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來源: 發(fā)布時間:2022-05-04

從白血病KG1a細胞中分選CD34+CD38-干細胞并研究其生物學(xué)特性.方法免疫磁珠法分選CD34+CD38-細胞,流式細胞術(shù)分析細胞表面膜抗原,細胞周期,甲基纖維素培養(yǎng)體系觀察其克隆性;以HL60,K562,CD34+CD38+細胞為對照,甲基偶氮唑藍法檢測柔紅霉素對CD34+CD38-細胞的抑制作用;BALB/c裸鼠皮下接種,觀察體內(nèi)成瘤能力.結(jié)果分選的CD34+CD38-細胞純度達95%以上,(69.03±3.25)%處于G0期,克隆形成率為(38.64±2.68)%,明顯抵抗柔紅霉素;不同濃度柔紅霉素作用后,CD34+CD38-,CD34+CD38+,HL60,K562細胞的活性差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=961.136,P=0.000);CD34+CD38-在裸鼠皮下成瘤率***高于CD34+CD38+細胞(P〈0.05).結(jié)論免疫磁珠法分選白血病干細胞簡單易行,分選的細胞符合白血病干細胞生物學(xué)特性.一個好的免疫磁珠需要具備哪些特點您知道嗎?上海anti-Flag COIP免疫磁珠送貨上門

實驗優(yōu)化建立基于免疫磁分離技術(shù)對金黃色葡萄球菌的快速分離方法,為后續(xù)快速檢測提供基礎(chǔ).利用金黃色葡萄球菌多抗制備的免疫磁珠對其捕獲.結(jié)合平板菌落計數(shù),考察包被磁珠時多抗加入量,免疫磁珠加入量及捕獲時間等因素對捕獲效率的影響.在單因素實驗基礎(chǔ)上進行正交實驗,并對該方法的靈敏度,特異性及其在食品中的應(yīng)用效果初步探索.結(jié)果表明,比較好捕獲條件為抗體加入量30μL,免疫磁珠加入量80μL,捕獲時間45min,在此條件下捕獲效率均超過30%,該方法捕獲限可達到101CFU/mL,特異性良好,并初步用于羊肉卷洗水中金黃色葡萄球菌的快速分離,捕獲時間小于1h.免疫磁分離作為一種快速的分離篩選方法,可用于食源性金黃色葡萄球菌的快速分離.上海anti-Flag COIP免疫磁珠哪家好上海普平生物科技有限公司主做免疫磁珠的批發(fā)銷售。

免疫磁珠法分選人骨髓多能成體祖細胞,觀察其分選效果,建立體外分選純化及培養(yǎng)人骨髓來源多能成體祖細胞(hMAPCs)的方法.方法:取健康成人志愿者適量骨髓后采用梯度密度離心法分離獲取單個核細胞,在自制培養(yǎng)基下貼壁培養(yǎng)后,將獲取的骨髓貼壁細胞通過CD45,血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)負分選,錐蟲藍拒染實驗計數(shù)MACS分選前后細胞活力.流式細胞儀鑒定分選后細胞純度;流式細胞儀分析培養(yǎng)細胞CD29,CD44,CD34和HLA-DR表達情況.結(jié)果:通過MACS分選,平均每1×106/ml骨髓貼壁細胞可分選出約(5~10)×104/mlhMAPCs,分選后的hMAPCs細胞生長良好,**長傳代到第20代.分選前后細胞活力分別為(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,無明顯差異;流式細胞儀分析獲取的CD45-,GlyA-細胞純度大于98%;流式細胞儀檢測hMAPCs中CD29陽性表達細胞比率為99.2%,CD44陽性細胞比率為98.3%,CD34陽性細胞比率為1.2%,HLA-DR陽性細胞比率為5.3%.結(jié)論:CD45,GlyA免疫微磁珠負分選可從骨髓中分離高純度的hMAPCs;分選后hMAPCs在自行研制的培養(yǎng)基中有較強的增殖能力.

偶聯(lián)單抗NJ001的免疫磁珠對肺腺*裸鼠模型micro-CT掃描的增強作用.方法:經(jīng)尾靜脈注射SPC-A1-luc細胞建立肺腺*裸鼠模型,生物發(fā)光成像定量監(jiān)測**的大小.裸鼠分為:生理鹽水組,裸磁珠組和免疫磁珠組,每周分別注射生理鹽水,750nm裸磁珠溶液和偶聯(lián)NJ001的750nm免疫磁珠溶液,于注射前和注射后4h進行micro-CT掃描.利用免疫組織化學(xué)驗證**組織中NJ001特異性抗原SP70的表達.結(jié)果:免疫磁珠組在第4周即可檢測到**,而生理鹽水組和裸磁珠組均到第6周才能檢測到.第6周生理鹽水組,裸磁珠組和免疫磁珠組micro-CT掃描**的灰度值分別為注射前的59.05±0.66,60.69±0.55和58.25±0.32,注射后的60.30±1.83,61.05±0.68和67.41±3.82.與注射前相比,免疫磁珠組注射后的灰度值***增加,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.0079).生理鹽水組和裸磁珠組注射后的灰度值與注射前相比差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P0.05).結(jié)論:偶聯(lián)單抗NJ001的免疫磁珠對肺腺*裸鼠模型micro-CT掃描有增強作用,并且有望用于肺*的早期診斷.免疫磁珠的不同系列會有不同的優(yōu)勢。

CoIP :實驗原理一切從 CoIP 的原理談起:免疫共沉淀是一種以抗體和抗原識別專一性為基礎(chǔ),用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。實驗步驟第一步:樣品制備首先進行樣品制備,以提取出想要研究的蛋白,由于不同類型的細胞裂解條件有所差異,這里不展開介紹。注意事項:細胞裂解要采用溫和的裂解條件,避免破壞細胞內(nèi)存在的蛋白間相互作用,裂解、洗滌時需使用非變性裂解液,如 NP-40 和 Triton X-100。此外,由于不同細胞裂解條件不一樣,建議通過預(yù)實驗來確定比較好條件。第二步:固定抗體在共沉淀之前,先將固相基質(zhì)與抗體共同孵育,從而使兩者結(jié)合,常用的固相基質(zhì)有瓊脂糖 Agarose 和磁珠 Magnetic beads。瓊脂糖 Agarose 具有簡單易用,直徑大,結(jié)合力強,多孔易吸附的特點;磁珠具有直徑小,背景低,抗體消耗少的特點,但操作時需借助磁力架。注意事項:抗體的選擇十分重要,選經(jīng)過 IP 驗證的抗體,可以減少假陽性概率。同時,要注意抗體/緩沖液的比例,抗體稀釋過度不利于后續(xù)抗原抗體結(jié)合;而抗體過多就不能完全沉降在固相基質(zhì)上,殘存于上清。操作時,為了避免損傷 beads,使用大口徑或截短***頭進行加樣。免疫磁珠的多種系列總有一款是您滿意。湖南anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起

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檢測EPCAM、MUC16兩種抗原在上皮性卵巢*循環(huán)腫瘤細胞中表達的相關(guān)性。方法分別用羧基磁珠制備EPCAM、MUC16兩種免疫磁珠,分3組:EPCAM免疫磁珠檢測組、MUC16免疫磁珠檢測組、2種磁珠均等混合檢測組。對來源于同一患者的等體積外周血樣本進行循環(huán)腫瘤細胞檢測,HE染色后鑒定檢測值。結(jié)果EPCAM免疫磁珠、MUC16免疫磁珠、EPCAM+MUC16免疫磁珠對同體積、同來源樣本檢測值分別為22±11、14±6、28±12個腫瘤細胞(P0.05),說明檢測效率有統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)論MUC16與EPCAM在上皮性卵巢*循環(huán)腫瘤細胞中**表達且存在差異,因此增加MUC16這一***標志物可有效提高上皮性卵巢*CTCs檢出數(shù)量。上海anti-Flag COIP免疫磁珠送貨上門

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