在紡錘體卵冷凍過(guò)程中，利用紡錘體實(shí)時(shí)成像技術(shù)可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)紡錘體的變化。通過(guò)觀察冷凍過(guò)程中紡錘體的形態(tài)、位置及動(dòng)態(tài)變化，研究者可以判斷冷凍保護(hù)劑的效果、冷凍速率等因素對(duì)紡錘體的影響，從而優(yōu)化冷凍方案，減少紡錘體損傷。解凍后，利用紡錘體實(shí)時(shí)成像技術(shù)可以對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進(jìn)行再次評(píng)估。通過(guò)比較解凍前后紡錘體的形態(tài)和穩(wěn)定性，研究者可以判斷冷凍過(guò)程對(duì)紡錘體的損傷程度，并篩選出紡錘體形態(tài)完好的卵母細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)操作，提高受精率和胚胎發(fā)育質(zhì)量。紡錘體微管的正極朝向細(xì)胞兩極，負(fù)極則靠近染色體。香港雙折射性紡錘體卵冷凍研究

如何觀察紡錘體呢？

在普通光學(xué)顯微鏡下，人類(lèi)卵母細(xì)胞是半透明的，無(wú)法對(duì)紡錘體的結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察和分析。傳統(tǒng)方法是用一種特異的DNA熒光染料對(duì)卵母細(xì)胞染色，在紫外光下可顯示紡錘體，這種免疫熒光方法對(duì)卵母細(xì)胞有損傷，不能應(yīng)用于臨床。為了更好的觀測(cè)紡錘體，美國(guó)海洋生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的R．Oldenbourg等利用紡錘體的雙折射特性，開(kāi)發(fā)出偏振光顯微鏡?，F(xiàn)今，偏振光顯微鏡已經(jīng)發(fā)展成為一種無(wú)創(chuàng)性的觀察和分析紡錘體動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)的顯微觀測(cè)系統(tǒng)，我們也叫它紡錘體觀測(cè)儀。它不僅能對(duì)雙折射性紡錘體信號(hào)的有無(wú)進(jìn)行定性分析，還能對(duì)信號(hào)的強(qiáng)弱進(jìn)行定量分析。 武漢偏光成像紡錘體價(jià)格紡錘體微管的穩(wěn)定性受到細(xì)胞內(nèi)外多種信號(hào)的調(diào)節(jié)。

    盡管紡錘體在有絲分裂與減數(shù)分裂中的作用有所不同，但兩者也存在一些共性。首先，紡錘體的形成都依賴(lài)于中心體的復(fù)制和分離，以及微管的動(dòng)態(tài)生長(zhǎng)和縮短。其次，在有絲分裂和減數(shù)分裂的中期，染色體都排列在赤道板上，形成了清晰的紡錘體結(jié)構(gòu)。此外，在有絲分裂和減數(shù)分裂的后期，染色體的著絲點(diǎn)都一分為二，導(dǎo)致姐妹染色單體或同源染色體分離，分別移向細(xì)胞的兩極。這一過(guò)程確保了每個(gè)子細(xì)胞都能獲得完整的染色體組。盡管紡錘體在有絲分裂與減數(shù)分裂中存在共性，但兩者也存在明顯的差異。

紡錘體，顧名思義，其形狀類(lèi)似于紡織用的紡錘，是在細(xì)胞分裂前初期到末期形成的一種特殊細(xì)胞器。它的主要元件包括微管、附著微管的動(dòng)力分子分子馬達(dá)，以及一系列復(fù)雜的超分子結(jié)構(gòu)。微管是紡錘體的基礎(chǔ)骨架，由αβ-微管蛋白二聚體組成，這些微管相互交錯(cuò)，形成紡錘狀結(jié)構(gòu)，將染色體緊密地聯(lián)系在一起。在動(dòng)物細(xì)胞中，紡錘體的形成和組裝通常由中心體引導(dǎo)和控制。中心體是一個(gè)位于細(xì)胞質(zhì)中的復(fù)合體，由兩個(gè)中心粒嵌套在被稱(chēng)為pericentriolarmaterial（PCM）的區(qū)域內(nèi)組成。PCM富含微管相關(guān)蛋白和其他蛋白質(zhì)，如谷氨酸脫羧酶等微管主要蛋白，這些蛋白質(zhì)共同協(xié)作，確保紡錘體的正確組裝和穩(wěn)定。相比之下，高等植物細(xì)胞的紡錘體并不包含中心體，而是由細(xì)胞極板附近的微管組織形成。紡錘體形成缺陷是多種遺傳疾病的共同特征。

紡錘體觀測(cè)儀使ICSI更加安全可靠

在進(jìn)行單精子卵胞漿內(nèi)注射（ICSI）授精時(shí)，**初人們觀察人體內(nèi)成熟的卵母細(xì)胞時(shí)，通常認(rèn)為，卵母細(xì)胞紡錘**于***極體附近，故傳統(tǒng)的ICSI操作是轉(zhuǎn)動(dòng)卵母細(xì)胞使其***極**于6點(diǎn)或12點(diǎn)處，然后在3點(diǎn)處注入精子。但是，在大量使用紡錘體觀測(cè)儀后發(fā)現(xiàn)，***極體并不能很好地預(yù)測(cè)紡錘體的位置。一項(xiàng)研究提示，在ICSI后，用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體與***極體的夾角，結(jié)果發(fā)現(xiàn)小于30°這組卵母細(xì)胞的正常受精率更高。極體在卵周隙中的移動(dòng)，或者紡錘體在胞質(zhì)中的易位都使兩者的位置關(guān)系發(fā)生改變，普通光學(xué)顯微鏡下ICSI穿刺部位的選擇，可能會(huì)損傷紡錘體和(或)造成染色體的異常。通過(guò)紡錘體觀測(cè)儀，可以精確地對(duì)卵母細(xì)胞中紡錘體的位置進(jìn)行定位，從而避免在ICSI過(guò)程中損傷紡錘體，使ICSI更加安全可靠。有文獻(xiàn)報(bào)道，在進(jìn)行ICSI時(shí)，觀察到“雙折射紡錘體”的成熟卵母細(xì)胞的受精率和質(zhì)量胚胎率***高于未觀察到雙折射紡錘體組。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，有些卵母細(xì)胞在普通光學(xué)顯微鏡下看到是正常的，但在紡錘體觀測(cè)儀這個(gè)“照妖鏡”下，就能顯出原形，表現(xiàn)為有***極體、但缺乏雙折射的紡錘體，這類(lèi)卵母細(xì)胞ICSI后的受精率和妊娠率極低。 紡錘體的形成和功能與細(xì)胞的周期調(diào)控密切相關(guān)。香港無(wú)損觀察紡錘體卵細(xì)胞評(píng)價(jià)

紡錘體在細(xì)胞分裂過(guò)程中與細(xì)胞骨架協(xié)同工作。香港雙折射性紡錘體卵冷凍研究

無(wú)需染色紡錘體觀察技術(shù)能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)冷凍過(guò)程中紡錘體的形態(tài)變化，從而準(zhǔn)確評(píng)估冷凍保存的效果。通過(guò)對(duì)比冷凍前后紡錘體的形態(tài)和穩(wěn)定性，研究者可以?xún)?yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方和濃度，以及改進(jìn)冷凍程序，減少冷凍損傷，提高解凍后卵母細(xì)胞的存活率和發(fā)育潛能。解凍后的卵母細(xì)胞在無(wú)需染色的情況下，可以直接通過(guò)Polscope系統(tǒng)進(jìn)行紡錘體觀察。這一技術(shù)能夠迅速評(píng)估解凍后卵母細(xì)胞的質(zhì)量，包括紡錘體的形態(tài)、位置、穩(wěn)定性等關(guān)鍵指標(biāo)，為后續(xù)的受精和胚胎發(fā)育提供重要參考。香港雙折射性紡錘體卵冷凍研究