常[數(shù)量異常、結(jié)構(gòu)異常(包括微缺失和微重復(fù))]和基因突變是導(dǎo)致各種男性不育癥的基礎(chǔ)病因,而這正是在精液分析中觀察到的許多異常的原因。盡管基因和基因組測(cè)序常規(guī)在醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,但一些男科實(shí)驗(yàn)室也在做同樣的檢測(cè)。為明確生殖道炎癥對(duì)于男性不育的影響,泌尿男科醫(yī)生可能提出對(duì)精液中的趨化因子和細(xì)胞因子進(jìn)行評(píng)估。本手冊(cè)納入了精液中白細(xì)胞介素檢測(cè)方法。南京魚精子分析DSLHamilton Thorne精子分析儀采用先進(jìn)的光學(xué)成像,能夠?qū)崟r(shí)分析精子的動(dòng)力學(xué)參數(shù),提供有效的精子質(zhì)量評(píng)估。
二、生化及免疫學(xué)檢驗(yàn):1、精漿果糖測(cè)定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L?!九R床意義】(1)精液果糖為0,可見于先天性兩側(cè)輸精管及精囊腺缺如、兩側(cè)輸精管完全阻塞或逆行**。(2)精液果糖降低,常見于精囊炎和雄***分泌不足,果糖不足可導(dǎo)致精子運(yùn)動(dòng)能量缺乏,甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測(cè)定【正常參考值】金氏法:>255nmol·s-1/L【臨床意義】(1)精漿酸性磷酸酶含量增高,常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。(2)精漿酸性磷酸酶含量降低,常見于前列腺炎患者。(3)精漿酸性磷酸酶檢測(cè)是法醫(yī)鑒定有無精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測(cè)定【正常參考值】36.72±21.43U/L?!九R床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關(guān),其活力不足,可導(dǎo)致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測(cè)定【正常參考值】LDH-X***活性:2620±1340U/L;LDH-X相對(duì)活性:≥0.426。【臨床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性,是精于運(yùn)動(dòng)獲能的關(guān)鍵酶,該酶檢測(cè)可作為診斷男性不育有價(jià)值的指標(biāo)。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失,精子發(fā)生缺陷時(shí)無LDH-X形成,少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。
精子分析儀是計(jì)算機(jī)技術(shù)和圖像處理技術(shù)結(jié)合的**分析儀器設(shè)備,通過顯微鏡下攝像和計(jì)算機(jī)快速分析多個(gè)視野內(nèi)精子的運(yùn)行軌跡,客觀記錄了精子的密度、活動(dòng)力、活動(dòng)率和存活率等各項(xiàng)參數(shù)。計(jì)算機(jī)輔助**分析儀由硬件系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)組成。硬件系統(tǒng)主要由顯微攝像系統(tǒng)、圖像采集系統(tǒng)、恒溫系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)處理系統(tǒng)等四大系統(tǒng)構(gòu)成。此外,儀器一般配有**樣品盒,以確保單層取樣[1]。1.顯微攝像系統(tǒng):由顯微鏡及CCD組成??梢詫?biāo)本信號(hào)通過顯微放大由CCD傳輸?shù)接?jì)算機(jī)2.圖像采集系統(tǒng):由圖像卡構(gòu)成,其功能是對(duì)CCD信號(hào)進(jìn)行抓拍、識(shí)別、預(yù)處理后,將成熟信號(hào)輸送到計(jì)算機(jī)。3.恒溫系統(tǒng):由加溫和保溫設(shè)備組成。加溫是通過熱吹風(fēng)機(jī)不斷將適宜的溫度熱風(fēng)鼓入封閉保溫罩內(nèi),提供穩(wěn)定、可靠的檢查環(huán)境。4.計(jì)算機(jī)系統(tǒng):對(duì)圖像信號(hào)進(jìn)行***系統(tǒng)的加工處理,對(duì)獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行輸出和存儲(chǔ)的設(shè)備。軟件系統(tǒng)采用**的精子質(zhì)量分析軟件,利用現(xiàn)代化的計(jì)算機(jī)識(shí)別技術(shù)和圖像處理技術(shù),對(duì)精子的動(dòng)靜態(tài)特征進(jìn)行***的量化分析,對(duì)精子的密度、活力、活率、運(yùn)動(dòng)軌跡等特征進(jìn)行量的檢測(cè)分析精子分析儀與人工方法相比具有客觀,高效,高精度的優(yōu)點(diǎn)。
七、精子形態(tài)檢查[正常參考值]畸形精子:<10%-15%;凝集精子:<10%;未成熟精細(xì)胞:<1%。[臨床意義]1.精索靜脈曲張病人的畸形精子增多,提示精子在不成熟時(shí)已進(jìn)入精液,或靜脈回流不暢造成陰囊內(nèi)溫度過高和睪丸組織缺氧,或血液帶有毒性代謝產(chǎn)物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸,上述原因均有損于精子形態(tài)。2.精液中凝集精子增多,提示生殖道***或免疫功能異常。3.睪丸曲細(xì)精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時(shí),精液中可出現(xiàn)較多病理性未成熟精細(xì)胞。八、精液細(xì)胞檢查[正常參考值]白細(xì)胞(WBC):<5個(gè)/HP(高倍鏡視野);紅細(xì)胞(RBC):0-偶見/HP。[臨床意義]1.精液中白細(xì)胞增多,常見于精囊炎、前列腺炎及結(jié)核等。2.精液中紅細(xì)胞增多,常見于精囊結(jié)核、前列腺*等。3.精液中若查到*細(xì)胞,對(duì)生殖系*有診斷意義。選擇合適的CASA檢測(cè)原理和設(shè)備,確保幀率要求,避免因設(shè)備問題影響檢測(cè)結(jié)果?。南京Hamilton Thorne精子分析WOB
Hamilton Thorne精子分析儀是一款功能強(qiáng)大、準(zhǔn)確可靠的精子質(zhì)量評(píng)估設(shè)備。南京Hamilton Thorne精子分析WOB
通過結(jié)果的生物學(xué)意義對(duì)結(jié)果質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估?當(dāng)所有具生物學(xué)意義的參數(shù)在測(cè)試中表現(xiàn)出較小的可變性時(shí)則方法學(xué)可變性亦較低方法學(xué)可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評(píng)估獲得的數(shù)值進(jìn)行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運(yùn)動(dòng)性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運(yùn)動(dòng)精子百分率上的相關(guān)性較低]。Holt等報(bào)道了在常規(guī)實(shí)驗(yàn)條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對(duì)**參數(shù)值進(jìn)行比較,其結(jié)果為:采用同一個(gè)測(cè)定池由不同的操作者測(cè)定**參數(shù);變異系數(shù)(CV)是29%?活動(dòng)精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實(shí)際上它揭示了操作者的錯(cuò)誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進(jìn)一步的標(biāo)準(zhǔn)來評(píng)估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學(xué)功能是使卵細(xì)胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來考察精子運(yùn)動(dòng)性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動(dòng)性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(shù)(授精I(xiàn)VF)的發(fā)展使檢測(cè)精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能;同樣可以驗(yàn)證CASA測(cè)定結(jié)果與精子真實(shí)質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高。南京Hamilton Thorne精子分析WOB