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同濟(jì)生物首腦銀杏膠囊研發(fā)人吳健博士再獲新身份認(rèn)證!
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戊二醛兩步交聯(lián)法將辣根過氧化物酶(HRP)結(jié)合于甲胎蛋白 (AFP)抗體上制成酶標(biāo)AFP抗體,質(zhì)量鑒定結(jié)果表明其比活性為200 U/mg,抗體效價(jià)為1: 256,滿足酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)要求;通過滴定法確定酶標(biāo)AFP抗體的**適工作稀釋度為V(酶標(biāo)抗體): V(磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液)=1: 160;血清用量及孵育時(shí)間的影響實(shí)驗(yàn)表明:血清100 μL,孵育時(shí)間2 h為比較好測(cè)定條件.建立了肝*患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的規(guī)范化檢測(cè)程序.初步應(yīng)用實(shí)驗(yàn)顯示:免疫磁珠ELISA法測(cè)定受試健康組血清AFP值 平均為3.9 ng/mL,肝*組血清AFP值平均為316.7 ng/mL,對(duì)肝*診斷陽(yáng)性率為72.0%.批內(nèi)及批間CV值分別為5.05%和8.20%.該項(xiàng)技術(shù)有較高的靈敏度和很好的特異性,操作簡(jiǎn)便,分離快 速,適用于肝*的初期快速診斷.BEENbio Anti Flag Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。河南COIP免疫磁珠銷售
常見問題及對(duì)策
3: 如何避免磁珠在儲(chǔ)存或使用過程中可能出現(xiàn)的聚集情況?
磁珠應(yīng)保存在2~8℃,使用時(shí)應(yīng)避免由于污染而導(dǎo)致的不可逆聚 集,或因干燥而導(dǎo)致的聚集。磁珠在低pH的洗脫緩沖液中發(fā)生聚集屬 于正?,F(xiàn)象,不影響磁珠的正常使用。在Binding buffer和Elution buffer中添加終濃度為0.1%(v/v)的非離子型去垢劑(如NP-40、 Tween-20 或 Triton X-100)可有效防止磁珠聚集。經(jīng)過低pH洗脫操 作的磁珠可以用結(jié)合緩沖液洗滌至中性,然后用含有0.1% (v/v)Tween-20的Tris buffer(pH7.5)振蕩重懸磁珠,并用超聲波水浴 處理2min,即可使磁珠恢復(fù)均勻狀態(tài),以上處理均不影響磁珠的抗體 結(jié)合效率。
4: 如何解決磁珠易粘附管壁的現(xiàn)象?
建議使用低吸附率的耗材進(jìn)行磁珠操作。另外,在緩沖液中添加 0.01%~0.1%(v/v)的非離子型去垢劑(如NP-40、Tween-20或 Triton X-100)可以有效降低磁珠對(duì)耗材的粘附。
北京蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠供應(yīng)商用免疫磁珠法檢測(cè)抗白念珠*烯醇化酶抗體。
從白血病KG1a細(xì)胞中分選CD34+CD38-干細(xì)胞并研究其生物學(xué)特性.方法免疫磁珠法分選CD34+CD38-細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞表面膜抗原,細(xì)胞周期,甲基纖維素培養(yǎng)體系觀察其克隆性;以HL60,K562,CD34+CD38+細(xì)胞為對(duì)照,甲基偶氮唑藍(lán)法檢測(cè)柔紅霉素對(duì)CD34+CD38-細(xì)胞的抑制作用;BALB/c裸鼠皮下接種,觀察體內(nèi)成瘤能力.結(jié)果分選的CD34+CD38-細(xì)胞純度達(dá)95%以上,(69.03±3.25)%處于G0期,克隆形成率為(38.64±2.68)%,明顯抵抗柔紅霉素;不同濃度柔紅霉素作用后,CD34+CD38-,CD34+CD38+,HL60,K562細(xì)胞的活性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=961.136,P=0.000);CD34+CD38-在裸鼠皮下成瘤率***高于CD34+CD38+細(xì)胞(P〈0.05).結(jié)論免疫磁珠法分選白血病干細(xì)胞簡(jiǎn)單易行,分選的細(xì)胞符合白血病干細(xì)胞生物學(xué)特性.
骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在一定條件下可分化成為多種結(jié)締組織細(xì)胞,也可分化成神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞.目的:觀察采用免疫磁珠法分離成人骨髓來源神經(jīng)干細(xì)胞的生物學(xué)特征.設(shè)計(jì),時(shí)間及地點(diǎn):以患者自身骨髓組織為觀察對(duì)象的實(shí)驗(yàn),于2003-03/2007-06在菏澤市立醫(yī)院檢驗(yàn)科完成.材料:骨髓組織來自菏澤市立醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的中風(fēng),老年性癡呆,帕金森病,腦缺血等神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者.方法:利用免疫磁珠表面的特異性抗體與骨髓組織中神經(jīng)干細(xì)胞抗原相結(jié)合,在磁場(chǎng)作用下使結(jié)合磁珠與其他細(xì)胞分離,從而獲得神經(jīng)干細(xì)胞,再將所分離的純化神經(jīng)干細(xì)胞接種到含體積分?jǐn)?shù)為0.20胎牛血清的EaglesMEM培養(yǎng)液,再在培養(yǎng)基中加入堿性成纖維因子和表皮生長(zhǎng)因子進(jìn)行原代培養(yǎng).主要觀察指標(biāo):采用免疫組織化學(xué)染色與免疫熒光染色鑒定細(xì)胞,并采用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞DNA含量.結(jié)果:在相差顯微鏡下觀察培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)豐滿,胞核及核仁清晰可見,神經(jīng)突起粗大,網(wǎng)絡(luò)稠密.免疫組織化學(xué)和免疫熒光染色顯示,細(xì)胞神經(jīng)元特異性烯醇化酶,神經(jīng)蛋白,膠質(zhì)纖維酸性蛋白酶,微管相關(guān)蛋白為陽(yáng)性.傳代后的細(xì)胞用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定DNA含量為正常二倍體,無誘發(fā)突變.免疫磁珠純化人呼吸道合胞病毒F蛋白方法的建立。
免疫磁珠法分離,并培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的方法.方法將術(shù)中取得的腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本,通過剪切,消化和吹打成單細(xì)胞懸液,篩網(wǎng)過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133^+細(xì)胞,用神經(jīng)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)法培養(yǎng)出具有單細(xì)胞克隆能力的細(xì)胞球,取第3代進(jìn)行誘導(dǎo)分化,分化前后用免疫細(xì)胞熒光化學(xué)方法鑒定**干細(xì)胞及分化后細(xì)胞.結(jié)果免疫磁珠分選出的CD133^+細(xì)胞,可懸浮生長(zhǎng)并形成神經(jīng)干細(xì)胞樣細(xì)胞球,有較強(qiáng)的增殖能力,干細(xì)胞標(biāo)志物巢蛋白(nestin)陽(yáng)性,分化后細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)元小管相關(guān)蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質(zhì)細(xì)胞膠質(zhì)纖維酸性蛋白質(zhì)(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白,CD133^+陰性,并具有**的核型.結(jié)論免疫磁珠分選法可避免原代培養(yǎng)中眾多細(xì)胞混雜生長(zhǎng)的發(fā)生,能夠從大量腫瘤細(xì)胞中分離出只占極少比例的**干細(xì)胞,細(xì)胞結(jié)合磁珠后在體外可以長(zhǎng)期培養(yǎng)和傳代,進(jìn)一步證實(shí)了**干細(xì)胞的存在,并為膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的研究奠定基礎(chǔ).空腸彎曲菌免疫磁珠富集方法的建立。遼寧anti-HA COIP免疫磁珠性能
H9亞型禽流感病毒免疫磁珠分離方法初步建立。河南COIP免疫磁珠銷售
建立免疫磁珠法分離,并培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的方法.方法將術(shù)中取得的腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本,通過剪切、消化和吹打成單細(xì)胞懸液,篩網(wǎng)過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133+細(xì)胞,用神經(jīng)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)法培養(yǎng)出具有單細(xì)胞克隆能力的細(xì)胞球,取第3代進(jìn)行誘導(dǎo)分化,分化前后用免疫細(xì)胞熒光化學(xué)方法鑒定**干細(xì)胞及分化后細(xì)胞.結(jié)果免疫磁珠分選出的CD133-細(xì)胞,可懸浮生長(zhǎng)并形成神經(jīng)干細(xì)胞樣細(xì)胞球,有較強(qiáng)的增殖能力,干細(xì)胞標(biāo)志物巢蛋白(nestin)陽(yáng)性,分化后細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)元小管相關(guān)蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質(zhì)細(xì)胞膠質(zhì)纖維酸性蛋白質(zhì)(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白、CD133陰性,并具有**的核型.結(jié)論免疫磁珠分選法可避免原代培養(yǎng)中眾多細(xì)胞混雜牛長(zhǎng)的發(fā)生,能夠從大量腫瘤細(xì)胞中分離出只占極少比例的**干細(xì)胞,細(xì)胞結(jié)合磁珠后在體外可以長(zhǎng)期培養(yǎng)和傳代,進(jìn)一步證實(shí)了**干細(xì)胞的存在,并為膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的研究奠定基礎(chǔ).河南COIP免疫磁珠銷售
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