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免疫磁珠分離法純化抗血清的實(shí)驗(yàn)條件,并與A蛋白親和層析法比較純化效果,以求得到一種簡便,快速,高效的純化IgG方法.結(jié)果表明:從5只新西蘭兔獲得210 mL試管凝集效價(jià)高達(dá)1:5 120的兔抗鰻弧菌抗血清,磁珠與IgG結(jié)合10 min達(dá)到平衡,其比較大結(jié)合量為0.227 mg/mL;免疫磁珠分離法與A蛋白親和層析法得到的IgG純度都很高,經(jīng)過SDS-PAGE電泳都只得到25 ku和55 ku左右的兩條帶;免疫磁珠分離法得到的抗體ELISA效價(jià)高于A蛋白親和層析法;免疫磁珠分離法反應(yīng)所需時(shí)間(10 min)小于A蛋白親和層析法所需的20 min,其得率(11.5 mg/mL)也高于A蛋白親和層析法的10.25 mg/mL.免疫磁珠多種系列供您選擇。黑龍江COIP免疫磁珠性能
從白血病KG1a細(xì)胞中分選CD34+CD38-干細(xì)胞并研究其生物學(xué)特性.方法免疫磁珠法分選CD34+CD38-細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞表面膜抗原,細(xì)胞周期,甲基纖維素培養(yǎng)體系觀察其克隆性;以HL60,K562,CD34+CD38+細(xì)胞為對(duì)照,甲基偶氮唑藍(lán)法檢測柔紅霉素對(duì)CD34+CD38-細(xì)胞的抑制作用;BALB/c裸鼠皮下接種,觀察體內(nèi)成瘤能力.結(jié)果分選的CD34+CD38-細(xì)胞純度達(dá)95%以上,(69.03±3.25)%處于G0期,克隆形成率為(38.64±2.68)%,明顯抵抗柔紅霉素;不同濃度柔紅霉素作用后,CD34+CD38-,CD34+CD38+,HL60,K562細(xì)胞的活性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=961.136,P=0.000);CD34+CD38-在裸鼠皮下成瘤率***高于CD34+CD38+細(xì)胞(P〈0.05).結(jié)論免疫磁珠法分選白血病干細(xì)胞簡單易行,分選的細(xì)胞符合白血病干細(xì)胞生物學(xué)特性.安徽anti-Flag COIP免疫磁珠批量定制BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。
免疫磁珠(Immunomagneticbeads,IMB),是由載體微球和免疫配基結(jié)合而成的一種納米級(jí)材料.免疫磁珠分離技術(shù)是以高均一性的磁性微球?yàn)楣滔嘀С治?將免疫配基(如抗體,抗原等)通過功能基團(tuán)結(jié)合到磁性載體上形成免疫磁性微球,利用特異性的免疫學(xué)反應(yīng),在磁力作用下,發(fā)生力學(xué)移動(dòng),從混合溶液中分離出特異性的靶物質(zhì).具有分離速度快,效率高,可重復(fù)性好,操作簡單,不需要昂貴的儀器設(shè)備等優(yōu)點(diǎn).本實(shí)驗(yàn)采用化學(xué)共沉淀的方法合成了納米級(jí)Fe3O4磁性微粒,具有顆粒均一程度高,懸浮穩(wěn)定性好,超順磁性等特點(diǎn),經(jīng)固體物含量的測定及其粒徑的測定,磁珠的濃度約為7.9mg/mL,粒徑約為30~100nm左右,對(duì)其懸浮液加入烷基化試劑和醛基化試劑進(jìn)行表面修飾,提高了磁性微粒的性能.
利用免疫磁珠從SD大鼠坐骨神經(jīng)分離培養(yǎng)獲得大量,高純度雪旺細(xì)胞的方法.[方法]選用4-7dSD大鼠,無菌條件下取雙側(cè)坐骨神經(jīng),解剖鏡下剝離去除神經(jīng)外膜,獲得神經(jīng)束,將神經(jīng)束剪碎至1mm3大小.采用雙酶2次消化法消化,胎牛血清中止消化后,離心并加入DF12培養(yǎng)液培養(yǎng).7d后應(yīng)用免疫磁珠法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行純化培養(yǎng),培養(yǎng)2d后進(jìn)行傳代接種.培養(yǎng)過程中對(duì)細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,計(jì)數(shù)及活力測定;MTY法繪制細(xì)胞生長曲線,采用免疫細(xì)胞化學(xué)熒光染色對(duì)細(xì)胞進(jìn)行鑒定并且計(jì)算所得細(xì)胞純度.[結(jié)果]分離培養(yǎng)所得細(xì)胞即為雪旺細(xì)胞;采用免疫磁珠法能對(duì)培養(yǎng)所得雪旺細(xì)胞進(jìn)行純化.純化后雪旺細(xì)胞活力為96%±0.5%,純度98%±1.1%,培養(yǎng)2d后就可以傳代.[結(jié)論]免疫磁珠法可以用于雪旺細(xì)胞的純化培養(yǎng),所得雪旺細(xì)胞純度高,活力強(qiáng),能滿足組織工程人工神經(jīng)的需要.免疫磁珠的特點(diǎn)成為了一個(gè)重要因素。
建立免疫磁珠法分離,并培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的方法.方法將術(shù)中取得的腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本,通過剪切、消化和吹打成單細(xì)胞懸液,篩網(wǎng)過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133+細(xì)胞,用神經(jīng)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)法培養(yǎng)出具有單細(xì)胞克隆能力的細(xì)胞球,取第3代進(jìn)行誘導(dǎo)分化,分化前后用免疫細(xì)胞熒光化學(xué)方法鑒定**干細(xì)胞及分化后細(xì)胞.結(jié)果免疫磁珠分選出的CD133-細(xì)胞,可懸浮生長并形成神經(jīng)干細(xì)胞樣細(xì)胞球,有較強(qiáng)的增殖能力,干細(xì)胞標(biāo)志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)元小管相關(guān)蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質(zhì)細(xì)胞膠質(zhì)纖維酸性蛋白質(zhì)(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白、CD133陰性,并具有**的核型.結(jié)論免疫磁珠分選法可避免原代培養(yǎng)中眾多細(xì)胞混雜牛長的發(fā)生,能夠從大量腫瘤細(xì)胞中分離出只占極少比例的**干細(xì)胞,細(xì)胞結(jié)合磁珠后在體外可以長期培養(yǎng)和傳代,進(jìn)一步證實(shí)了**干細(xì)胞的存在,并為膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的研究奠定基礎(chǔ).上海普平生物科技有限公司的免疫磁珠產(chǎn)品種類繁多。吉林anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制
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精原干細(xì)胞(spermatogonialstemcells,SSCs)富集純化是利用SSCs進(jìn)行基因修飾新方法等研究的前提基礎(chǔ)。采用免疫磁珠分選法,使用干細(xì)胞抗體CD90.2進(jìn)行小鼠SSCs的純化富集,并采用流式細(xì)胞分析法和定量PCR驗(yàn)證了磁珠分選效率。流式細(xì)胞分析結(jié)果:免疫磁珠分選后SSCs純度為50.11%。熒光定量PCR檢測結(jié)果:磁珠分選后支持細(xì)胞特異表達(dá)基因GATA4***下調(diào)(6倍)、SSCs表達(dá)基因GFRα-1上調(diào)(6.5倍)、生殖干細(xì)胞特異表達(dá)基因OCT4極***上調(diào)(5.9倍),3個(gè)基因相對(duì)表達(dá)量的變化說明,免疫磁珠分選效率為6倍。流式細(xì)胞分析法所產(chǎn)生的偏差可能是受到了未解離磁珠及SSCs本身轉(zhuǎn)基因熒光的影響。黑龍江COIP免疫磁珠性能
上海普平生物科技有限公司致力于化工,是一家招商型的公司。公司自成立以來,以質(zhì)量為發(fā)展,讓匠心彌散在每個(gè)細(xì)節(jié),公司旗下科研試劑、耗材、儀器,納米脂質(zhì)體,細(xì)胞、分子、蛋白實(shí)驗(yàn),科研項(xiàng)目深受客戶的喜愛。公司秉持誠信為本的經(jīng)營理念,在化工深耕多年,以技術(shù)為先導(dǎo),以自主產(chǎn)品為重點(diǎn),發(fā)揮人才優(yōu)勢(shì),打造化工良好品牌。普平生物憑借創(chuàng)新的產(chǎn)品、專業(yè)的服務(wù)、眾多的成功案例積累起來的聲譽(yù)和口碑,讓企業(yè)發(fā)展再上新高。