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免疫共沉淀(COIP)優(yōu)點(diǎn)(1)相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的,處于天然狀態(tài);(2)蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的,可以避免人為的影響;(3)可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。免疫共沉淀(COIP)缺點(diǎn)(1)可能檢測(cè)不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用;(2)兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合,而可能有第三者在中間起橋梁作用;(3)必須在實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)目的蛋白是什么,以選擇***檢測(cè)的抗體,所以,若預(yù)測(cè)不正確,實(shí)驗(yàn)就得不到結(jié)果,方法本身具有冒險(xiǎn)性。(4)靈敏度沒有親和色譜高。BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠全國招商代理。湖南anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠生產(chǎn)廠家
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時(shí),完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來。當(dāng)用預(yù)先固化在agarosebeads上的蛋白質(zhì)A的抗體免疫沉淀A蛋白,那么與A蛋白在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)B也能一起沉淀下來。再通過蛋白變性分離,對(duì)B蛋白進(jìn)行檢測(cè),進(jìn)而證明兩者間的相互作用。這種方法得到的目的蛋白是在細(xì)胞內(nèi)與興趣蛋白天然結(jié)合的,符合體內(nèi)實(shí)際情況,得到的結(jié)果可信度高。這種方法常用于測(cè)定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合;也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。吉林蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠市場(chǎng)報(bào)價(jià)上海普平生物科技有限公司專業(yè)致力于免疫磁珠直銷。
兔前軟骨干細(xì)胞PSCs,(precartilagiousstemcells)的分離,培養(yǎng)方法及增殖,表型特征,為細(xì)胞移植***椎間盤退變,提供合適的種子細(xì)胞.[方法]取胎兔骨骺周圍軟骨膜(LaCroix環(huán))中的細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng),然后采用免疫磁珠分離系統(tǒng)分選純化PSCs.體外培養(yǎng),傳代,凍存復(fù)蘇,繪制生長曲線,觀察細(xì)胞特性.分別采用免疫組化,免疫熒光,RT-PCR等方法鑒定純化后的PSCs.[結(jié)果]免疫磁珠分離可獲得純度較高的兔PSCs,培養(yǎng)后成活率高,細(xì)胞狀態(tài)良好.細(xì)胞凍存復(fù)蘇后,細(xì)胞增殖速度,細(xì)胞形態(tài)及表面標(biāo)志物無明顯變化.免疫組化,免疫熒光,RT-PCR等方法鑒定后,細(xì)胞都有明顯的PSCs表面特異性標(biāo)記物的表達(dá).[結(jié)論]PSCs存在于LaCroix環(huán)中,免疫磁珠分離法得到的PSCs,體外培養(yǎng)條件下,細(xì)胞增殖較快,生物學(xué)特性穩(wěn)定.
分離轉(zhuǎn)基因小鼠骨髓造血干細(xì)胞.運(yùn)用針對(duì)小鼠干細(xì)胞表面特異表達(dá)的干細(xì)胞抗原-1(stemcellantigen-1,Sca-1)的單克隆抗體和包被于磁顆粒表面的第二抗體,采用磁吸附細(xì)胞分選方法(MACS)分離小鼠骨髓造血干細(xì)胞,用流式細(xì)胞術(shù)(FACS)檢測(cè)MACS分離后骨髓細(xì)胞中干細(xì)胞(Sca-1陽性細(xì)胞)比例,監(jiān)測(cè)細(xì)胞分選效果.結(jié)果顯示MACS分離后骨髓細(xì)胞中Sca-1陽性細(xì)胞所占比例達(dá)85%以上,涂片觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞組成和細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征與FACS所得結(jié)果一致.MACS可以從轉(zhuǎn)基因小鼠全骨髓細(xì)胞中分離出Sca-1陽性的骨髓造血干細(xì)胞,細(xì)胞純度可達(dá)85%以上.您知道上海普平生物科技有限公司的免疫磁珠系列都有哪些嗎?
免疫磁珠法分選人骨髓多能成體祖細(xì)胞,觀察其分選效果,建立體外分選純化及培養(yǎng)人骨髓來源多能成體祖細(xì)胞(hMAPCs)的方法.方法:取健康成人志愿者適量骨髓后采用梯度密度離心法分離獲取單個(gè)核細(xì)胞,在自制培養(yǎng)基下貼壁培養(yǎng)后,將獲取的骨髓貼壁細(xì)胞通過CD45,血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)負(fù)分選,錐蟲藍(lán)拒染實(shí)驗(yàn)計(jì)數(shù)MACS分選前后細(xì)胞活力.流式細(xì)胞儀鑒定分選后細(xì)胞純度;流式細(xì)胞儀分析培養(yǎng)細(xì)胞CD29,CD44,CD34和HLA-DR表達(dá)情況.結(jié)果:通過MACS分選,平均每1×106/ml骨髓貼壁細(xì)胞可分選出約(5~10)×104/mlhMAPCs,分選后的hMAPCs細(xì)胞生長良好,**長傳代到第20代.分選前后細(xì)胞活力分別為(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,無明顯差異;流式細(xì)胞儀分析獲取的CD45-,GlyA-細(xì)胞純度大于98%;流式細(xì)胞儀檢測(cè)hMAPCs中CD29陽性表達(dá)細(xì)胞比率為99.2%,CD44陽性細(xì)胞比率為98.3%,CD34陽性細(xì)胞比率為1.2%,HLA-DR陽性細(xì)胞比率為5.3%.結(jié)論:CD45,GlyA免疫微磁珠負(fù)分選可從骨髓中分離高純度的hMAPCs;分選后hMAPCs在自行研制的培養(yǎng)基中有較強(qiáng)的增殖能力.免疫磁珠的好處有很多。黑龍江蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠代理價(jià)格4折起
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從白血病KG1a細(xì)胞中分選CD34+CD38-干細(xì)胞并研究其生物學(xué)特性.方法免疫磁珠法分選CD34+CD38-細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞表面膜抗原,細(xì)胞周期,甲基纖維素培養(yǎng)體系觀察其克隆性;以HL60,K562,CD34+CD38+細(xì)胞為對(duì)照,甲基偶氮唑藍(lán)法檢測(cè)柔紅霉素對(duì)CD34+CD38-細(xì)胞的抑制作用;BALB/c裸鼠皮下接種,觀察體內(nèi)成瘤能力.結(jié)果分選的CD34+CD38-細(xì)胞純度達(dá)95%以上,(69.03±3.25)%處于G0期,克隆形成率為(38.64±2.68)%,明顯抵抗柔紅霉素;不同濃度柔紅霉素作用后,CD34+CD38-,CD34+CD38+,HL60,K562細(xì)胞的活性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=961.136,P=0.000);CD34+CD38-在裸鼠皮下成瘤率***高于CD34+CD38+細(xì)胞(P〈0.05).結(jié)論免疫磁珠法分選白血病干細(xì)胞簡單易行,分選的細(xì)胞符合白血病干細(xì)胞生物學(xué)特性.湖南anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠生產(chǎn)廠家
上海普平生物科技有限公司是一家上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓;實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、化工原料及產(chǎn)品的銷售;計(jì)算機(jī)軟件開發(fā);計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)工程;從事貨物及技術(shù)進(jìn)出口業(yè)務(wù)。 的公司,是一家集研發(fā)、設(shè)計(jì)、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。普平生物作為上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓;實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、化工原料及產(chǎn)品的銷售;計(jì)算機(jī)軟件開發(fā);計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)工程;從事貨物及技術(shù)進(jìn)出口業(yè)務(wù)。 的企業(yè)之一,為客戶提供良好的科研試劑、耗材、儀器,納米脂質(zhì)體,細(xì)胞、分子、蛋白實(shí)驗(yàn),科研項(xiàng)目。普平生物不斷開拓創(chuàng)新,追求出色,以技術(shù)為先導(dǎo),以產(chǎn)品為平臺(tái),以應(yīng)用為重點(diǎn),以服務(wù)為保證,不斷為客戶創(chuàng)造更高價(jià)值,提供更優(yōu)服務(wù)。普平生物始終關(guān)注化工行業(yè)。滿足市場(chǎng)需求,提高產(chǎn)品價(jià)值,是我們前行的力量。