人類精子冷凍保存和儲(chǔ)存：增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內(nèi)容，更具可操作性。本手冊(cè)對(duì)人類精子的冷凍保存提出了具體建議：將樣本分管分罐分開(kāi)儲(chǔ)存；對(duì)使用的材料和留存標(biāo)本建立定期核驗(yàn)程序；所有儲(chǔ)罐都應(yīng)有液位監(jiān)控報(bào)警系統(tǒng)，以監(jiān)測(cè)溫度和液氮液位，傳感器應(yīng)連接警報(bào)器，可通過(guò)實(shí)驗(yàn)室人員的終端進(jìn)行提醒。新證據(jù)表明，玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價(jià)值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無(wú)污染液氮直接接觸并快速冷凍，可以防止冰晶的形成，并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無(wú)菌玻璃化冷凍)中，也可以使用封閉系統(tǒng)，不需要無(wú)菌的液氮。計(jì)算機(jī)輔助精子分析根據(jù)初估的精子濃度選擇合適的檢測(cè)方法，確保檢測(cè)過(guò)程的準(zhǔn)確性和可靠性?。南京計(jì)算機(jī)輔助精子分析STR

采集精液前5～7天內(nèi)必須停止性生活，并且不得有**、夢(mèng)遺等情況，還應(yīng)禁煙戒酒，忌服對(duì)生精功能有影響的藥物等。采取精液時(shí)間以晨起為佳，采精前用溫水將雙手、**，尤其是**洗凈?？刹捎?*法或電動(dòng)按摩**法引起排精。精液的排出具有一定順序，開(kāi)頭部分來(lái)自前列腺、附睪及壺腹，伴有大量精子，***部分來(lái)自精囊，故應(yīng)收集整份精液，不要遺漏任何部分，尤其是開(kāi)頭部分。正因?yàn)橐讈G失精液的***部分,故不能用體外**法收集精液。盛精液的容器應(yīng)干凈、無(wú)菌、干燥，采精前容器的溫度應(yīng)與室溫相同；瓶子不應(yīng)過(guò)大，但瓶口不應(yīng)過(guò)小，以免將精液射出瓶外；還應(yīng)貼上標(biāo)簽，記錄姓名及取精時(shí)間。在冷天應(yīng)將精液標(biāo)本保溫，放置在貼身內(nèi)衣袋中，不可傾斜或倒置，盡可能在1小時(shí)內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室?？焖龠\(yùn)動(dòng)精子分析精子動(dòng)力分析男性精液檢測(cè)主要依賴計(jì)算機(jī)輔助精子分析儀(computer assistant semen analyses，CASA)。

方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評(píng)價(jià)4種計(jì)數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計(jì)數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計(jì)數(shù)乳膠珠時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計(jì)數(shù)精液時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無(wú)***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果差異無(wú)***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計(jì)數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計(jì)數(shù)池、Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計(jì)數(shù)精液時(shí),CASA系統(tǒng)與CellVU計(jì)數(shù)結(jié)果差異無(wú)***性。各實(shí)驗(yàn)室可選擇合適的手工或CASA計(jì)數(shù)方法。

精液常規(guī)是精液常規(guī)檢查的簡(jiǎn)稱；是泌尿外科、男科、生殖科簡(jiǎn)便普及的化驗(yàn)室檢查方法之一。也是婦科經(jīng)常參考使用的重要參數(shù)之一。

精液由精子和精漿組成，其中精子占10%，其余為精漿。它除了含有水、果糖、蛋白質(zhì)和脂肪外，還含有多種酶類和無(wú)機(jī)鹽。精液中含有鋅元素。精子精液是由睪丸產(chǎn)生的。精漿由前列腺、精囊腺和尿道球腺分泌產(chǎn)生。精漿里含有果糖和蛋白質(zhì)，是精子的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。另外，精漿中還含有前列腺素和一些酶類物質(zhì)。 正常的精液呈乳白色、淡黃色或者無(wú)色，每毫升為精液中的精子數(shù)一般在6千萬(wàn)至2億個(gè)。有活動(dòng)能力的精子占總數(shù)的60%以上?；尉討?yīng)總數(shù)的10%以下。在室溫下精子活動(dòng)力持續(xù)3－4小時(shí)。精液是堿性，女性生殖器內(nèi)部則為酸性。因此，精液進(jìn)入女性內(nèi)部，就會(huì)被中和。 精子分析儀能分析與精子運(yùn)動(dòng)功能相關(guān)的各種參數(shù)。

1.基本檢查：是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法，不僅是男科實(shí)驗(yàn)室，任何開(kāi)展精液檢查的實(shí)驗(yàn)室都能遵循。精子計(jì)數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的方法，但計(jì)數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法，伊紅染色和低滲腫脹實(shí)驗(yàn)只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對(duì)于精子活動(dòng)率大于40%的樣本沒(méi)有必要做存活率評(píng)估。與第5版手冊(cè)中淡粉色判讀為活精子不同，明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明，鑒別快速前向運(yùn)動(dòng)精子非常重要。因此，關(guān)于精子活力分級(jí)，第6版手冊(cè)建議恢復(fù)到快速前向運(yùn)動(dòng)、慢速前向運(yùn)動(dòng)、非前向運(yùn)動(dòng)和不活動(dòng)4個(gè)活力級(jí)別，但精子活動(dòng)率的參考值范圍卻依然是按前向運(yùn)動(dòng)(PR)、非前向運(yùn)動(dòng)(NP)、不活動(dòng)(IM)3個(gè)活力級(jí)別計(jì)算。第6版手冊(cè)強(qiáng)調(diào)，精子形態(tài)學(xué)評(píng)估的價(jià)值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(shù)(ART)結(jié)局的預(yù)后，還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對(duì)于3%和5%的精子“正?！毙螒B(tài)率的判斷，則要求必須由訓(xùn)練有素的人員評(píng)估1500個(gè)精子來(lái)完成；對(duì)于無(wú)尾精子(只有頭部的精子)超過(guò)總精子數(shù)20%的精液，應(yīng)單獨(dú)計(jì)算并在報(bào)告中注明；傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法，準(zhǔn)確率有待提高。馬精子分析

CASA系統(tǒng)減少了人為因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，提高了檢測(cè)的客觀性和可重復(fù)性?。南京計(jì)算機(jī)輔助精子分析STR

CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學(xué)評(píng)估。CASA系統(tǒng)可用來(lái)定量分析精子頭部形態(tài)學(xué)、中段甚至主段的形態(tài)，可以把精子頭部和中段分類為正?；蛘卟徽＃€可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和中位數(shù)，以及對(duì)染色的精子頂體區(qū)進(jìn)行測(cè)量[3]。

與人工操作相比，自動(dòng)化系統(tǒng)更具客觀性，精確度和重復(fù)性的潛力[4]。精確度和重復(fù)性不低于7%[5]，這優(yōu)于有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員的手工評(píng)估。兩個(gè)研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動(dòng)分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預(yù)示體外受精率和妊娠率的有意義指標(biāo)[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比（Z%），和直線速度（VSL）的精子的百分比，與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關(guān)系。Z%和VSL與生育力間的關(guān)系顯示是連續(xù)的，而且沒(méi)有顯示臨界值；高于臨界值，妊娠率也不會(huì)進(jìn)一步增加[7]。 南京計(jì)算機(jī)輔助精子分析STR