方法:使用兩種已知濃度的質控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數(shù)方法的準確性和精確性,并比較4種方法計數(shù)精液的結果。結果:計數(shù)乳膠珠時,CellVU計數(shù)池的結果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計數(shù)精液時,CellVU計數(shù)池與CASA系統(tǒng)結果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細胞計數(shù)池、Makler計數(shù)池結果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結論:計數(shù)精液時,CASA系統(tǒng)與CellVU計數(shù)結果差異無***性。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數(shù)方法。不同品牌CASA分析的結果差異較大,因此,更高效精確的精液質量檢測系統(tǒng)對促進男科學發(fā)展具有重要的意義。上海計算機輔助精子分析精確溫度控制
精子分析儀是計算機技術和圖像處理技術結合的**分析儀器設備,通過顯微鏡下攝像和計算機快速分析多個視野內精子的運行軌跡,客觀記錄了精子的密度、活動力、活動率和存活率等各項參數(shù)。
計算機輔助**分析儀由硬件系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)組成。硬件系統(tǒng)主要由顯微攝像系統(tǒng)、圖像采集系統(tǒng)、恒溫系統(tǒng)、計算機處理系統(tǒng)等四大系統(tǒng)構成。此外,儀器一般配有**樣品盒,以確保單層取樣 [1]。1.顯微攝像系統(tǒng):由顯微鏡及CCD組成??梢詫吮拘盘柾ㄟ^顯微放大由CCD傳輸?shù)接嬎銠C2.圖像采集系統(tǒng):由圖像卡構成,其功能是對CCD信號進行抓拍、識別、預處理后,將成熟信號輸送到計算機。3.恒溫系統(tǒng):由加溫和保溫設備組成。加溫是通過熱吹風機不斷將適宜的溫度熱風鼓入封閉保溫罩內,提供穩(wěn)定、可靠的檢查環(huán)境。4.計算機系統(tǒng):對圖像信號進行***系統(tǒng)的加工處理,對獲得的數(shù)據(jù)進行輸出和存儲的設備。軟件系統(tǒng)采用**的精子質量分析軟件,利用現(xiàn)代化的計算機識別技術和圖像處理技術,對精子的動靜態(tài)特征進行***的量化分析,對精子的密度、活力、活率、運動軌跡等特征進行量的檢測分析 廣州濃度精子分析ALHHamilton Thorne精子分析儀具有高度的可靠性和穩(wěn)定性,能夠長時間穩(wěn)定運行,保證數(shù)據(jù)的準確性和可重復性。
精液顯微鏡檢查
精子計數(shù):正常人精子計數(shù)為0.6×1012~1.5×0.012/L,相當于一次排出的精子總數(shù)為400×106~600×106。當精子計數(shù)值<20×106/ml或一次排精總數(shù)<100×106為精子減少,超過致孕極限而導致不育。精液直接涂片或離心沉淀后均未查到精子為無精癥。見于先天性睪丸發(fā)育不全、畸形或后天睪丸損傷和萎縮(如睪丸結核、炎癥、淋病、垂體或腎上腺功能異常的內分泌性疾病等)、輸精管阻塞或是先天性輸精管及精囊缺陷,是導致少精或無精的重要原因,也是導致不育的重要原因。檢查有無精子也是檢查輸精管結扎術的效果觀察。結扎六周后,連續(xù)檢查無精子,說明手術成功,如果結扎兩個月后,精液中仍有精子,說明手術不成功。
精子計數(shù)是在顯微鏡下計算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。
精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后,滴于血細胞計數(shù)板上,在顯微鏡下計數(shù)紅細胞計數(shù)區(qū)內的所有精子數(shù)并換算為每m1內所含精子數(shù)。此外還可用電子細胞計數(shù)儀經調整閾值設置后計數(shù)精子數(shù)量。
將已經液化的精液標本均勻混合,用白細胞計數(shù)吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀釋液至11刻度,振蕩三分鐘,然后置于血球計數(shù)板內,計數(shù)二大格(每格面積1平方毫米)之精子數(shù),在尾數(shù)后加5個“0”即得每毫升精液內精子數(shù)。例如計數(shù)為1280個,則每毫升精子應為128,000,000。精液稀釋液之配制:重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內重碳酸鈉有消化粘液的作用,福爾馬林有使精子制動的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時,可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內,稀釋后進行計數(shù)。如精子的數(shù)目極少,亦可改為稀釋10倍計數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的,還有25%是由輸精管道的其他部分來的,因此單憑一次排精的精子計數(shù)來衡量睪丸生精機能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查,才能比較正確地從這些精子計數(shù)來反映睪丸的生精機能。 IVOS和CEROS集成了智能化的分析軟件,能夠自動識別和計算精子的各項參數(shù),減少了人工操作的誤差。
精液常規(guī)是精液常規(guī)檢查的簡稱;是泌尿外科、男科、生殖科簡便普及的化驗室檢查方法之一。也是婦科經常參考使用的重要參數(shù)之一。
精液由精子和精漿組成,其中精子占10%,其余為精漿。它除了含有水、果糖、蛋白質和脂肪外,還含有多種酶類和無機鹽。精液中含有鋅元素。精子精液是由睪丸產生的。精漿由前列腺、精囊腺和尿道球腺分泌產生。精漿里含有果糖和蛋白質,是精子的營養(yǎng)物質。另外,精漿中還含有前列腺素和一些酶類物質。 正常的精液呈乳白色、淡黃色或者無色,每毫升為精液中的精子數(shù)一般在6千萬至2億個。有活動能力的精子占總數(shù)的60%以上?;尉討倲?shù)的10%以下。在室溫下精子活動力持續(xù)3-4小時。精液是堿性,女性生殖器內部則為酸性。因此,精液進入女性內部,就會被中和。 精子分析,直線速率(VSL)?:精子頭在開始檢測時的位置與終止所處位置之間的直線運動的時均速率。美國馬精子分析STR
Hamilton Thorne精子分析儀具有快速、高效、智能化的特點,能夠滿足用戶對精子分析的多方面需求。上海計算機輔助精子分析精確溫度控制
美國Hamilton Thorne的TOX IVOS精子分析儀已經被FDA和國內外毒理學實驗室所使用。本試驗研究目的對精子分析儀和血細胞計數(shù)板在大鼠附睪精子計數(shù)結果的比較驗證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對三批次雄鼠的精子計數(shù)進行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實施安樂死后,取左側附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5 min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOX IVOS精子分析儀載物臺,進行精子計數(shù),同時吸取稀釋后的精子懸液滴入血細胞計數(shù)板內,通過光學顯微鏡進行計數(shù),比較兩種計數(shù)方法的差異性。結果***批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數(shù)器的精子計數(shù)結果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數(shù)器的精子計數(shù)結果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數(shù)器的精子計數(shù)結果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個批次的精子分析儀和血細胞計數(shù)板的精子計數(shù)結果無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。結論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學研究中具有重要的應用價值。上海計算機輔助精子分析精確溫度控制