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免疫磁珠法分選人骨髓多能成體祖細胞,觀察其分選效果,建立體外分選純化及培養(yǎng)人骨髓來源多能成體祖細胞(hMAPCs)的方法.方法:取健康成人志愿者適量骨髓后采用梯度密度離心法分離獲取單個核細胞,在自制培養(yǎng)基下貼壁培養(yǎng)后,將獲取的骨髓貼壁細胞通過CD45,血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)負分選,錐蟲藍拒染實驗計數(shù)MACS分選前后細胞活力.流式細胞儀鑒定分選后細胞純度;流式細胞儀分析培養(yǎng)細胞CD29,CD44,CD34和HLA-DR表達情況.結(jié)果:通過MACS分選,平均每1×106/ml骨髓貼壁細胞可分選出約(5~10)×104/mlhMAPCs,分選后的hMAPCs細胞生長良好,**長傳代到第20代.分選前后細胞活力分別為(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,無明顯差異;流式細胞儀分析獲取的CD45-,GlyA-細胞純度大于98%;流式細胞儀檢測hMAPCs中CD29陽性表達細胞比率為99.2%,CD44陽性細胞比率為98.3%,CD34陽性細胞比率為1.2%,HLA-DR陽性細胞比率為5.3%.結(jié)論:CD45,GlyA免疫微磁珠負分選可從骨髓中分離高純度的hMAPCs;分選后hMAPCs在自行研制的培養(yǎng)基中有較強的增殖能力.想要買免疫磁珠?您要先了解免疫磁珠的特點。安徽protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
偶聯(lián)單抗NJ001的免疫磁珠對肺腺*裸鼠模型micro-CT掃描的增強作用.方法:經(jīng)尾靜脈注射SPC-A1-luc細胞建立肺腺*裸鼠模型,生物發(fā)光成像定量監(jiān)測**的大小.裸鼠分為:生理鹽水組,裸磁珠組和免疫磁珠組,每周分別注射生理鹽水,750nm裸磁珠溶液和偶聯(lián)NJ001的750nm免疫磁珠溶液,于注射前和注射后4h進行micro-CT掃描.利用免疫組織化學驗證**組織中NJ001特異性抗原SP70的表達.結(jié)果:免疫磁珠組在第4周即可檢測到**,而生理鹽水組和裸磁珠組均到第6周才能檢測到.第6周生理鹽水組,裸磁珠組和免疫磁珠組micro-CT掃描**的灰度值分別為注射前的59.05±0.66,60.69±0.55和58.25±0.32,注射后的60.30±1.83,61.05±0.68和67.41±3.82.與注射前相比,免疫磁珠組注射后的灰度值***增加,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.0079).生理鹽水組和裸磁珠組注射后的灰度值與注射前相比差異均無統(tǒng)計學意義(均P0.05).結(jié)論:偶聯(lián)單抗NJ001的免疫磁珠對肺腺*裸鼠模型micro-CT掃描有增強作用,并且有望用于肺*的早期診斷.廣東anti-HA COIP免疫磁珠銷售上海普平生物科技有限公司銷售免疫磁珠價格低廉。
微小免疫磁珠分離提純SD胎鼠大腦皮層組織中的神經(jīng)干細胞并進行培養(yǎng),為研究神經(jīng)干細胞的特性與神經(jīng)干細胞的培養(yǎng)和移植研究創(chuàng)造有利條件.方法取SD胎鼠的大腦皮層組織制成單細胞懸液,用微小磁珠(平均直徑≤50nm)分選出神經(jīng)巢蛋白(nestin)陽性的細胞群,以流式細胞術(shù)檢測陽性細胞純度,以臺盼藍染色法檢測細胞活性.結(jié)果分離的神經(jīng)干細胞流式細胞儀檢測細胞nestin陽性表達率為(88.5±3.6)%,細胞存活率為(96.3±1.8)%.結(jié)論微小免疫磁珠法分離胎鼠腦神經(jīng)干細胞群落簡便,有效,可以為神經(jīng)干細胞的細胞培養(yǎng)和移植提供細胞來源.
用多聚抗原肽(multipleantigenpeptides,MAP)包被磁珠制備單表位抗體的方法.方法:通過Fmoc法固相化學合成UreB的8分支單表位MAP,將其作為免疫原免疫小鼠,獲得多克隆抗血清.將MAP以共價偶聯(lián)的方式包被磁珠制備免疫磁珠(immunomagneticbeads,IB),通過IB從多克隆抗血清中純化單表位抗體,熒光偏振(fluorescencepolarization,FP)法鑒定抗體的特異性,SDS-PAGE鑒定抗體純度,紫外分光光度法測定其回收率.結(jié)果:合成的MAP具有較強的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗體滴度高達1∶12800.MAP制備免疫磁珠的比較好包被濃度為100mg/L,包被效率比較高可達79%.應用MAP免疫磁珠從抗血清中純化得到的單表位抗體,經(jīng)鑒定與其他抗原表位無反應性,其純度為95%,抗體的回收率為5.8%.結(jié)論:MAP包被的磁珠可快速分離純化出針對某一抗原表位的特異性抗體,其性質(zhì)類似單克隆抗體.這一方案在快速制備少量高特異性抗體中具有廣闊的應用前景.免疫磁珠的主要特點有很多。
BEENbio鏈霉親和素磁珠本產(chǎn)品是由磁性納米顆粒與高純度的鏈霉親和素共價偶聯(lián)而成。這種微球能用于捕獲生物素標記的底物,如抗原、抗體和核酸等。鏈霉親和素(streptavidin)與生物素(biotin)的結(jié)合是***的非共價生物交互作用之一,因此,這也是親和層析法所使用的一種強大工具。生物分子可以與生物素輕松融合,而層析基質(zhì)上固定的鏈霉親和素配體可以與之結(jié)合,而且這種鏈霉親和素-生物素相互作用具有較低的非特異親和性,捕獲所需的底物能夠直接應用于后續(xù)實驗。本產(chǎn)品可廣泛應用于免疫學檢測、核酸純化、核酸固相雜交檢測、細胞分選等分子生物學實驗。使用免疫磁珠的好處您了解多少呢?黑龍江anti-HA COIP免疫磁珠哪家好
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免疫共沉淀(COIP)實驗過程(1)轉(zhuǎn)染后24-48h可收獲細胞,加入適量細胞裂解緩沖液(含蛋白酶抑制劑),冰上裂解30min,細胞裂解液于4°C,最大轉(zhuǎn)速離心30min后取上清;(2)取少量裂解液以備Westernblot分析,剩余裂解液加1μg相應的抗體加入到細胞裂解液,4°C緩慢搖晃孵育過夜;(3)取10μlproteinA瓊脂糖珠,用適量裂解緩沖液洗3次,每次3,000rpm離心3min;(4)將預處理過的10μlproteinA瓊脂糖珠加入到和抗體孵育過夜的細胞裂解液中4°C緩慢搖晃孵育2-4h,使抗體與proteinA瓊脂糖珠耦聯(lián);(5)免疫沉淀反應后,在4°C以3,000rpm速度離心3min,將瓊脂糖珠離心至管底;將上清小心吸去,瓊脂糖珠用1ml裂解緩沖液洗3-4次;***加入15μl的2×SDS上樣緩沖液,沸水煮5分鐘;(6)SDS-PAGE,Westernblotting或質(zhì)譜儀分析。注意的問題:(1)細胞裂解采用溫和的裂解條件,不能破壞細胞內(nèi)存在的所有蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用,多采用非離子變性劑(NP40或TritonX-100)。每種細胞的裂解條件是不一樣的,通過經(jīng)驗確定。不能用高濃度的變性劑(0.2%SDS),細胞裂解液中要加各種酶抑制劑,如商品化的cocktailer。(2)使用明確的抗體,可以將幾種抗體共同使用。(3)使用對照抗體:安徽protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
上海普平生物科技有限公司是一家上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司從事生物科技領域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓;實驗室設備、化工原料及產(chǎn)品的銷售;計算機軟件開發(fā);計算機網(wǎng)絡工程;從事貨物及技術(shù)進出口業(yè)務。 的公司,致力于發(fā)展為創(chuàng)新務實、誠實可信的企業(yè)。普平生物擁有一支經(jīng)驗豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團隊,以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供科研試劑、耗材、儀器,納米脂質(zhì)體,細胞、分子、蛋白實驗,科研項目。普平生物繼續(xù)堅定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,既要實現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長,又要聚焦關(guān)鍵領域,實現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。普平生物始終關(guān)注化工市場,以敏銳的市場洞察力,實現(xiàn)與客戶的成長共贏。