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來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-04-12

分離轉(zhuǎn)基因小鼠骨髓造血干細(xì)胞.運(yùn)用針對(duì)小鼠干細(xì)胞表面特異表達(dá)的干細(xì)胞抗原-1(stemcellantigen-1,Sca-1)的單克隆抗體和包被于磁顆粒表面的第二抗體,采用磁吸附細(xì)胞分選方法(MACS)分離小鼠骨髓造血干細(xì)胞,用流式細(xì)胞術(shù)(FACS)檢測(cè)MACS分離后骨髓細(xì)胞中干細(xì)胞(Sca-1陽性細(xì)胞)比例,監(jiān)測(cè)細(xì)胞分選效果.結(jié)果顯示MACS分離后骨髓細(xì)胞中Sca-1陽性細(xì)胞所占比例達(dá)85%以上,涂片觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞組成和細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征與FACS所得結(jié)果一致.MACS可以從轉(zhuǎn)基因小鼠全骨髓細(xì)胞中分離出Sca-1陽性的骨髓造血干細(xì)胞,細(xì)胞純度可達(dá)85%以上.BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。浙江anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門

免疫磁珠法原代分離純化大鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞,并確定其免疫組化特征.方法免疫磁珠法結(jié)合傳統(tǒng)的膠原酶消化及篩網(wǎng)過濾法分離出大鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞,采用含有20%胎牛血清的DMEM培養(yǎng).通過周細(xì)胞的形態(tài)和生長方式初步鑒別,再進(jìn)行細(xì)胞α-SMA,vWF,GFAP抗體免疫組織化學(xué)特征鑒定,及激光共聚焦顯微鏡行周細(xì)胞PDGFR-β和desmin抗體熒光雙標(biāo)觀察.周細(xì)胞生長曲線通過MTT法測(cè)定.結(jié)果本法獲得的周細(xì)胞純度可達(dá)98%,并能連續(xù)傳代.原代周細(xì)胞約2~3周融合,傳代后生長和融合速度加快,細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,胞內(nèi)可見絲狀結(jié)構(gòu),無接觸性抑制.免疫組化證實(shí)周細(xì)胞胞漿內(nèi)α-SMA蛋白表達(dá)陽性,內(nèi)皮細(xì)胞特異性vWF因子表達(dá)陰性,膠質(zhì)細(xì)胞特異性GFAP表達(dá)陰性.激光共聚焦顯示周細(xì)胞PDGFR-β和desmin抗原表達(dá)均為陽性.結(jié)論本研究***報(bào)道應(yīng)用免疫磁珠法分離培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞.獲得高度純化的周細(xì)胞具有明確的免疫組化特征,可用于相關(guān)視網(wǎng)膜血管性疾病的進(jìn)一步研究.遼寧protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠銷售上海普平生物科技有限公司主營產(chǎn)品包括免疫磁珠。

免疫共沉淀(COIP)優(yōu)點(diǎn)(1)相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的,處于天然狀態(tài);(2)蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的,可以避免人為的影響;(3)可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。免疫共沉淀(COIP)缺點(diǎn)(1)可能檢測(cè)不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用;(2)兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合,而可能有第三者在中間起橋梁作用;(3)必須在實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)目的蛋白是什么,以選擇***檢測(cè)的抗體,所以,若預(yù)測(cè)不正確,實(shí)驗(yàn)就得不到結(jié)果,方法本身具有冒險(xiǎn)性。(4)靈敏度沒有親和色譜高。

核酸提取磁珠通過對(duì)磁珠進(jìn)行一定的包被(如硅基、氨基、羧基等),從而可以實(shí)現(xiàn)對(duì)核酸的高通量、自動(dòng)化提取,這一技術(shù)產(chǎn)生于20世紀(jì)80年代,已經(jīng)有了成熟的試劑盒并形成為產(chǎn)業(yè)。隨著基因檢測(cè)、個(gè)性化給藥、產(chǎn)前診斷等的普及,在生物行業(yè)各領(lǐng)域都追求高通量、自動(dòng)化的***,傳統(tǒng)DNA提取方法的局限愈來愈明顯,而磁珠法DNA提取的優(yōu)勢(shì)則愈來愈明顯:①能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化、大批量操作,已有96孔的核酸自動(dòng)提取儀,用一個(gè)樣品的提取時(shí)間即可實(shí)現(xiàn)對(duì)96個(gè)樣品的處理,符合生物學(xué)高通量的操作要求,使得傳染性疾病爆發(fā)時(shí)能夠進(jìn)行快速及時(shí)的應(yīng)對(duì),這一特點(diǎn)使得傳統(tǒng)方法望塵莫及;②操作簡單、用時(shí)短,整個(gè)提取流程只有四步,大多可以在36-40分鐘內(nèi)完成;③安全無毒,不使用傳統(tǒng)方法中的苯、氯仿等有毒試劑,對(duì)實(shí)驗(yàn)操作人員的傷害減少到**少,完全符合現(xiàn)代環(huán)保理念;④磁珠與核酸的特異性結(jié)合使得提取的核酸純度高、濃度大。上海普平生物科技有限公司免疫磁珠擁有完善的售后。

免疫磁珠法(MACS):免疫磁珠法是2O世紀(jì)80年代出現(xiàn)的技術(shù)方法。1983年Ugelstad提出將免疫磁珠用于細(xì)胞分選,1990年,Mihenyi建立了MACS。這一方法的**是在磁珠表面包被具免疫反應(yīng)性的抗體進(jìn)行抗原抗體反應(yīng),在細(xì)胞表面形成玫瑰花結(jié),這些結(jié)合了磁珠的細(xì)胞一旦置于強(qiáng)大的磁場(chǎng)下,就會(huì)與其他未被結(jié)合的細(xì)胞分群,具***順磁場(chǎng)的磁珠脫離磁場(chǎng)后立即消失磁性,這樣就可以篩選或去除所標(biāo)記的細(xì)胞,從而達(dá)到陽性或陰性選擇細(xì)胞的目的。這一技術(shù)已經(jīng)***運(yùn)用于細(xì)胞及分子生物學(xué),分離基因、靶細(xì)胞及造血干細(xì)胞等。其分離效果得到了免疫熒光、PCR、FISH及FACS等方法的確認(rèn)。免疫磁珠可以有效地分選細(xì)胞,從而決定了這一方法在神經(jīng)干細(xì)胞分選中應(yīng)用的技術(shù)可行性。BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。廣東蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠批量定制

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實(shí)驗(yàn)優(yōu)化建立基于免疫磁分離技術(shù)對(duì)金黃色葡萄球菌的快速分離方法,為后續(xù)快速檢測(cè)提供基礎(chǔ).利用金黃色葡萄球菌多抗制備的免疫磁珠對(duì)其捕獲.結(jié)合平板菌落計(jì)數(shù),考察包被磁珠時(shí)多抗加入量,免疫磁珠加入量及捕獲時(shí)間等因素對(duì)捕獲效率的影響.在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn),并對(duì)該方法的靈敏度,特異性及其在食品中的應(yīng)用效果初步探索.結(jié)果表明,比較好捕獲條件為抗體加入量30μL,免疫磁珠加入量80μL,捕獲時(shí)間45min,在此條件下捕獲效率均超過30%,該方法捕獲限可達(dá)到101CFU/mL,特異性良好,并初步用于羊肉卷洗水中金黃色葡萄球菌的快速分離,捕獲時(shí)間小于1h.免疫磁分離作為一種快速的分離篩選方法,可用于食源性金黃色葡萄球菌的快速分離.浙江anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門

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