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陜西protein A/G COIP免疫磁珠批量定制

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-05-08

磁珠與抗體偶聯(lián)的比較好條件,制備抗單增李斯特菌免疫磁珠;將免疫磁珠與顯色培養(yǎng)法結(jié)合,初步建立起利用免疫磁珠分離技術(shù)對(duì)單增李斯特菌進(jìn)行分離鑒定的檢測方法.從而為食品中單增李斯特菌的檢測提供一種快速,高效和靈敏的檢測新方法.方法:以單增李斯特菌體作為免疫抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔抗單增李斯特菌多克隆抗體,鑒定多抗活性以及與單增李斯特菌體的結(jié)合能力;用激光粒度儀和透射電鏡分析不同活性基團(tuán)修飾磁珠的粒徑大小和分散性,選擇性質(zhì)穩(wěn)定的磁珠用以制備免疫磁珠;設(shè)計(jì)正交試驗(yàn),摸索pH,溫度,時(shí)間對(duì)氨基修飾磁珠與多抗偶聯(lián)的影響,選擇比較好條件制備免疫磁珠并用于捕獲單增李斯特菌;設(shè)計(jì)不同的偶聯(lián)緩沖溶液,偶聯(lián)時(shí)間,偶聯(lián)溫度,通過比較羧基修飾磁珠與抗體偶聯(lián)后上清中剩余的抗體量來確定比較好偶聯(lián)條件,運(yùn)用制備的免疫磁珠對(duì)樣品中的單增李斯特菌進(jìn)行捕獲,并與顯色平板結(jié)合試驗(yàn),鑒定制備的免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.免疫磁珠的優(yōu)勢您了解多少呢?陜西protein A/G COIP免疫磁珠批量定制

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在一定條件下可分化成為多種結(jié)締組織細(xì)胞,也可分化成神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞.目的:觀察采用免疫磁珠法分離成人骨髓來源神經(jīng)干細(xì)胞的生物學(xué)特征.設(shè)計(jì),時(shí)間及地點(diǎn):以患者自身骨髓組織為觀察對(duì)象的實(shí)驗(yàn),于2003-03/2007-06在菏澤市立醫(yī)院檢驗(yàn)科完成.材料:骨髓組織來自菏澤市立醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的中風(fēng),老年性癡呆,帕金森病,腦缺血等神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者.方法:利用免疫磁珠表面的特異性抗體與骨髓組織中神經(jīng)干細(xì)胞抗原相結(jié)合,在磁場作用下使結(jié)合磁珠與其他細(xì)胞分離,從而獲得神經(jīng)干細(xì)胞,再將所分離的純化神經(jīng)干細(xì)胞接種到含體積分?jǐn)?shù)為0.20胎牛血清的EaglesMEM培養(yǎng)液,再在培養(yǎng)基中加入堿性成纖維因子和表皮生長因子進(jìn)行原代培養(yǎng).主要觀察指標(biāo):采用免疫組織化學(xué)染色與免疫熒光染色鑒定細(xì)胞,并采用流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞DNA含量.結(jié)果:在相差顯微鏡下觀察培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)豐滿,胞核及核仁清晰可見,神經(jīng)突起粗大,網(wǎng)絡(luò)稠密.免疫組織化學(xué)和免疫熒光染色顯示,細(xì)胞神經(jīng)元特異性烯醇化酶,神經(jīng)蛋白,膠質(zhì)纖維酸性蛋白酶,微管相關(guān)蛋白為陽性.傳代后的細(xì)胞用流式細(xì)胞術(shù)測定DNA含量為正常二倍體,無誘發(fā)突變.湖北anti-Myc COIP免疫磁珠批量定制免疫磁珠多種系列供您選擇。

免疫磁珠技術(shù)(immunomagneticbeads,IMB)是近年來國內(nèi)外研究的一種新的免疫學(xué)技術(shù).隨著納米技術(shù)的不斷發(fā)展,納米免疫磁珠具備了良好的磁感應(yīng)性,超順磁性,高特異性,高濃縮性,高分離率,且不影響細(xì)胞活性等優(yōu)點(diǎn),因此它能從大量外周血細(xì)胞中篩選出帶有特異性制備可高效,特異地分離單增李斯特菌的免疫磁珠.探討羧基修飾磁珠與多克隆抗體的不同偶聯(lián)條件和免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.方法:以單增李斯特菌作為抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔源多克隆抗體,鑒定其與單增李斯特菌體的結(jié)合能力;選擇6種不同的偶聯(lián)緩沖溶液,設(shè)置了6個(gè)主要偶聯(lián)時(shí)間和6組偶聯(lián)溫度,通過比較磁珠與抗體偶聯(lián)后上清中剩余的抗體量來確定比較好偶聯(lián)條件.結(jié)果:制備的多克隆抗體效價(jià)為1.3×105,該抗體與單增李斯特菌體有較好的結(jié)合,抗體與1mg羧基修飾磁珠在pH6.0的0.01mol/L一水嗎啉乙磺酸緩沖溶液(MES)中,37℃偶聯(lián)2h,偶聯(lián)抗體的量為160μg;制得的免疫磁珠的捕獲率可達(dá)77.0%.結(jié)論:獲得羧基磁珠與抗體偶聯(lián)的比較好條件,該免疫磁珠用于食品中單增李斯特菌的檢測,與常規(guī)的平皿增菌培養(yǎng)顯色法比較,檢測時(shí)間至少縮短20h.標(biāo)記的腫瘤細(xì)胞

人腦**組織中分離,培養(yǎng),純化和鑒定腦**干細(xì)胞(BTSCs),探討CD133免疫磁珠分選方法獲取BTSCs的可行性及BTSCs的生物學(xué)特性.方法:留取人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤新鮮標(biāo)本,分離獲得腦腫瘤細(xì)胞.應(yīng)用CD133免疫磁珠分選方法純化BTSCs;流式細(xì)胞儀檢測分選陽性率;神經(jīng)球計(jì)數(shù)法分析CD133+/-亞群細(xì)胞神經(jīng)球形成情況;免疫熒光方法檢測CD133+/-亞群細(xì)胞表面神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)標(biāo)記物CD133,神經(jīng)巢蛋白(nestin)表達(dá)情況;檢測CD133+/-亞群細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化后細(xì)胞表面分化標(biāo)記物β-TubulinⅢ,GFAP表達(dá)情況.結(jié)果:CD133+亞群細(xì)胞具有干細(xì)胞特性,可形成明顯的神經(jīng)球,具有自我更新和明顯的增殖能力,并且NSCs標(biāo)記物CD133,nestin表達(dá)陽性,經(jīng)誘導(dǎo)分化后分化標(biāo)記物β-TubulinⅢ,GFAP表達(dá)陽性;CD133-亞群細(xì)胞無上述特性.結(jié)論:CD133免疫磁珠分選方法獲得的CD133+亞群細(xì)胞即為BTSCs,該方法可以得到高純度的BTSCs,可以用于BTSCs的實(shí)驗(yàn)研究.上海普平生物科技有限公司就帶您了解一下免疫磁珠的特點(diǎn)。

用多聚抗原肽(multipleantigenpeptides,MAP)包被磁珠制備單表位抗體的方法.方法:通過Fmoc法固相化學(xué)合成UreB的8分支單表位MAP,將其作為免疫原免疫小鼠,獲得多克隆抗血清.將MAP以共價(jià)偶聯(lián)的方式包被磁珠制備免疫磁珠(immunomagneticbeads,IB),通過IB從多克隆抗血清中純化單表位抗體,熒光偏振(fluorescencepolarization,FP)法鑒定抗體的特異性,SDS-PAGE鑒定抗體純度,紫外分光光度法測定其回收率.結(jié)果:合成的MAP具有較強(qiáng)的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗體滴度高達(dá)1∶12800.MAP制備免疫磁珠的比較好包被濃度為100mg/L,包被效率比較高可達(dá)79%.應(yīng)用MAP免疫磁珠從抗血清中純化得到的單表位抗體,經(jīng)鑒定與其他抗原表位無反應(yīng)性,其純度為95%,抗體的回收率為5.8%.結(jié)論:MAP包被的磁珠可快速分離純化出針對(duì)某一抗原表位的特異性抗體,其性質(zhì)類似單克隆抗體.這一方案在快速制備少量高特異性抗體中具有廣闊的應(yīng)用前景.對(duì)于不同的需求我們選擇不同的免疫磁珠系列。浙江COIP免疫磁珠送貨上門

上海普平生物科技有限公司免疫磁珠的售后服務(wù)很好。陜西protein A/G COIP免疫磁珠批量定制

羥基淀粉沉淀去除臍血紅細(xì)胞和免疫磁珠(MACS)陽性選擇,建立富集,分離臍血CD34+細(xì)胞的簡易實(shí)用方法,通過造血祖細(xì)胞集落培養(yǎng)分析其在細(xì)胞因子作用下的增殖潛能,觀察羥基淀粉沉淀對(duì)造血細(xì)胞增殖功能的影響.方法:采用羥基淀粉沉淀和改進(jìn)的MACS富集,分離臍血CD34+細(xì)胞,以甲纖半固體造血細(xì)胞培養(yǎng)法觀察其粒-單系細(xì)胞(CFU-GM)和紅系爆式集落(BFU-E)的數(shù)量和特性.結(jié)果:臍血分離前,CD34+細(xì)胞純度為1.5%~3%,MACS分離后其純度可達(dá)85%,羥基淀粉沉淀和MACS分離可達(dá)91%;CD34+造血祖細(xì)胞培養(yǎng)有明顯的增殖,采用IL-3,IL-6,SCF,GM-CSF,EPO等細(xì)胞因子組合擴(kuò)增培養(yǎng)9~14d,CD34+細(xì)胞在液體培養(yǎng)中有明顯擴(kuò)增,MACS分離后CD34+細(xì)胞總數(shù)增加39倍,羥基淀粉沉淀和MACS分離可增加45倍.結(jié)論:應(yīng)用羥基淀粉沉淀和改進(jìn)的MACS系統(tǒng)可有效富集,分離臍血CD34+細(xì)胞,羥基淀粉沉淀對(duì)CD34+細(xì)胞的富集,分離無影響;臍血細(xì)胞分離后作造血祖細(xì)胞培養(yǎng),可產(chǎn)生豐富的CFU-GM和BFU-E,說明羥基淀粉沉淀分離的CD34+細(xì)胞的增殖功能優(yōu)于MACS分離CD34+細(xì)胞的增殖功能.陜西protein A/G COIP免疫磁珠批量定制

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