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測(cè)定精子密度和精子總數(shù)的方法主要包括顯微鏡計(jì)數(shù)和全自動(dòng)分析。1.顯微鏡計(jì)數(shù):這是傳統(tǒng)的測(cè)定方法,需要收集精液,通常是使用量杯。收集后,應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室中盡快進(jìn)行計(jì)數(shù)。應(yīng)在光學(xué)顯微鏡下將精子進(jìn)行分類,這一步非常重要,因?yàn)橥暾木硬拍鼙挥?jì)數(shù)。然后,將剩余的精液樣本通過(guò)自然沉降或離心的方法讓精子下沉,通過(guò)顯微鏡觀察并計(jì)數(shù)。這種方法需要一定的經(jīng)驗(yàn)和技巧,而且受到許多因素的影響,如精子的活動(dòng)性、濃度、形態(tài)等。2.全自動(dòng)分析:隨著科技的發(fā)展,現(xiàn)在有全自動(dòng)的精子分析儀,可以快速準(zhǔn)確地測(cè)定精子密度和總數(shù)。這種方法通過(guò)激光技術(shù)進(jìn)行,可以測(cè)量大量精子,包括前向運(yùn)動(dòng)的精子。這些儀器通常可以提供更精確的結(jié)果,并且減少了人為錯(cuò)誤。在進(jìn)行精子計(jì)數(shù)前,男性應(yīng)避免長(zhǎng)時(shí)間禁欲,因?yàn)檫@可能會(huì)影響精子的數(shù)量和質(zhì)量。同時(shí),健康的飲食和生活方式也有助于提高精子的數(shù)量和質(zhì)量。CASA系統(tǒng)通過(guò)計(jì)算機(jī)分析精子運(yùn)動(dòng)參數(shù),能夠提供精確的量化數(shù)據(jù),優(yōu)于人工檢測(cè)方法。香港Hamilton Thorne精子分析VSL
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學(xué)評(píng)估。CASA系統(tǒng)可用來(lái)定量分析精子頭部形態(tài)學(xué)、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正常或者不正常,還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和中位數(shù),以及對(duì)染色的精子頂體區(qū)進(jìn)行測(cè)量[3]。
與人工操作相比,自動(dòng)化系統(tǒng)更具客觀性,精確度和重復(fù)性的潛力[4]。精確度和重復(fù)性不低于7%[5],這優(yōu)于有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員的手工評(píng)估。兩個(gè)研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動(dòng)分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預(yù)示體外受精率和妊娠率的有意義指標(biāo)[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關(guān)系。Z%和VSL與生育力間的關(guān)系顯示是連續(xù)的,而且沒(méi)有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會(huì)進(jìn)一步增加[7]。 廣州精子分析高準(zhǔn)確率全自動(dòng)精子分析儀在臨床Z療中展現(xiàn)了明顯的優(yōu)勢(shì)。
CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點(diǎn),但是很多因素都會(huì)影響到CASA儀器的使用及準(zhǔn)確性。CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn):3.1標(biāo)本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、過(guò)短對(duì)**質(zhì)量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設(shè)計(jì)的無(wú)毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內(nèi)送檢驗(yàn)科。(5)標(biāo)本置于37℃水浴.精子運(yùn)動(dòng)參數(shù)具有溫度敏感性,因此要求計(jì)數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時(shí)間準(zhǔn)確,因**樣本隨放置時(shí)間的延長(zhǎng),精子活動(dòng)力及活動(dòng)率有減少的趨勢(shì)。標(biāo)本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進(jìn)行分析。(7)檢測(cè)精子活動(dòng)力,標(biāo)本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標(biāo)本,通常會(huì)增加碰撞的頻率,并可能由此出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標(biāo)本。
男科實(shí)驗(yàn)室中通常所指的質(zhì)量包含三個(gè)方面:實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量、醫(yī)生處置的質(zhì)量以及結(jié)果的質(zhì)量[3]。1.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量與**分析有關(guān)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量主要是工作人員的素質(zhì)和所采用儀器的質(zhì)量。工作人員應(yīng)經(jīng)過(guò)特殊的培訓(xùn)?儀器必須處于正常狀態(tài)、確保準(zhǔn)確的結(jié)果?操作應(yīng)符合規(guī)程[4]。CASA系統(tǒng)本身的質(zhì)量難于評(píng)定。硬件?如顯微鏡、影像攝影機(jī)和計(jì)算機(jī)經(jīng)檢查便可確定其可靠性。但軟件并非如此?軟件中存在不確定的因素?算法是軟件中**重要的部分?通常制造者保守這些秘密;因此?有關(guān)軟件的數(shù)學(xué)上、信息性的、統(tǒng)計(jì)學(xué)的或生物測(cè)量方面的檢查實(shí)驗(yàn)室難于進(jìn)行。該設(shè)備的設(shè)計(jì)緊湊,占用空間小,適合不同規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室使用。
CASA精子運(yùn)動(dòng)速度和運(yùn)動(dòng)軌跡特征主要參數(shù)有:①軌跡速度(VCL):也稱曲線速度,即精子頭部沿其實(shí)際行走曲線的運(yùn)動(dòng)速度。②平均路徑速度(VAP):精子頭沿其空間平均軌跡的運(yùn)動(dòng)速度,這種平均軌跡是計(jì)算機(jī)將精子運(yùn)動(dòng)的實(shí)際軌跡平均后計(jì)算出來(lái)的,可因不同型號(hào)的儀器而有所改變。③直線運(yùn)動(dòng)速度(VSL):也稱前向運(yùn)動(dòng)速度,即精子頭部直線移動(dòng)距離的速度。④直線性(LIN):也稱線性度,為精子運(yùn)動(dòng)曲線的直線分離度,即VSL/VCL。⑤精子側(cè)擺幅度(ALH):精子頭實(shí)際運(yùn)動(dòng)軌跡對(duì)平均路徑的側(cè)擺幅度,可以是平均值,也可以是最大值。不同型號(hào)的CASA系統(tǒng)由于計(jì)算方法不一致,因此相互之間不可直接比較。⑥前向性(STR):也稱直線性,計(jì)算公式為VSL/VAP,亦即精子運(yùn)動(dòng)平均路徑的直線分離度。⑦擺動(dòng)性(WOB):精子頭沿其實(shí)際運(yùn)動(dòng)軌跡的空間平均路徑擺動(dòng)的尺度,計(jì)算公式為VAP/VCL。⑧鞭打頻率(BCF):也稱擺動(dòng)頻率,即精子頭部跨越其平均路徑的頻率。⑨平均移動(dòng)角度(MAD):精子頭部沿其運(yùn)動(dòng)軌跡瞬間轉(zhuǎn)折角度的時(shí)間平均值。⑩運(yùn)動(dòng)精子密度:每毫升精液中VAP>0μm/s的精子數(shù)。Hamilton Thorne精子分析儀具有快速、高效、智能化的特點(diǎn),能夠滿足用戶對(duì)精子分析的多方面需求。美國(guó)狗精子分析精確溫度控制
CASA系統(tǒng)減少了人為因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響,提高了檢測(cè)的客觀性和可重復(fù)性?。香港Hamilton Thorne精子分析VSL
精子分析儀使用方法
儀器的使用方法因型號(hào)、廠家差異不盡相同,操作人員上崗前必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格培訓(xùn),了解工作原理、操作規(guī)程、校正方法等,使用前必須仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)。一般儀器都會(huì)經(jīng)歷如下操作步驟 [1]:開(kāi)機(jī)接通電源,打開(kāi)計(jì)算機(jī)輔助**分析系統(tǒng)。1.輸入患者信息及**理學(xué)檢查結(jié)果。2.加樣取液化的**1滴,滴入精子計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池中,置顯微鏡操作平臺(tái)上,點(diǎn)擊“活動(dòng)顯示”菜單,調(diào)節(jié)好顯微鏡焦距,顯示器上即可顯示待測(cè)標(biāo)本的精子運(yùn)動(dòng)圖像。3.分析點(diǎn)擊“計(jì)算分析”菜單,系統(tǒng)進(jìn)入自動(dòng)分析狀態(tài),圖像顯示區(qū)出現(xiàn)精子分割圖像并進(jìn)行分析。4.打印報(bào)告分析結(jié)束后,可根據(jù)需要打印出分析結(jié)果。 香港Hamilton Thorne精子分析VSL