免疫磁珠法原代分離純化大鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞,并確定其免疫組化特征.方法免疫磁珠法結(jié)合傳統(tǒng)的膠原酶消化及篩網(wǎng)過濾法分離出大鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞,采用含有20%胎牛血清的DMEM培養(yǎng).通過周細(xì)胞的形態(tài)和生長方式初步鑒別,再進(jìn)行細(xì)胞α-SMA,vWF,GFAP抗體免疫組織化學(xué)特征鑒定,及激光共聚焦顯微鏡行周細(xì)胞PDGFR-β和desmin抗體熒光雙標(biāo)觀察.周細(xì)胞生長曲線通過MTT法測定.結(jié)果本法獲得的周細(xì)胞純度可達(dá)98%,并能連續(xù)傳代.原代周細(xì)胞約2～3周融合,傳代后生長和融合速度加快,細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,胞內(nèi)可見絲狀結(jié)構(gòu),無接觸性抑制.免疫組化證實(shí)周細(xì)胞胞漿內(nèi)α-SMA蛋白表達(dá)陽性,內(nèi)皮細(xì)胞特異性vWF因子表達(dá)陰性,膠質(zhì)細(xì)胞特異性GFAP表達(dá)陰性.激光共聚焦顯示周細(xì)胞PDGFR-β和desmin抗原表達(dá)均為陽性.結(jié)論本研究***報(bào)道應(yīng)用免疫磁珠法分離培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞.獲得高度純化的周細(xì)胞具有明確的免疫組化特征,可用于相關(guān)視網(wǎng)膜血管性疾病的進(jìn)一步研究.一個(gè)好的免疫磁珠需要具備哪些特點(diǎn)您知道嗎？廣東anti-HA COIP免疫磁珠銷售

免疫磁珠細(xì)胞分選方法可以在幾分鐘內(nèi)從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中分離出很高純度的細(xì)胞。把細(xì)胞用超級順磁性的免疫磁珠特異性地標(biāo)記，磁性標(biāo)記完后，把這些細(xì)胞通過一個(gè)放在強(qiáng)而穩(wěn)定磁場中的分選柱。分選柱里的基質(zhì)造成一個(gè)高梯度磁場。被磁性標(biāo)記的細(xì)胞滯留在柱里而未被標(biāo)記的細(xì)胞則流出。當(dāng)分選柱移出磁場后，滯留柱內(nèi)的磁性標(biāo)記細(xì)胞就可以被洗脫出來，這樣就完全可以獲得標(biāo)記和未標(biāo)記的兩個(gè)細(xì)胞組份。超順磁性的磁珠的體積很小，其直徑約為50nm，體積約小于真核細(xì)胞的一百萬份之一，可與病毒的大小相比。標(biāo)記細(xì)胞上的微型磁珠即使在掃描電鏡照片上也幾乎看不到。磁性抗體和磁性標(biāo)記物間的反應(yīng)可在幾分鐘內(nèi)完成。由于微型磁珠的體積極小，所以不會對細(xì)胞造成機(jī)械性壓力，而且使孵育時(shí)間短，操作過程快。免疫磁珠形成一個(gè)穩(wěn)定的膠體液，它們在磁場中既不沉淀又不凝聚。微型磁珠的大小和它的組成成份（氧化鐵和多糖）使其可被生物降解，且不會***細(xì)胞或影響細(xì)胞的功能和活力，細(xì)胞的生理功能也不變。磁珠不需要去除，因此，陽性分選出的細(xì)胞（即磁性標(biāo)記細(xì)胞）可立即用于分析和隨后的實(shí)驗(yàn)。北京蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠供應(yīng)商上海普平生物科技有限公司銷售的免疫磁珠質(zhì)量怎么樣？

探討小鼠脾臟CD8+T細(xì)胞的免疫磁珠負(fù)性分選方法,并對分選后所得細(xì)胞進(jìn)行純度、活力及功能檢測.方法以免疫磁珠負(fù)性分選法從小鼠脾臟細(xì)胞中分離CD8+T細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)檢測所得細(xì)胞的純度,臺盼藍(lán)檢測細(xì)胞活力并用ConA刺激檢測增殖能力.結(jié)果經(jīng)過流式細(xì)胞儀測定免疫磁珠負(fù)性分選后的小鼠脾臟CD8+T細(xì)胞純度達(dá)到(91.6±3.6)%,臺盼蘭染色細(xì)胞活力為(94.9±3.2)%,ConA刺激72h后有(56.3±1.7)%的細(xì)胞增殖.結(jié)論免疫磁珠負(fù)性分選法能夠分選出高純度的CD8+T細(xì)胞,并且不影響分選靶細(xì)胞的細(xì)胞活力和功能.

免疫磁珠分離法分選弓形蟲速殖子,以去除宿主細(xì)胞成分,并 盡可能對蟲體的生物學(xué)特性無不良影響,為弓形蟲的基礎(chǔ)與臨床研究提供技術(shù)基礎(chǔ).方法采用弓形蟲Wh3株( China 1基因型)速殖子***小鼠,提取腹腔液,常規(guī)方法制備速殖子可溶性抗原,免疫家兔,獲得兔抗弓形蟲多克隆IgG抗體.用抗體包被的免疫磁珠對小鼠腹腔液內(nèi) 弓形蟲速殖子進(jìn)行純化,比較其純度,回收率,蟲體活力,毒力與***性.結(jié)果用免疫磁珠分離技術(shù)純化弓形蟲速殖子后,其純度提高到98.2%,細(xì)胞***率為 96%,蟲體回收率為73.5%;用內(nèi)鹽法( MTS )細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒檢測分離后的速殖子活性為95.6%.定量分組***小鼠后死亡時(shí)間無***性差異.結(jié)論免疫磁珠分離的速殖子純度,細(xì)胞***率和 蟲體回收率較高,能有效去除宿主細(xì)胞,且對速殖子的活性和毒力無影響.該法操作簡便快速,無需昂貴的儀器設(shè)備,具有較大的實(shí)用價(jià)值.上海普平生物科技有限公司銷售的免疫磁珠質(zhì)量很好。

精原干細(xì)胞(spermatogonialstemcells,SSCs)富集純化是利用SSCs進(jìn)行基因修飾新方法等研究的前提基礎(chǔ)。采用免疫磁珠分選法,使用干細(xì)胞抗體CD90.2進(jìn)行小鼠SSCs的純化富集,并采用流式細(xì)胞分析法和定量PCR驗(yàn)證了磁珠分選效率。流式細(xì)胞分析結(jié)果:免疫磁珠分選后SSCs純度為50.11%。熒光定量PCR檢測結(jié)果:磁珠分選后支持細(xì)胞特異表達(dá)基因GATA4***下調(diào)(6倍)、SSCs表達(dá)基因GFRα-1上調(diào)(6.5倍)、生殖干細(xì)胞特異表達(dá)基因OCT4極***上調(diào)(5.9倍),3個(gè)基因相對表達(dá)量的變化說明,免疫磁珠分選效率為6倍。流式細(xì)胞分析法所產(chǎn)生的偏差可能是受到了未解離磁珠及SSCs本身轉(zhuǎn)基因熒光的影響。上海普平生物科技有限公司免疫磁珠的售后服務(wù)很好。遼寧anti-HA COIP免疫磁珠性能

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免疫磁性細(xì)胞分選系統(tǒng)分離純化骨髓衍生肝干細(xì)胞亞群c-Kit^+lin^-。方法:實(shí)驗(yàn)于2006—07/08在南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心完成。6~8周齡的SPF級純系BALB,C雄性小鼠10只,體質(zhì)量18~20g。收集小鼠股骨骨髓細(xì)胞,利用免疫磁性細(xì)胞分選系統(tǒng),通過兩步法分選純化c-Kit^+lin^-:將獲取的lin^-細(xì)胞懸液8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按80μL/10^7加入Buffer重懸細(xì)胞。按20μL/10^7加生物素抗體磁珠,混勻,4℃冰箱孵育15min,按1 mL/10^7加入Buffer洗細(xì)胞1次,8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按500μL/10^8加入Buffer重懸細(xì)胞。Buffer 500μL潤MS柱,懸液過柱后,Buffer 500μL/次洗柱3次,柱子脫離磁場,加1mL Buffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit^+lin^-細(xì)胞,收集到c-kit^+lin-細(xì)胞,細(xì)胞計(jì)數(shù)。取2.0x108個(gè)細(xì)胞分成10等份,流式細(xì)胞儀分析c-Kit^+lin^-細(xì)胞純度,計(jì)算回收率,評估純化效率,苔盼蘭染色檢測純化前后的細(xì)胞活力。計(jì)算活細(xì)胞的百分率。細(xì)胞純度和細(xì)胞回收率的計(jì)算:細(xì)胞純度:分離產(chǎn)物中的陽性細(xì)胞數(shù),分離細(xì)胞的總細(xì)胞數(shù)×100%,細(xì)胞回收率:分離產(chǎn)物中的陽性細(xì)胞數(shù),起始標(biāo)本陽性細(xì)胞總數(shù)×100%。廣東anti-HA COIP免疫磁珠銷售

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