**分析是判斷男性生育能力的**基本和**重要的常規(guī)檢測方法。目前我國醫(yī)學(xué)實驗室普遍使用人工方法進行分析,結(jié)果缺少準(zhǔn)確性、客觀性和可比性。雖然WHO于近幾年多次修改并推薦**常規(guī)分析的標(biāo)準(zhǔn)方法,但仍不能充分克服人為主觀因素的影響。特別是對精子的活率和活力的分級主要依賴檢驗者的經(jīng)驗和主觀判斷,不同的技術(shù)人員分析的結(jié)果有時相差甚遠(yuǎn),對精子運動能力的判斷缺少嚴(yán)格的量化指標(biāo)。因此應(yīng)用一種統(tǒng)一、標(biāo)準(zhǔn)和快速的檢測方法替代人工方法十分必要。計算機計算機輔助**分析系統(tǒng)在**質(zhì)量檢測中的應(yīng)用49中國衛(wèi)生信息管理雜志第8卷第6期輔助精子分析(Computer-aidedSpermAnalysis,CASA)系統(tǒng)逐步取代了人工操作,在男性不育癥臨床診治及科研中CASA技術(shù)彌補了人工方法進行**分析的不足。IVOS已成為快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定可靠的進行精子分析的代名詞。香港前向運動精子分析高準(zhǔn)確率
Hamilton Thorne精子分析儀IVOS Ⅰ與IVOS Ⅱ一致性比對分析
根據(jù)質(zhì)量控制的要求,對新精子分析系統(tǒng)進行性能驗證后,應(yīng)與舊系統(tǒng)進行一致性評價,從而保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。方法:選用原有Hamilton Thorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購儀器IVOSⅡ為實驗儀器,對精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)進行分析比對。結(jié)果:兩臺儀器的方法內(nèi)和方法間離群值檢驗、偏倚圖和散點圖的線性關(guān)系和離群值檢測所有參數(shù)均能符合比對要求,檢測結(jié)果具有相關(guān)性;對實驗儀器的檢測結(jié)果適合范圍的檢驗,當(dāng)其精子濃度r=0.988,前向運動精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對預(yù)期偏倚(Bc)的接受性評價表明當(dāng)精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當(dāng)前向運動精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項檢測的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實驗儀器經(jīng)比對分析顯示符合質(zhì)控要求。結(jié)論:通過比對分析,得出兩臺精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)結(jié)果具有可比性,檢測結(jié)果一致,可同時用于臨床標(biāo)本的檢測。 上海全自動化精子分析W.H.O 5該設(shè)備的設(shè)計緊湊,占用空間小,適合不同規(guī)模的實驗室使用。
CASA,即計算機輔助精子分析,是一種利用技術(shù)手段對精子活力、濃度和形態(tài)進行精確評估的方法。WHO第五版指南強調(diào),相比人工檢測,CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動力學(xué)參數(shù),如前向運動和超活化運動,以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示,CASA檢測的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀,通常通過相差顯微鏡識別活動精子,適用于精子動力學(xué)分析。但要確保可靠結(jié)果,操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個活動精子的運動軌跡,更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀,通常進行兩次分析,每次至少200個精子,結(jié)果通過統(tǒng)計學(xué)分析得出。CASA在評估精子濃度時,需精確測量精子體積,確保**完全液化并充分混勻。計數(shù)板的精確性和計數(shù)一致性是關(guān)鍵,每次檢測需滿足5個視野和200條以上精子的比較低要求。對于高濃度**,可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面,CASA能夠定量評估精子頭部、中段和主段,尾部缺陷可通過活力評估。對于碎片過多或黏稠的**,可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語,如VCL(曲線速度)、VSL(直線速度)等,它們反映了精子運動的不同特性。
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學(xué)評估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學(xué)、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正?;蛘卟徽?,還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和中位數(shù),以及對染色的精子頂體區(qū)進行測量[3]。
與人工操作相比,自動化系統(tǒng)更具客觀性,精確度和重復(fù)性的潛力[4]。精確度和重復(fù)性不低于7%[5],這優(yōu)于有經(jīng)驗的技術(shù)人員的手工評估。兩個研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預(yù)示體外受精率和妊娠率的有意義指標(biāo)[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關(guān)系。Z%和VSL與生育力間的關(guān)系顯示是連續(xù)的,而且沒有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會進一步增加[7]。 CASA系統(tǒng)可以給出多種精子運動狀態(tài)的參數(shù),這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運動特性。
[臨床意義]1. 若數(shù)日未**、且精液量少于1.5ml者為不正常,說明精囊或前列腺有病變;若精液量減至數(shù)滴,甚至排不出,稱為無精液癥,見于生殖系統(tǒng)的特異性***,如結(jié)核、淋病和非特異性炎癥等。2.若精液量過多(一次超過8ml),則精子被稀釋而相應(yīng)減少,有礙生育。二、顏色檢查[正常參考值]灰白或乳白色,久未**者可呈淺黃色。[臨床意義]1.黃色或棕色膿樣精液:見于精囊炎或前列腺炎等。2.鮮紅或暗紅色血性精液:見于生殖系統(tǒng)的炎癥、結(jié)核和**等。三、粘稠度和液化檢查[正常參考值]粘稠膠凍狀,30分鐘內(nèi)自行液化。[臨床意義]1.精液粘稠度低,似米湯樣,可因精子量減少所致,見于生殖系統(tǒng)炎癥。??2.液化時間過長或不液化,可抑制精子活動而影響生育,常見于前列腺炎癥等。四、精子活動率檢測[正常參考值]正常精子活力一般在Ⅲ級(活動較好,有中速運動,但波形運動的較多)以上,**后1小時內(nèi)有Ⅲ級以上活動能力的精于應(yīng)>0.60。[臨床意義]如果0級(死精子,無活動能力,加溫后仍不活動)和Ⅰ級(活動不良,精子原地旋轉(zhuǎn)、擺動或抖動,運動遲緩)精子在0.40以上,常為男性不育癥的重要原因之一。Hamilton Thorne精子分析儀具有高度的可靠性和穩(wěn)定性,能夠長時間穩(wěn)定運行,保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。廣州CASA精子分析W.H.O 5
CASA系統(tǒng)操作簡便,檢測速度快,且重復(fù)性優(yōu)于人工檢測。香港前向運動精子分析高準(zhǔn)確率
精液顯微鏡檢查
(1)精子存活率:排精后30~60分鐘,正常精子存活率應(yīng)為80%~90%,精子存活率降低是導(dǎo)致不育的重要原因。(2)精子活動力:指精子活動狀態(tài),也是指活動精子的質(zhì)量。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動力分為4級:①精子活動好,運動迅速,活潑有力,直線向前運動;②精子活動較好,運動速度尚可,游動方向不定,呈直線或非直線運動,帶有回旋;③精子運動不良,運動遲緩,原地打轉(zhuǎn)或抖動,向前運動能力差;④死精子,精子完全不活動。正常精子活動力應(yīng)在③級以上,若>40%的精子活動不良(③、④)級,常是導(dǎo)致男性不育的重要原因。精子活動力低,主要見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***,應(yīng)用某些藥物如抗瘧藥、雄***等所致。 香港前向運動精子分析高準(zhǔn)確率