常用的磁珠法DNA提取試劑盒,國外的有Dynal、Qiagen等,國內將磁珠應用于核酸提取的研究起源于02年左右,經過近些年的反復試驗,形成了穩(wěn)定的核酸提取體系,并已被***用于一些疾?。ㄈ缫腋?、丙肝、結核菌)等的定量檢測(如惠爾納米的系列磁珠法核酸提取試劑盒)。國產磁珠法試劑盒與進口產品相比,已不單單是只具有價格優(yōu)勢,其產品的穩(wěn)定性、高效性、提取出的核酸的質量與產量都足以與進口磁珠法試劑盒媲美。但是進口試劑盒長期以來形成的完善的銷售渠道對國產試劑盒的推廣是一大挑戰(zhàn)。買免疫磁珠找上海普平生物科技有限公司。甘肅anti-Myc COIP免疫磁珠性能
免疫磁珠(Immunomagneticbeads,IMB),是由載體微球和免疫配基結合而成的一種納米級材料.免疫磁珠分離技術是以高均一性的磁性微球為固相支持物,將免疫配基(如抗體,抗原等)通過功能基團結合到磁性載體上形成免疫磁性微球,利用特異性的免疫學反應,在磁力作用下,發(fā)生力學移動,從混合溶液中分離出特異性的靶物質.具有分離速度快,效率高,可重復性好,操作簡單,不需要昂貴的儀器設備等優(yōu)點.本實驗采用化學共沉淀的方法合成了納米級Fe3O4磁性微粒,具有顆粒均一程度高,懸浮穩(wěn)定性好,超順磁性等特點,經固體物含量的測定及其粒徑的測定,磁珠的濃度約為7.9mg/mL,粒徑約為30~100nm左右,對其懸浮液加入烷基化試劑和醛基化試劑進行表面修飾,提高了磁性微粒的性能.甘肅anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門上海普平生物科技有限公司專業(yè)致力于免疫磁珠批發(fā)。
人腦**組織中分離,培養(yǎng),純化和鑒定腦**干細胞(BTSCs),探討CD133免疫磁珠分選方法獲取BTSCs的可行性及BTSCs的生物學特性.方法:留取人腦膠質母細胞瘤新鮮標本,分離獲得腦腫瘤細胞.應用CD133免疫磁珠分選方法純化BTSCs;流式細胞儀檢測分選陽性率;神經球計數法分析CD133+/-亞群細胞神經球形成情況;免疫熒光方法檢測CD133+/-亞群細胞表面神經干細胞(NSCs)標記物CD133,神經巢蛋白(nestin)表達情況;檢測CD133+/-亞群細胞經誘導分化后細胞表面分化標記物β-TubulinⅢ,GFAP表達情況.結果:CD133+亞群細胞具有干細胞特性,可形成明顯的神經球,具有自我更新和明顯的增殖能力,并且NSCs標記物CD133,nestin表達陽性,經誘導分化后分化標記物β-TubulinⅢ,GFAP表達陽性;CD133-亞群細胞無上述特性.結論:CD133免疫磁珠分選方法獲得的CD133+亞群細胞即為BTSCs,該方法可以得到高純度的BTSCs,可以用于BTSCs的實驗研究.
常見問題及對策5:磁珠在使用過程中出現結塊現象?磁珠在使用時如果出現結塊現象一般較難振蕩打散,容易導致分布不均,出現該問題的原因是磁珠在磁場中放置太久而使磁珠牢固的結合在一起。用超聲波水浴處理2min即可打散磁珠使其重新分散,但應注意超聲處理也會使磁珠在樣品溶液中捕獲的抗體脫落,所以磁珠在加樣后洗脫前不宜使用該方法。緩沖液匯總Co-IP&CHIP磁珠緩沖液匯總:細胞裂解液:正常RIPA細胞裂解緩沖液(一般是公司購買)抗體磁珠結合buffer:PBST(1*PBS+1%TritonX-100)Washingbuffer:PBST(1*PBS+1%TritonX-100)抗原與抗體/磁珠復合物bindingbuffer:可以用RIPA細胞裂解緩沖液代替Washingbuffer:PBST(1*PBS+1%TritonX-100)6、Elutionbuffer:(1)變性洗脫緩沖液,直接加入1*蛋白loadingbuffer,98oC5min后棄去磁珠后,收集上清液檢測。(2)非變性洗脫緩沖液:Elutionbuffer:0.1M-0.2MGlycine,0.1%-0.5%Triton100orTween20,pH2.5-3.1。一個好的免疫磁珠需要具備哪些特點您了解嗎?
COIP實驗步驟第三步:免疫共沉淀根據不同的抗體結合方式,這里的免疫共沉淀步驟會稍有不同,但是本質是一樣的,都是為了形成抗原-蛋白復合物。如果直接使用 Protein A/G 結合的 beads,先進行細胞裂解液/蛋白混合物與抗體的孵育,再加入 beads 將蛋白-抗體復合物拉下來。如果使用了交聯劑將抗體與 Protein A/G 固定,或者直接將抗體固定在 beads,則將固定抗體的 beads 與細胞裂解液或則蛋白混合物一起孵育。增加在洗脫之前的洗滌次數或在免疫共沉淀緩沖液中加入 Triton X-100 ,可以降低非特異性結合,以防止蛋白在陰性對照樹脂實驗樣品中被檢測到。第四步:洗脫與檢測***一步則是使用洗脫緩沖液將互作蛋白復合物洗脫,并通過 Western Blot 或者 Mass spectra 檢測鑒定蛋白。當蛋白或抗體對低 pH 的緩沖液敏感,可使用中性 pH 值的洗脫緩沖液。注意事項:如后續(xù)需進行酶活或功能性分析,則需使用兼容下游檢測的 Elution buffer 進行洗脫。對于交聯劑結合的 beads,為了保持抗體偶聯樹脂的活性,應立即再生和存儲樹脂,保證抗體可以重復利用。您知道上海普平生物科技有限公司的免疫磁珠系列都有哪些嗎?浙江anti-Myc COIP免疫磁珠銷售
免疫磁珠的主要特點都有哪些呢?甘肅anti-Myc COIP免疫磁珠性能
羥基淀粉沉淀去除臍血紅細胞和免疫磁珠(MACS)陽性選擇,建立富集,分離臍血CD34+細胞的簡易實用方法,通過造血祖細胞集落培養(yǎng)分析其在細胞因子作用下的增殖潛能,觀察羥基淀粉沉淀對造血細胞增殖功能的影響.方法:采用羥基淀粉沉淀和改進的MACS富集,分離臍血CD34+細胞,以甲纖半固體造血細胞培養(yǎng)法觀察其粒-單系細胞(CFU-GM)和紅系爆式集落(BFU-E)的數量和特性.結果:臍血分離前,CD34+細胞純度為1.5%~3%,MACS分離后其純度可達85%,羥基淀粉沉淀和MACS分離可達91%;CD34+造血祖細胞培養(yǎng)有明顯的增殖,采用IL-3,IL-6,SCF,GM-CSF,EPO等細胞因子組合擴增培養(yǎng)9~14d,CD34+細胞在液體培養(yǎng)中有明顯擴增,MACS分離后CD34+細胞總數增加39倍,羥基淀粉沉淀和MACS分離可增加45倍.結論:應用羥基淀粉沉淀和改進的MACS系統(tǒng)可有效富集,分離臍血CD34+細胞,羥基淀粉沉淀對CD34+細胞的富集,分離無影響;臍血細胞分離后作造血祖細胞培養(yǎng),可產生豐富的CFU-GM和BFU-E,說明羥基淀粉沉淀分離的CD34+細胞的增殖功能優(yōu)于MACS分離CD34+細胞的增殖功能.甘肅anti-Myc COIP免疫磁珠性能
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