微小免疫磁珠分離提純SD胎鼠大腦皮層組織中的神經(jīng)干細胞并進行培養(yǎng),為研究神經(jīng)干細胞的特性與神經(jīng)干細胞的培養(yǎng)和移植研究創(chuàng)造有利條件.方法取SD胎鼠的大腦皮層組織制成單細胞懸液,用微小磁珠(平均直徑≤50nm)分選出神經(jīng)巢蛋白(nestin)陽性的細胞群,以流式細胞術(shù)檢測陽性細胞純度,以臺盼藍染色法檢測細胞活性.結(jié)果分離的神經(jīng)干細胞流式細胞儀檢測細胞nestin陽性表達率為(88.5±3.6)%,細胞存活率為(96.3±1.8)%.結(jié)論微小免疫磁珠法分離胎鼠腦神經(jīng)干細胞群落簡便,有效,可以為神經(jīng)干細胞的細胞培養(yǎng)和移植提供細胞來源.免疫磁珠的不同系列會有不同的優(yōu)勢。湖北protein A/G COIP免疫磁珠批量定制

應(yīng)用免疫磁珠法分離篩選人乳牙牙髓干細胞,并做培養(yǎng)鑒定.方法采用STRO-1為標記物以免疫磁珠分離篩選人乳牙牙髓干細胞,觀察細胞形態(tài)及生長情況,流式細胞儀檢測細胞表型,并檢測細胞體外多向分化能力.結(jié)果應(yīng)用免疫磁珠法篩選人乳牙牙髓細胞可獲得乳牙牙髓干細胞,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理證明看其生長速度慢于牙髓細胞,細胞表型分析證實CD29,CD105高表達,CD34,CD45低表達.礦化誘導(dǎo)和成脂誘導(dǎo)證實STRO-1+乳牙牙髓細胞具有干細胞多向分化的能力.結(jié)論免疫磁珠法是有效的分離純化人乳牙牙髓干細胞的方法.所分離的細胞具有干細胞的表型特點及多向分化能力.遼寧anti-Myc COIP免疫磁珠銷售免疫磁珠的系列有很多種。

免疫磁珠技術(shù)(immunomagneticbeads,IMB)是近年來國內(nèi)外研究的一種新的免疫學(xué)技術(shù).隨著納米技術(shù)的不斷發(fā)展,納米免疫磁珠具備了良好的磁感應(yīng)性,超順磁性,高特異性,高濃縮性,高分離率,且不影響細胞活性等優(yōu)點,因此它能從大量外周血細胞中篩選出帶有特異性制備可高效,特異地分離單增李斯特菌的免疫磁珠.探討羧基修飾磁珠與多克隆抗體的不同偶聯(lián)條件和免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.方法:以單增李斯特菌作為抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔源多克隆抗體,鑒定其與單增李斯特菌體的結(jié)合能力;選擇6種不同的偶聯(lián)緩沖溶液,設(shè)置了6個主要偶聯(lián)時間和6組偶聯(lián)溫度,通過比較磁珠與抗體偶聯(lián)后上清中剩余的抗體量來確定比較好偶聯(lián)條件.結(jié)果:制備的多克隆抗體效價為1.3×105,該抗體與單增李斯特菌體有較好的結(jié)合,抗體與1mg羧基修飾磁珠在pH6.0的0.01mol/L一水嗎啉乙磺酸緩沖溶液(MES)中,37℃偶聯(lián)2h,偶聯(lián)抗體的量為160μg;制得的免疫磁珠的捕獲率可達77.0%.結(jié)論:獲得羧基磁珠與抗體偶聯(lián)的比較好條件,該免疫磁珠用于食品中單增李斯特菌的檢測,與常規(guī)的平皿增菌培養(yǎng)顯色法比較,檢測時間至少縮短20h.標記的腫瘤細胞

常見問題及對策5：磁珠在使用過程中出現(xiàn)結(jié)塊現(xiàn)象？磁珠在使用時如果出現(xiàn)結(jié)塊現(xiàn)象一般較難振蕩打散，容易導(dǎo)致分布不均，出現(xiàn)該問題的原因是磁珠在磁場中放置太久而使磁珠牢固的結(jié)合在一起。用超聲波水浴處理2min即可打散磁珠使其重新分散，但應(yīng)注意超聲處理也會使磁珠在樣品溶液中捕獲的抗體脫落，所以磁珠在加樣后洗脫前不宜使用該方法。緩沖液匯總Co-IP&CHIP磁珠緩沖液匯總：細胞裂解液：正常RIPA細胞裂解緩沖液(一般是公司購買)抗體磁珠結(jié)合buffer：PBST(1*PBS+1%TritonX-100)Washingbuffer:PBST(1*PBS+1%TritonX-100)抗原與抗體/磁珠復(fù)合物bindingbuffer：可以用RIPA細胞裂解緩沖液代替Washingbuffer:PBST(1*PBS+1%TritonX-100)6、Elutionbuffer:(1)變性洗脫緩沖液，直接加入1*蛋白loadingbuffer,98oC5min后棄去磁珠后，收集上清液檢測。（2）非變性洗脫緩沖液：Elutionbuffer:0.1M-0.2MGlycine,0.1%-0.5%Triton100orTween20,pH2.5-3.1。上海普平生物科技有限公司專業(yè)致力于免疫磁珠生產(chǎn)。

骨髓間充質(zhì)干細胞在一定條件下可分化成為多種結(jié)締組織細胞,也可分化成神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞.目的:觀察采用免疫磁珠法分離成人骨髓來源神經(jīng)干細胞的生物學(xué)特征.設(shè)計,時間及地點:以患者自身骨髓組織為觀察對象的實驗,于2003-03/2007-06在菏澤市立醫(yī)院檢驗科完成.材料:骨髓組織來自菏澤市立醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的中風(fēng),老年性癡呆,帕金森病,腦缺血等神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者.方法:利用免疫磁珠表面的特異性抗體與骨髓組織中神經(jīng)干細胞抗原相結(jié)合,在磁場作用下使結(jié)合磁珠與其他細胞分離,從而獲得神經(jīng)干細胞,再將所分離的純化神經(jīng)干細胞接種到含體積分數(shù)為0.20胎牛血清的EaglesMEM培養(yǎng)液,再在培養(yǎng)基中加入堿性成纖維因子和表皮生長因子進行原代培養(yǎng).主要觀察指標:采用免疫組織化學(xué)染色與免疫熒光染色鑒定細胞,并采用流式細胞術(shù)測定細胞DNA含量.結(jié)果:在相差顯微鏡下觀察培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞,細胞形態(tài)豐滿,胞核及核仁清晰可見,神經(jīng)突起粗大,網(wǎng)絡(luò)稠密.免疫組織化學(xué)和免疫熒光染色顯示,細胞神經(jīng)元特異性烯醇化酶,神經(jīng)蛋白,膠質(zhì)纖維酸性蛋白酶,微管相關(guān)蛋白為陽性.傳代后的細胞用流式細胞術(shù)測定DNA含量為正常二倍體,無誘發(fā)突變.您了解免疫磁珠的優(yōu)勢嗎？安徽anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠生產(chǎn)廠家

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從白血病KG1a細胞中分選CD34+CD38-干細胞并研究其生物學(xué)特性.方法免疫磁珠法分選CD34+CD38-細胞,流式細胞術(shù)分析細胞表面膜抗原,細胞周期,甲基纖維素培養(yǎng)體系觀察其克隆性;以HL60,K562,CD34+CD38+細胞為對照,甲基偶氮唑藍法檢測柔紅霉素對CD34+CD38-細胞的抑制作用;BALB/c裸鼠皮下接種,觀察體內(nèi)成瘤能力.結(jié)果分選的CD34+CD38-細胞純度達95%以上,(69.03±3.25)%處于G0期,克隆形成率為(38.64±2.68)%,明顯抵抗柔紅霉素;不同濃度柔紅霉素作用后,CD34+CD38-,CD34+CD38+,HL60,K562細胞的活性差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=961.136,P=0.000);CD34+CD38-在裸鼠皮下成瘤率***高于CD34+CD38+細胞(P〈0.05).結(jié)論免疫磁珠法分選白血病干細胞簡單易行,分選的細胞符合白血病干細胞生物學(xué)特性.湖北protein A/G COIP免疫磁珠批量定制

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