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湖北蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠性能

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-03-29

CoIP :實(shí)驗(yàn)原理一切從 CoIP 的原理談起:免疫共沉淀是一種以抗體和抗原識(shí)別專一性為基礎(chǔ),用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。實(shí)驗(yàn)步驟第一步:樣品制備首先進(jìn)行樣品制備,以提取出想要研究的蛋白,由于不同類型的細(xì)胞裂解條件有所差異,這里不展開(kāi)介紹。注意事項(xiàng):細(xì)胞裂解要采用溫和的裂解條件,避免破壞細(xì)胞內(nèi)存在的蛋白間相互作用,裂解、洗滌時(shí)需使用非變性裂解液,如 NP-40 和 Triton X-100。此外,由于不同細(xì)胞裂解條件不一樣,建議通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定比較好條件。第二步:固定抗體在共沉淀之前,先將固相基質(zhì)與抗體共同孵育,從而使兩者結(jié)合,常用的固相基質(zhì)有瓊脂糖 Agarose 和磁珠 Magnetic beads。瓊脂糖 Agarose 具有簡(jiǎn)單易用,直徑大,結(jié)合力強(qiáng),多孔易吸附的特點(diǎn);磁珠具有直徑小,背景低,抗體消耗少的特點(diǎn),但操作時(shí)需借助磁力架。注意事項(xiàng):抗體的選擇十分重要,選經(jīng)過(guò) IP 驗(yàn)證的抗體,可以減少假陽(yáng)性概率。同時(shí),要注意抗體/緩沖液的比例,抗體稀釋過(guò)度不利于后續(xù)抗原抗體結(jié)合;而抗體過(guò)多就不能完全沉降在固相基質(zhì)上,殘存于上清。操作時(shí),為了避免損傷 beads,使用大口徑或截短***頭進(jìn)行加樣。免疫磁珠純化人呼吸道合胞病毒F蛋白方法的建立。湖北蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠性能

磁珠與抗體偶聯(lián)的比較好條件,制備抗單增李斯特菌免疫磁珠;將免疫磁珠與顯色培養(yǎng)法結(jié)合,初步建立起利用免疫磁珠分離技術(shù)對(duì)單增李斯特菌進(jìn)行分離鑒定的檢測(cè)方法.從而為食品中單增李斯特菌的檢測(cè)提供一種快速,高效和靈敏的檢測(cè)新方法.方法:以單增李斯特菌體作為免疫抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔抗單增李斯特菌多克隆抗體,鑒定多抗活性以及與單增李斯特菌體的結(jié)合能力;用激光粒度儀和透射電鏡分析不同活性基團(tuán)修飾磁珠的粒徑大小和分散性,選擇性質(zhì)穩(wěn)定的磁珠用以制備免疫磁珠;設(shè)計(jì)正交試驗(yàn),摸索pH,溫度,時(shí)間對(duì)氨基修飾磁珠與多抗偶聯(lián)的影響,選擇比較好條件制備免疫磁珠并用于捕獲單增李斯特菌;設(shè)計(jì)不同的偶聯(lián)緩沖溶液,偶聯(lián)時(shí)間,偶聯(lián)溫度,通過(guò)比較羧基修飾磁珠與抗體偶聯(lián)后上清中剩余的抗體量來(lái)確定比較好偶聯(lián)條件,運(yùn)用制備的免疫磁珠對(duì)樣品中的單增李斯特菌進(jìn)行捕獲,并與顯色平板結(jié)合試驗(yàn),鑒定制備的免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.江蘇anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠供應(yīng)商上海普平生物科技有限公司就帶您了解一下免疫磁珠的特點(diǎn)。

建立有效的人類神經(jīng)干細(xì)胞分離純化系統(tǒng)和方法.方法:無(wú)菌取孕24周流產(chǎn)胎兒的室下區(qū)腦組織,制備細(xì)胞懸液,用磁性微珠標(biāo)記的CD133單克隆抗體與細(xì)胞孵育,通過(guò)磁分選器分離出CD133(+)和CD133(-)細(xì)胞,通過(guò)體外培養(yǎng)并誘導(dǎo)分化,觀察CD133陽(yáng)性細(xì)胞和陰性細(xì)胞的增殖情況及分化能力.結(jié)果:經(jīng)免疫磁珠分選的室下區(qū)腦組織中,CD133(+)細(xì)胞占胚胎腦組織細(xì)胞的2%左右,該細(xì)胞體外擴(kuò)增能力強(qiáng),細(xì)胞呈球形生長(zhǎng),并易聚集成團(tuán),培養(yǎng)5d,10d,15d,20d進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞增長(zhǎng)率分別為1.79%,4.82%,7.21%,14.66%,誘導(dǎo)分化后的細(xì)胞經(jīng)染色鑒定可分化為神經(jīng)元,神經(jīng)膠質(zhì)等多種神經(jīng)細(xì)胞,陰性細(xì)胞擴(kuò)增能力弱,活細(xì)胞計(jì)數(shù)以死細(xì)胞數(shù)量居多,大約705,另外一些細(xì)胞貼壁分化.結(jié)論:免疫磁珠法簡(jiǎn)便,有效,經(jīng)免疫磁珠分離的神經(jīng)干細(xì)胞在體外能進(jìn)一步培養(yǎng)擴(kuò)增并分化.

檢測(cè)EPCAM、MUC16兩種抗原在上皮性卵巢*循環(huán)腫瘤細(xì)胞中表達(dá)的相關(guān)性。方法分別用羧基磁珠制備EPCAM、MUC16兩種免疫磁珠,分3組:EPCAM免疫磁珠檢測(cè)組、MUC16免疫磁珠檢測(cè)組、2種磁珠均等混合檢測(cè)組。對(duì)來(lái)源于同一患者的等體積外周血樣本進(jìn)行循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè),HE染色后鑒定檢測(cè)值。結(jié)果EPCAM免疫磁珠、MUC16免疫磁珠、EPCAM+MUC16免疫磁珠對(duì)同體積、同來(lái)源樣本檢測(cè)值分別為22±11、14±6、28±12個(gè)腫瘤細(xì)胞(P0.05),說(shuō)明檢測(cè)效率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論MUC16與EPCAM在上皮性卵巢*循環(huán)腫瘤細(xì)胞中**表達(dá)且存在差異,因此增加MUC16這一***標(biāo)志物可有效提高上皮性卵巢*CTCs檢出數(shù)量。BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠全國(guó)招商代理。

一種免疫磁珠及制作方法和用于檢測(cè)的方法及測(cè)試板,所述的免疫磁珠至少由磁性載體微球組成,該磁性載體微球結(jié)合有至少一種免疫配基;所述的磁性載體微球由磁性納米粒和高分子骨架材料組成,其**為金屬小顆粒,**外為高分子材料,**外層為帶有各種可以結(jié)合不同免疫配基功能基因的功能層;免疫磁珠的制作方法包括:磁珠預(yù)處理;活化磁珠;偶聯(lián)抗體的制作;對(duì)偶聯(lián)抗體用封閉液封閉;免疫磁珠純化等;用于檢測(cè)的方法是:利用免疫學(xué)反應(yīng)夾心法,競(jìng)爭(zhēng)法以及間接法檢測(cè)不同物質(zhì)的存在,并在測(cè)試板上設(shè)置對(duì)照體系:測(cè)試板由包被試紙條,偶聯(lián)墊,樣品墊,吸水墊,覆蓋膜以及測(cè)試板外卡組成,它具有靈敏度高,定量準(zhǔn)確,不受光學(xué)因素干擾,磁信號(hào)穩(wěn)定,不易衰減,試劑簡(jiǎn)單,穩(wěn)定,低廉,檢測(cè)快速,適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)等特點(diǎn).上海普平生物科技有限公司銷售的免疫磁珠質(zhì)量上乘。黑龍江anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠供應(yīng)商

應(yīng)用免疫磁珠分離法純化弓形蟲(chóng)速殖子的研究。湖北蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠性能

Protein A/G COIP & CHIP 磁珠

產(chǎn)品價(jià)格       

產(chǎn)品貨號(hào)
規(guī)格
價(jià)格
BEENbio-PR001-0.4
0.4 mL
455 RMB
BEENbio-PR001-1
mL
654 RMB
BEENbio-PR001-5
5ml
2616 RMB


產(chǎn)品描述

BEENbio Protein A/G Co-IP & CHIP磁珠在大小為2um的納米磁珠上供價(jià)結(jié)合了大量的Protein A/G蛋白,與傳統(tǒng)的Protein A/G 免疫共沉淀瓊脂糖凝膠比較,抗體結(jié)合能力相同,背景更低的特點(diǎn),由于采用磁性分離,使得每次Co-IP 和 CHIP可以節(jié)省40%的時(shí)間。


產(chǎn)品特性

項(xiàng)目
特性
磁珠大小
1 μm
磁珠濃度
10 mg/mL
IgG 結(jié)合量
0.5 mg/mL
適用范圍
CoIP,CHIP
穩(wěn)定性
pH 6-8, 4長(zhǎng)期穩(wěn)定
適用抗體種屬
廣譜抗體種屬
儲(chǔ)存條件
4oC,避光


儲(chǔ)存條件

pH 6-8, 4oC長(zhǎng)期穩(wěn)定,禁止產(chǎn)品凍結(jié)。


湖北蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠性能

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標(biāo)簽: 免疫磁珠