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科研前沿的探索者-細(xì)胞遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)服務(wù)檢測(cè)中心
卵子***是人類胚胎發(fā)育的起始步驟,該過(guò)程主要由細(xì)胞內(nèi)的鈣釋放調(diào)控,當(dāng)成熟的卵母細(xì)胞發(fā)育到MII期后,只有精子的PLCζ進(jìn)入卵母細(xì)胞的胞漿,才能***鈣震蕩,促使卵母細(xì)胞完成完整的減數(shù)分裂。TFF(Totalfertilizationfailure,完全受精失敗)是指MII期卵母細(xì)胞無(wú)法完成受精的過(guò)程,有1-3%的ICSI失敗是源于IFF。TFF與精子及卵子的異常均有關(guān),其中卵子***異常是主要因素。卵子因素主要是由蛋白合成不足或異常信號(hào)傳導(dǎo)導(dǎo)致的胞質(zhì)不成熟;精子因素主要是PLCζ蛋白的結(jié)構(gòu)、表達(dá)和定位異常。受精失敗與女方年齡、不育類型和取卵數(shù)目等因素?zé)o關(guān)。精子的解凝功能異常和魚(yú)精蛋白缺失與TFF密切相關(guān)。精子染色質(zhì)組裝異?;蚓覦NA損傷可導(dǎo)致精子的解凝異常,無(wú)法***卵子及合子形成。研究表明精子染色質(zhì)組裝異常的精子中精子解凝功能受阻的精子比例高于正常精子。精細(xì)胞染色質(zhì)的魚(yú)精蛋白的合成與組裝對(duì)于精細(xì)胞的基因組濃縮也是非常重要的。若魚(yú)精蛋白的量減少,精子在ICSI后提前解凝,導(dǎo)致受精失敗。當(dāng)精子進(jìn)入卵子后精子染色質(zhì)提前濃縮也導(dǎo)致其提前解凝,精子和卵子遺傳物質(zhì)的同步節(jié)奏被打破,也造成受精失敗。不過(guò)這種同步性異常主要還是卵子因素造成的。PMM 壓電顯微操作儀提高ICSI成功率。香港透明帶打孔壓電胚胎干細(xì)胞
下面我們利用壓電陶瓷測(cè)試壓電效應(yīng)和逆壓電效應(yīng)。
常用的壓電陶瓷是由鋯鈦酸鉛(PZT)材料做成的。將PZT材料做成的壓電陶瓷片粘在圓形黃銅片上就構(gòu)成了壓電陶瓷元件。它具有明顯的壓電效應(yīng)。首先,將壓電陶瓷片A的兩根引線通過(guò)一個(gè)按鈕開(kāi)關(guān)與信號(hào)發(fā)生器相聯(lián)。將壓電陶瓷片B的兩根引線與擴(kuò)音器(帶喇叭)的輸入端相連。將A、B兩個(gè)壓電陶瓷片用黑封泥固定在同一個(gè)木板制成的箱子上。當(dāng)觀察者將按鈕開(kāi)關(guān)按下,接通信號(hào)發(fā)生器和壓電陶瓷A時(shí),由于逆壓電效應(yīng),A開(kāi)始振動(dòng),并把振動(dòng)傳給木箱,木箱的振動(dòng)傳給壓電陶瓷B,由于壓電效應(yīng),使B兩邊產(chǎn)生變化電信號(hào),再傳給擴(kuò)音器使喇叭發(fā)聲,所以這個(gè)實(shí)驗(yàn)同時(shí)演示了壓電效應(yīng)和逆壓電效應(yīng)。 昆明透明帶打孔壓電核轉(zhuǎn)移壓電顯微操作儀PMM 6可用于豬卵母細(xì)胞和胚胎的ICSI等實(shí)驗(yàn)。
在正常受精過(guò)程中,精子進(jìn)入卵子后,會(huì)導(dǎo)致卵細(xì)胞內(nèi)的鈣離子濃度發(fā)生持續(xù)數(shù)小時(shí)的周期性的短暫升高,這個(gè)過(guò)程被稱為卵子的“鈣震蕩”,鈣震蕩會(huì)引發(fā)大量生化反應(yīng)事件,代謝活動(dòng)重新活躍起來(lái),這個(gè)過(guò)程稱為卵子***。精子***后的卵子會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高,皮質(zhì)反應(yīng),透明帶反應(yīng)等,然后卵子完成第二次減數(shù)分裂,排出第二極體,開(kāi)啟后續(xù)的胚胎發(fā)育過(guò)程。第二代試管嬰兒(ICSI)授精后,成熟卵子見(jiàn)不到2原核的受精標(biāo)志,稱為ICSI完全受精失敗。ICSI受精失敗在ICSI周期中比例約為1%-3%,其中30%的夫婦會(huì)發(fā)生反復(fù)持續(xù)的受精失敗,是臨床中極其棘手的難題。即使是經(jīng)驗(yàn)豐富的胚胎學(xué)家,也無(wú)法避免這種情況。卵母細(xì)胞***失敗是ICSI受精失敗的主要原因之一。
ICSI技術(shù)作為輔助受精的一種手段,在近10年獲得長(zhǎng)足發(fā)展。ICSI技術(shù)在動(dòng)物受精機(jī)理研究、野生動(dòng)物遺傳資源保存、拯救珍稀動(dòng)物和胚胎工廠化生產(chǎn)等方面有著非常廣闊的應(yīng)用前景。該技術(shù)已經(jīng)成為人類臨床醫(yī)學(xué)上***男性不育癥的重要手段,并在全世界得到廣泛應(yīng)用。
盡管ICSI已取得很大成就,但是其存在的問(wèn)題也不容忽視。首先,由于人為地選擇,動(dòng)物自身對(duì)精子優(yōu)勝劣汰的選擇遭到破壞。這對(duì)動(dòng)物種群的發(fā)展產(chǎn)生的影響還需長(zhǎng)期深入的研究。如果能詳細(xì)了解精子的表型和基因型之間的關(guān)系,相信ICSI技術(shù)的可靠性會(huì)有所明確。其次,作為胚胎生物技術(shù)的一部分。ICSI 技術(shù)也存在總體效率低的問(wèn)題,而且胚胎移植后妊娠率低而流產(chǎn)率高亦是目前存在的普遍問(wèn)題。另外,存在出生動(dòng)物的死亡和畸形等不良后果。因此要更深入地研究其機(jī)理和操作等問(wèn)題,進(jìn)一步改善ICSI技術(shù)。比如Piezo-ICSI技術(shù)就可以有效提高成功率。 壓電破膜儀 PMM PIEZO-ICSI操作簡(jiǎn)便,醫(yī)生只需掌握基本的操作技巧,即可熟練操作。
機(jī)器人安裝接近覺(jué)傳感器主要目的有以下三個(gè):其一,在接觸對(duì)象物體之前,獲得必要的信息,為下一步運(yùn)動(dòng)做好準(zhǔn)備工作;其二,探測(cè)機(jī)器人手和足的運(yùn)動(dòng)空間中有無(wú)障礙物。如發(fā)現(xiàn)有障礙,則及時(shí)采取一定措施,避免發(fā)生碰撞;其三,為獲取對(duì)象物體表面形狀的大致信息。超聲波是人耳聽(tīng)不見(jiàn)的一種機(jī)械波,頻率在20KHZ以上。超聲傳感器包括超聲發(fā)射器、超聲接受器、定時(shí)電路和控制電路四個(gè)主要部分。它的工作原理大致是這樣的:首先由超聲發(fā)射器向被測(cè)物體方向發(fā)射脈沖式的超聲波。發(fā)射器發(fā)出一連串超聲波后即自行關(guān)閉,停止發(fā)射。同時(shí)超聲接受器開(kāi)始檢測(cè)回聲信號(hào),定時(shí)電路也開(kāi)始計(jì)時(shí)。當(dāng)超聲波遇到物體后,就被反射回來(lái)。等到超聲接受器收到回聲信號(hào)后,定時(shí)電路停止計(jì)時(shí)。此時(shí)定時(shí)電路所記錄的時(shí)間,是從發(fā)射超聲波開(kāi)始到收到回聲波信號(hào)的傳播時(shí)間。利用傳播時(shí)間值,可以換算出被測(cè)物體到超聲傳感器之間的距離。這個(gè)換算的公式很簡(jiǎn)單,即聲波傳播時(shí)間的一半與聲波在介質(zhì)中傳播速度的乘積。超聲傳感器整個(gè)工作過(guò)程都是在控制電路控制下順序進(jìn)行的。壓電材料除了以上用途外還有其它相當(dāng)廣泛的應(yīng)用。如鑒頻器、壓電震蕩器、變壓器、濾波器等。通過(guò)使用PMM PIEZO-ICSI,醫(yī)生可以更加精確地進(jìn)行受精操作,提高受孕成功率,為患者創(chuàng)造更多的生命奇跡。深圳prime tech壓電顯微注射
PRIME TECH PMM 6兼容多種顯微操作系統(tǒng)。香港透明帶打孔壓電胚胎干細(xì)胞
Piezo-ICSI程序:
使用直徑100-mm的細(xì)胞培養(yǎng)皿上蓋,準(zhǔn)備操作盤(pán);按照Piezo操作系統(tǒng)的要求,將4μL左右的汞從后部裝入注射針中,輕輕將汞推至針尖處,在20-25℃室溫下,準(zhǔn)備進(jìn)行顯微操作。具體操作前,首先取10枚卵母細(xì)胞置于15L含3 % suerose的HEPES-CZB操作滴中備用;然后將2.5μL精子溶液與5pLHEPES-CZB+ 12 % PVP-360操作滴充分混合;再將單個(gè)精子從尾部吸入注射針,用Piezo脈沖從頸部斷開(kāi)頭和尾;連續(xù)剪切5個(gè)精子后,將吸入全部精子頭的注射針轉(zhuǎn)移到放置卵母細(xì)胞的操作滴中,準(zhǔn)備將精子頭逐個(gè)注射至卵母細(xì)胞質(zhì)中。注射時(shí),從時(shí)鐘9點(diǎn)的方向吸住卵母細(xì)胞,使紡錘體保持在6點(diǎn)或12點(diǎn)的位置,從3點(diǎn)的方向輕輕進(jìn)針,同時(shí)用Piezo脈沖擊穿透明帶,將透明帶碎片吹出注射針的同時(shí),將精子頭吹至針尖處,繼續(xù)進(jìn)針,直至針尖插入卵母細(xì)胞深處,幾乎貼近對(duì)側(cè)質(zhì)膜時(shí),用Piezo弱脈沖擊穿卵母細(xì)胞質(zhì)膜,將精子頭吐出,回吸注入卵內(nèi)多余的操作液,輕輕退針,完成一次注射。依次操作,盡快實(shí)現(xiàn)該批卵母細(xì)胞的注射,室溫放置5min,然后用大量CZB溶液洗滌ICSI胚胎,并且移入CO?箱培養(yǎng)。依法進(jìn)行第二批卵母細(xì)胞的精子頭注射,在注射HCG后17 h,完成全部卵母細(xì)胞的精子注射。 香港透明帶打孔壓電胚胎干細(xì)胞