從臍血中分離,培養(yǎng)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞,研究內(nèi)皮祖細(xì)胞的生長特性和誘導(dǎo)分化條件.方法:應(yīng)用MACS磁球抗體標(biāo)記法純化臍血中的CD133+細(xì)胞,通過流式細(xì)胞儀,免疫細(xì)胞化學(xué),免疫熒光等技術(shù)及形態(tài)學(xué)(光鏡,電鏡)觀察研究內(nèi)皮祖細(xì)胞;將細(xì)胞接種于添加(或未添加)VEGF,bFGF,干細(xì)胞因子(SCF)的含20%胎牛血清(FBS)的IMDM培養(yǎng)基中,觀察內(nèi)皮祖細(xì)胞的生長特性.結(jié)果:分離新鮮臍血所得CD133陽性細(xì)胞占單個(gè)核細(xì)胞的(1.41±1.14)%,經(jīng)流式細(xì)胞儀鑒定CD133+細(xì)胞純度為75%-85%;將分離細(xì)胞接種于纖維連接蛋白包被的24孔板內(nèi),培養(yǎng)1-2h即有細(xì)胞貼壁,7-10d可見貼壁細(xì)胞呈鋪路石樣排列;14d后細(xì)胞出現(xiàn)小圓形,梭形等多樣性變化,可見***管腔樣結(jié)構(gòu),電鏡觀察可見胞漿內(nèi)典型的Weibel-Palade小體;在VEGF,bFGF,SCF存在條件下,檢測貼壁細(xì)胞培養(yǎng)14d后細(xì)胞表面抗原表達(dá)情況:與培養(yǎng)開始時(shí)相比,祖細(xì)胞標(biāo)志CD133和CD34陽性率呈明顯下降趨勢,分別由(77.0±3.3)%和(93.1±4.7)%降至(1.6±2.2)%和(37.4±4.9)%,P<0.05,內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)志Flk-1表達(dá)明顯增加,由(22.3±3.3)%增至(94.3±4.1)%,P<0.05,同時(shí)vWF抗原呈強(qiáng)陽性表達(dá),陽性率為(77.9±3.3)%.用免疫磁珠法檢測抗白念珠*烯醇化酶抗體。遼寧anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠供應(yīng)商

戊二醛兩步交聯(lián)法將辣根過氧化物酶(HRP)結(jié)合于甲胎蛋白 (AFP)抗體上制成酶標(biāo)AFP抗體,質(zhì)量鑒定結(jié)果表明其比活性為200 U/mg,抗體效價(jià)為1: 256,滿足酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)要求;通過滴定法確定酶標(biāo)AFP抗體的**適工作稀釋度為V(酶標(biāo)抗體): V(磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液)=1: 160;血清用量及孵育時(shí)間的影響實(shí)驗(yàn)表明:血清100 μL,孵育時(shí)間2 h為比較好測定條件.建立了肝*患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的規(guī)范化檢測程序.初步應(yīng)用實(shí)驗(yàn)顯示:免疫磁珠ELISA法測定受試健康組血清AFP值 平均為3.9 ng/mL,肝*組血清AFP值平均為316.7 ng/mL,對(duì)肝*診斷陽性率為72.0%.批內(nèi)及批間CV值分別為5.05%和8.20%.該項(xiàng)技術(shù)有較高的靈敏度和很好的特異性,操作簡便,分離快 速,適用于肝*的初期快速診斷.陜西anti-Flag COIP免疫磁珠性能免疫磁珠分選兔前軟骨干細(xì)胞及細(xì)胞研究平臺(tái)的建立。

免疫磁珠法分選人骨髓多能成體祖細(xì)胞,觀察其分選效果,建立體外分選純化及培養(yǎng)人骨髓來源多能成體祖細(xì)胞(hMAPCs)的方法.方法:取健康成人志愿者適量骨髓后采用梯度密度離心法分離獲取單個(gè)核細(xì)胞,在自制培養(yǎng)基下貼壁培養(yǎng)后,將獲取的骨髓貼壁細(xì)胞通過CD45,血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)負(fù)分選,錐蟲藍(lán)拒染實(shí)驗(yàn)計(jì)數(shù)MACS分選前后細(xì)胞活力.流式細(xì)胞儀鑒定分選后細(xì)胞純度;流式細(xì)胞儀分析培養(yǎng)細(xì)胞CD29,CD44,CD34和HLA-DR表達(dá)情況.結(jié)果:通過MACS分選,平均每1×106/ml骨髓貼壁細(xì)胞可分選出約(5~10)×104/mlhMAPCs,分選后的hMAPCs細(xì)胞生長良好,**長傳代到第20代.分選前后細(xì)胞活力分別為(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,無明顯差異;流式細(xì)胞儀分析獲取的CD45-,GlyA-細(xì)胞純度大于98%;流式細(xì)胞儀檢測hMAPCs中CD29陽性表達(dá)細(xì)胞比率為99.2%,CD44陽性細(xì)胞比率為98.3%,CD34陽性細(xì)胞比率為1.2%,HLA-DR陽性細(xì)胞比率為5.3%.結(jié)論:CD45,GlyA免疫微磁珠負(fù)分選可從骨髓中分離高純度的hMAPCs;分選后hMAPCs在自行研制的培養(yǎng)基中有較強(qiáng)的增殖能力.

微小免疫磁珠分離提純SD胎鼠大腦皮層組織中的神經(jīng)干細(xì)胞并進(jìn)行培養(yǎng),為研究神經(jīng)干細(xì)胞的特性與神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)和移植研究創(chuàng)造有利條件.方法取SD胎鼠的大腦皮層組織制成單細(xì)胞懸液,用微小磁珠(平均直徑≤50nm)分選出神經(jīng)巢蛋白(nestin)陽性的細(xì)胞群,以流式細(xì)胞術(shù)檢測陽性細(xì)胞純度,以臺(tái)盼藍(lán)染色法檢測細(xì)胞活性.結(jié)果分離的神經(jīng)干細(xì)胞流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞nestin陽性表達(dá)率為(88.5±3.6)%,細(xì)胞存活率為(96.3±1.8)%.結(jié)論微小免疫磁珠法分離胎鼠腦神經(jīng)干細(xì)胞群落簡便,有效,可以為神經(jīng)干細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)和移植提供細(xì)胞來源.多聚抗原肽免疫磁珠在制備單表位抗體中的應(yīng)用。

免疫磁珠法(MiniMACS)在分離純化外周血CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞亞群中的應(yīng)用.方法:應(yīng)用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheralbloodmononucleatecells,PBMC),采用MiniMACS分別分離和純化39例標(biāo)本外周血PBMC中的CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞,并經(jīng)流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞純度和臺(tái)盼藍(lán)染色的方法對(duì)細(xì)胞活力進(jìn)行評(píng)估.結(jié)果:MiniMACS分離外周血CD4+T淋巴細(xì)胞前,后細(xì)胞純度分別為(37.38±5.74)%,(97.75±1.03)%(P〈0.001),CD8+T淋巴細(xì)胞分離純化前后細(xì)胞純度分別為(20.11±6.83)%,(96.85±1.86)%(P〈0.001);外周血分離前PBMC細(xì)胞活力為(97.66±2.73)%,純化為CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞后細(xì)胞活力分別為(97.44±3.08)%,(98.05±2.92)%(P〉0.05).結(jié)論:MiniMACS可以高度富集CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞且不改變細(xì)胞的活力.BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。天津蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門

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建立有效的人類神經(jīng)干細(xì)胞分離純化系統(tǒng)和方法.方法:無菌取孕24周流產(chǎn)胎兒的室下區(qū)腦組織,制備細(xì)胞懸液,用磁性微珠標(biāo)記的CD133單克隆抗體與細(xì)胞孵育,通過磁分選器分離出CD133(+)和CD133(-)細(xì)胞,通過體外培養(yǎng)并誘導(dǎo)分化,觀察CD133陽性細(xì)胞和陰性細(xì)胞的增殖情況及分化能力.結(jié)果:經(jīng)免疫磁珠分選的室下區(qū)腦組織中,CD133(+)細(xì)胞占胚胎腦組織細(xì)胞的2%左右,該細(xì)胞體外擴(kuò)增能力強(qiáng),細(xì)胞呈球形生長,并易聚集成團(tuán),培養(yǎng)5d,10d,15d,20d進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞增長率分別為1.79%,4.82%,7.21%,14.66%,誘導(dǎo)分化后的細(xì)胞經(jīng)染色鑒定可分化為神經(jīng)元,神經(jīng)膠質(zhì)等多種神經(jīng)細(xì)胞,陰性細(xì)胞擴(kuò)增能力弱,活細(xì)胞計(jì)數(shù)以死細(xì)胞數(shù)量居多,大約705,另外一些細(xì)胞貼壁分化.結(jié)論:免疫磁珠法簡便,有效,經(jīng)免疫磁珠分離的神經(jīng)干細(xì)胞在體外能進(jìn)一步培養(yǎng)擴(kuò)增并分化.遼寧anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠供應(yīng)商

上海普平生物科技有限公司位于高逸路112-118號(hào)3幢5286室。普平生物致力于為客戶提供良好的科研試劑、耗材、儀器，納米脂質(zhì)體，細(xì)胞、分子、蛋白實(shí)驗(yàn)，科研項(xiàng)目，一切以用戶需求為中心，深受廣大客戶的歡迎。公司注重以質(zhì)量為中心，以服務(wù)為理念，秉持誠信為本的理念，打造化工良好品牌。普平生物立足于全國市場，依托強(qiáng)大的研發(fā)實(shí)力，融合前沿的技術(shù)理念，飛快響應(yīng)客戶的變化需求。