前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術。有研究認為，氧化應激可能是影響人類精子功能和妊娠結局的重要因素；新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關系。前沿性檢查一節(jié)中詳細介紹了精子氧化應激和活性氧實驗、精子染色質(zhì)檢測(苯胺藍和色霉素A3染色)的具體實驗操作及討論。手冊重寫了計算機輔助精子分析(CASA)部分，強調(diào)了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質(zhì)控要求，增加了CASA檢測精子超活化運動的內(nèi)容。對精子跨膜離子流和轉運的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉運的內(nèi)容。CASA系統(tǒng)操作簡便，檢測速度快，且重復性優(yōu)于人工檢測。北京Hamilton Thorne精子分析

檢查具備條件

受檢者，經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后，禁房事5－7天（上次排精到取標本間隔時間至少不得少于100小時）； [1]備大口有蓋清潔干燥容器一個，以**方式獲取精液，一次全部射入容器，蓋上蓋，記錄標本離體時間； 貼身保溫，30分鐘內(nèi)送到化驗室，并向檢驗員提供標本取出時間。 精液常規(guī)觀察：精液總容量（毫升），精子活動情況，精子密度（個/毫升），精液液化時間（標本取出到精液液化的時間），不動精子（個/高倍視野）等。見不動精子，須染色方可區(qū)分：不活動的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必須離心后檢驗，仍然找不到精子；方可報告無精。經(jīng)三次取樣化驗，結果仍然找不到精子方可確認無精子癥。 人精子分析LIN所有操作人員都應接受規(guī)范的CASA分析儀使用培訓，嚴格按照使用指南進行操作?。

精子計數(shù)是在顯微鏡下計算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。

精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后，滴于血細胞計數(shù)板上，在顯微鏡下計數(shù)紅細胞計數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細胞計數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設置后計數(shù)精子數(shù)量。

將已經(jīng)液化的精液標本均勻混合，用白細胞計數(shù)吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀釋液至11刻度，振蕩三分鐘，然后置于血球計數(shù)板內(nèi)，計數(shù)二大格（每格面積1平方毫米）之精子數(shù)，在尾數(shù)后加5個“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計數(shù)為1280個，則每毫升精子應為128,000,000。精液稀釋液之配制：重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用，福爾馬林有使精子制動的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時，可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi)，稀釋后進行計數(shù)。如精子的數(shù)目極少，亦可改為稀釋10倍計數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的，還有25%是由輸精管道的其他部分來的，因此單憑一次排精的精子計數(shù)來衡量睪丸生精機能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查，才能比較正確地從這些精子計數(shù)來反映睪丸的生精機能。

精液顯微鏡檢查

(1)精子存活率：排精后30～60分鐘，正常精子存活率應為80%～90%，精子存活率降低是導致不育的重要原因。(2)精子活動力：指精子活動狀態(tài)，也是指活動精子的質(zhì)量。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動力分為4級：①精子活動好，運動迅速，活潑有力，直線向前運動；②精子活動較好，運動速度尚可，游動方向不定，呈直線或非直線運動，帶有回旋；③精子運動不良，運動遲緩，原地打轉或抖動，向前運動能力差；④死精子，精子完全不活動。正常精子活動力應在③級以上，若＞40%的精子活動不良(③、④)級，常是導致男性不育的重要原因。精子活動力低，主要見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***，應用某些藥物如抗瘧藥、雄***等所致。 不同品牌CASA分析的結果差異較大，因此，更高效精確的精液質(zhì)量檢測系統(tǒng)對促進男科學發(fā)展具有重要的意義。

Hamilton Thorne精子分析儀IVOS Ⅰ與IVOS Ⅱ一致性比對分析

根據(jù)質(zhì)量控制的要求,對新精子分析系統(tǒng)進行性能驗證后,應與舊系統(tǒng)進行一致性評價,從而保證檢測結果的準確性。方法:選用原有Hamilton Thorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購儀器IVOSⅡ為實驗儀器,對精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)進行分析比對。結果:兩臺儀器的方法內(nèi)和方法間離群值檢驗、偏倚圖和散點圖的線性關系和離群值檢測所有參數(shù)均能符合比對要求,檢測結果具有相關性;對實驗儀器的檢測結果適合范圍的檢驗,當其精子濃度r=0.988,前向運動精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對預期偏倚(Bc)的接受性評價表明當精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當前向運動精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項檢測的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實驗儀器經(jīng)比對分析顯示符合質(zhì)控要求。結論:通過比對分析,得出兩臺精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)結果具有可比性,檢測結果一致,可同時用于臨床標本的檢測。 傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法，準確率有待提高。兔子精子分析DCL

IVOS具有高分辨率和高靈敏度的特點，能夠捕捉到微小的細節(jié)和變化，進一步提高了精子分析的準確性。北京Hamilton Thorne精子分析

醫(yī)生為了鑒定男性生育能力，常囑男方作精液檢查，正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時間長者，可呈淡黃色，若出現(xiàn)鮮紅色. 暗紅色，則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升，常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀，1小時之內(nèi)應液化為稀薄的液體，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液絲長度一般不超過2厘米，否則視為異常。精液呈弱堿性，PH值為7.2~7.8。正常精子數(shù)應超過2000萬/毫升。排精后1小時內(nèi)活動精 ＞=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動力分為四級：0級：不活動；1級：精子原地擺動；2級：有中等的前向運動；3級：前向運動活躍，快速直線運動。正常的精子活動力為2~3級的精子＞=40%~50%.精子形態(tài)：畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項指標定論，應對精子數(shù)量 活力 活動率 液化時間 畸形率等多方面進行綜合能力分析。 采集精液前5～7天內(nèi)必須停止性生活，并且不得有**、夢遺等情況，還應禁煙戒酒，忌服對生精功能有影響的藥物等。北京Hamilton Thorne精子分析