骨髓間充質(zhì)干細胞在一定條件下可分化成為多種結(jié)締組織細胞,也可分化成神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞.目的:觀察采用免疫磁珠法分離成人骨髓來源神經(jīng)干細胞的生物學特征.設計,時間及地點:以患者自身骨髓組織為觀察對象的實驗,于2003-03/2007-06在菏澤市立醫(yī)院檢驗科完成.材料:骨髓組織來自菏澤市立醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的中風,老年性癡呆,帕金森病,腦缺血等神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者.方法:利用免疫磁珠表面的特異性抗體與骨髓組織中神經(jīng)干細胞抗原相結(jié)合,在磁場作用下使結(jié)合磁珠與其他細胞分離,從而獲得神經(jīng)干細胞,再將所分離的純化神經(jīng)干細胞接種到含體積分數(shù)為0.20胎牛血清的EaglesMEM培養(yǎng)液,再在培養(yǎng)基中加入堿性成纖維因子和表皮生長因子進行原代培養(yǎng).主要觀察指標:采用免疫組織化學染色與免疫熒光染色鑒定細胞,并采用流式細胞術測定細胞DNA含量.結(jié)果:在相差顯微鏡下觀察培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞,細胞形態(tài)豐滿,胞核及核仁清晰可見,神經(jīng)突起粗大,網(wǎng)絡稠密.免疫組織化學和免疫熒光染色顯示,細胞神經(jīng)元特異性烯醇化酶,神經(jīng)蛋白,膠質(zhì)纖維酸性蛋白酶,微管相關蛋白為陽性.傳代后的細胞用流式細胞術測定DNA含量為正常二倍體,無誘發(fā)突變.那么免疫磁珠的優(yōu)勢都有哪些呢？北京protein A/G COIP免疫磁珠經(jīng)銷商價格4折起

免疫磁珠分離法純化抗血清的實驗條件,并與A蛋白親和層析法比較純化效果,以求得到一種簡便,快速,高效的純化IgG方法.結(jié)果表明:從5只新西蘭兔獲得210 mL試管凝集效價高達1:5 120的兔抗鰻弧菌抗血清,磁珠與IgG結(jié)合10 min達到平衡,其比較大結(jié)合量為0.227 mg/mL;免疫磁珠分離法與A蛋白親和層析法得到的IgG純度都很高,經(jīng)過SDS-PAGE電泳都只得到25 ku和55 ku左右的兩條帶;免疫磁珠分離法得到的抗體ELISA效價高于A蛋白親和層析法;免疫磁珠分離法反應所需時間(10 min)小于A蛋白親和層析法所需的20 min,其得率(11.5 mg/mL)也高于A蛋白親和層析法的10.25 mg/mL.湖北protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠銷售根據(jù)您的具體需求選擇不同的免疫磁珠系列。

免疫磁珠技術(immunomagneticbeads,IMB)是近年來國內(nèi)外研究的一種新的免疫學技術.隨著納米技術的不斷發(fā)展,納米免疫磁珠具備了良好的磁感應性,超順磁性,高特異性,高濃縮性,高分離率,且不影響細胞活性等優(yōu)點,因此它能從大量外周血細胞中篩選出帶有特異性制備可高效,特異地分離單增李斯特菌的免疫磁珠.探討羧基修飾磁珠與多克隆抗體的不同偶聯(lián)條件和免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.方法:以單增李斯特菌作為抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔源多克隆抗體,鑒定其與單增李斯特菌體的結(jié)合能力;選擇6種不同的偶聯(lián)緩沖溶液,設置了6個主要偶聯(lián)時間和6組偶聯(lián)溫度,通過比較磁珠與抗體偶聯(lián)后上清中剩余的抗體量來確定比較好偶聯(lián)條件.結(jié)果:制備的多克隆抗體效價為1.3×105,該抗體與單增李斯特菌體有較好的結(jié)合,抗體與1mg羧基修飾磁珠在pH6.0的0.01mol/L一水嗎啉乙磺酸緩沖溶液(MES)中,37℃偶聯(lián)2h,偶聯(lián)抗體的量為160μg;制得的免疫磁珠的捕獲率可達77.0%.結(jié)論:獲得羧基磁珠與抗體偶聯(lián)的比較好條件,該免疫磁珠用于食品中單增李斯特菌的檢測,與常規(guī)的平皿增菌培養(yǎng)顯色法比較,檢測時間至少縮短20h.標記的腫瘤細胞

從臍血中分離,培養(yǎng)血管內(nèi)皮祖細胞,研究內(nèi)皮祖細胞的生長特性和誘導分化條件.方法:應用MACS磁球抗體標記法純化臍血中的CD133+細胞,通過流式細胞儀,免疫細胞化學,免疫熒光等技術及形態(tài)學(光鏡,電鏡)觀察研究內(nèi)皮祖細胞;將細胞接種于添加(或未添加)VEGF,bFGF,干細胞因子(SCF)的含20%胎牛血清(FBS)的IMDM培養(yǎng)基中,觀察內(nèi)皮祖細胞的生長特性.結(jié)果:分離新鮮臍血所得CD133陽性細胞占單個核細胞的(1.41±1.14)%,經(jīng)流式細胞儀鑒定CD133+細胞純度為75%-85%;將分離細胞接種于纖維連接蛋白包被的24孔板內(nèi),培養(yǎng)1-2h即有細胞貼壁,7-10d可見貼壁細胞呈鋪路石樣排列;14d后細胞出現(xiàn)小圓形,梭形等多樣性變化,可見***管腔樣結(jié)構,電鏡觀察可見胞漿內(nèi)典型的Weibel-Palade小體;在VEGF,bFGF,SCF存在條件下,檢測貼壁細胞培養(yǎng)14d后細胞表面抗原表達情況:與培養(yǎng)開始時相比,祖細胞標志CD133和CD34陽性率呈明顯下降趨勢,分別由(77.0±3.3)%和(93.1±4.7)%降至(1.6±2.2)%和(37.4±4.9)%,P<0.05,內(nèi)皮細胞特異性標志Flk-1表達明顯增加,由(22.3±3.3)%增至(94.3±4.1)%,P<0.05,同時vWF抗原呈強陽性表達,陽性率為(77.9±3.3)%.上海普平生物科技有限公司從事免疫磁珠供應。

建立有效的人類神經(jīng)干細胞分離純化系統(tǒng)和方法.方法:無菌取孕24周流產(chǎn)胎兒的室下區(qū)腦組織,制備細胞懸液,用磁性微珠標記的CD133單克隆抗體與細胞孵育,通過磁分選器分離出CD133(+)和CD133(-)細胞,通過體外培養(yǎng)并誘導分化,觀察CD133陽性細胞和陰性細胞的增殖情況及分化能力.結(jié)果:經(jīng)免疫磁珠分選的室下區(qū)腦組織中,CD133(+)細胞占胚胎腦組織細胞的2%左右,該細胞體外擴增能力強,細胞呈球形生長,并易聚集成團,培養(yǎng)5d,10d,15d,20d進行活細胞計數(shù),細胞增長率分別為1.79%,4.82%,7.21%,14.66%,誘導分化后的細胞經(jīng)染色鑒定可分化為神經(jīng)元,神經(jīng)膠質(zhì)等多種神經(jīng)細胞,陰性細胞擴增能力弱,活細胞計數(shù)以死細胞數(shù)量居多,大約705,另外一些細胞貼壁分化.結(jié)論:免疫磁珠法簡便,有效,經(jīng)免疫磁珠分離的神經(jīng)干細胞在體外能進一步培養(yǎng)擴增并分化.BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。北京蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠市場報價

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應用免疫磁珠法分離篩選人乳牙牙髓干細胞,并做培養(yǎng)鑒定.方法采用STRO-1為標記物以免疫磁珠分離篩選人乳牙牙髓干細胞,觀察細胞形態(tài)及生長情況,流式細胞儀檢測細胞表型,并檢測細胞體外多向分化能力.結(jié)果應用免疫磁珠法篩選人乳牙牙髓細胞可獲得乳牙牙髓干細胞,經(jīng)統(tǒng)計學處理證明看其生長速度慢于牙髓細胞,細胞表型分析證實CD29,CD105高表達,CD34,CD45低表達.礦化誘導和成脂誘導證實STRO-1+乳牙牙髓細胞具有干細胞多向分化的能力.結(jié)論免疫磁珠法是有效的分離純化人乳牙牙髓干細胞的方法.所分離的細胞具有干細胞的表型特點及多向分化能力.北京protein A/G COIP免疫磁珠經(jīng)銷商價格4折起

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