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磁珠與抗體偶聯(lián)的比較好條件,制備抗單增李斯特菌免疫磁珠;將免疫磁珠與顯色培養(yǎng)法結(jié)合,初步建立起利用免疫磁珠分離技術(shù)對(duì)單增李斯特菌進(jìn)行分離鑒定的檢測方法.從而為食品中單增李斯特菌的檢測提供一種快速,高效和靈敏的檢測新方法.方法:以單增李斯特菌體作為免疫抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔抗單增李斯特菌多克隆抗體,鑒定多抗活性以及與單增李斯特菌體的結(jié)合能力;用激光粒度儀和透射電鏡分析不同活性基團(tuán)修飾磁珠的粒徑大小和分散性,選擇性質(zhì)穩(wěn)定的磁珠用以制備免疫磁珠;設(shè)計(jì)正交試驗(yàn),摸索pH,溫度,時(shí)間對(duì)氨基修飾磁珠與多抗偶聯(lián)的影響,選擇比較好條件制備免疫磁珠并用于捕獲單增李斯特菌;設(shè)計(jì)不同的偶聯(lián)緩沖溶液,偶聯(lián)時(shí)間,偶聯(lián)溫度,通過比較羧基修飾磁珠與抗體偶聯(lián)后上清中剩余的抗體量來確定比較好偶聯(lián)條件,運(yùn)用制備的免疫磁珠對(duì)樣品中的單增李斯特菌進(jìn)行捕獲,并與顯色平板結(jié)合試驗(yàn),鑒定制備的免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.湖北anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠代理價(jià)格4折起B(yǎng)EENbio Anti Flag Co-IP&CHIP磁珠全國招商代理。
戊二醛兩步交聯(lián)法將辣根過氧化物酶(HRP)結(jié)合于甲胎蛋白 (AFP)抗體上制成酶標(biāo)AFP抗體,質(zhì)量鑒定結(jié)果表明其比活性為200 U/mg,抗體效價(jià)為1: 256,滿足酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)要求;通過滴定法確定酶標(biāo)AFP抗體的**適工作稀釋度為V(酶標(biāo)抗體): V(磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液)=1: 160;血清用量及孵育時(shí)間的影響實(shí)驗(yàn)表明:血清100 μL,孵育時(shí)間2 h為比較好測定條件.建立了肝*患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的規(guī)范化檢測程序.初步應(yīng)用實(shí)驗(yàn)顯示:免疫磁珠ELISA法測定受試健康組血清AFP值 平均為3.9 ng/mL,肝*組血清AFP值平均為316.7 ng/mL,對(duì)肝*診斷陽性率為72.0%.批內(nèi)及批間CV值分別為5.05%和8.20%.該項(xiàng)技術(shù)有較高的靈敏度和很好的特異性,操作簡便,分離快 速,適用于肝*的初期快速診斷.
羥基淀粉沉淀去除臍血紅細(xì)胞和免疫磁珠(MACS)陽性選擇,建立富集,分離臍血CD34+細(xì)胞的簡易實(shí)用方法,通過造血祖細(xì)胞集落培養(yǎng)分析其在細(xì)胞因子作用下的增殖潛能,觀察羥基淀粉沉淀對(duì)造血細(xì)胞增殖功能的影響.方法:采用羥基淀粉沉淀和改進(jìn)的MACS富集,分離臍血CD34+細(xì)胞,以甲纖半固體造血細(xì)胞培養(yǎng)法觀察其粒-單系細(xì)胞(CFU-GM)和紅系爆式集落(BFU-E)的數(shù)量和特性.結(jié)果:臍血分離前,CD34+細(xì)胞純度為1.5%~3%,MACS分離后其純度可達(dá)85%,羥基淀粉沉淀和MACS分離可達(dá)91%;CD34+造血祖細(xì)胞培養(yǎng)有明顯的增殖,采用IL-3,IL-6,SCF,GM-CSF,EPO等細(xì)胞因子組合擴(kuò)增培養(yǎng)9~14d,CD34+細(xì)胞在液體培養(yǎng)中有明顯擴(kuò)增,MACS分離后CD34+細(xì)胞總數(shù)增加39倍,羥基淀粉沉淀和MACS分離可增加45倍.結(jié)論:應(yīng)用羥基淀粉沉淀和改進(jìn)的MACS系統(tǒng)可有效富集,分離臍血CD34+細(xì)胞,羥基淀粉沉淀對(duì)CD34+細(xì)胞的富集,分離無影響;臍血細(xì)胞分離后作造血祖細(xì)胞培養(yǎng),可產(chǎn)生豐富的CFU-GM和BFU-E,說明羥基淀粉沉淀分離的CD34+細(xì)胞的增殖功能優(yōu)于MACS分離CD34+細(xì)胞的增殖功能.免疫磁珠技術(shù)應(yīng)用于肺Cancer中的研究進(jìn)展。
建立有效的人類神經(jīng)干細(xì)胞分離純化系統(tǒng)和方法.方法:無菌取孕24周流產(chǎn)胎兒的室下區(qū)腦組織,制備細(xì)胞懸液,用磁性微珠標(biāo)記的CD133單克隆抗體與細(xì)胞孵育,通過磁分選器分離出CD133(+)和CD133(-)細(xì)胞,通過體外培養(yǎng)并誘導(dǎo)分化,觀察CD133陽性細(xì)胞和陰性細(xì)胞的增殖情況及分化能力.結(jié)果:經(jīng)免疫磁珠分選的室下區(qū)腦組織中,CD133(+)細(xì)胞占胚胎腦組織細(xì)胞的2%左右,該細(xì)胞體外擴(kuò)增能力強(qiáng),細(xì)胞呈球形生長,并易聚集成團(tuán),培養(yǎng)5d,10d,15d,20d進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞增長率分別為1.79%,4.82%,7.21%,14.66%,誘導(dǎo)分化后的細(xì)胞經(jīng)染色鑒定可分化為神經(jīng)元,神經(jīng)膠質(zhì)等多種神經(jīng)細(xì)胞,陰性細(xì)胞擴(kuò)增能力弱,活細(xì)胞計(jì)數(shù)以死細(xì)胞數(shù)量居多,大約705,另外一些細(xì)胞貼壁分化.結(jié)論:免疫磁珠法簡便,有效,經(jīng)免疫磁珠分離的神經(jīng)干細(xì)胞在體外能進(jìn)一步培養(yǎng)擴(kuò)增并分化.免疫磁珠法分離和純化胚胎神經(jīng)干細(xì)胞。浙江protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制
免疫磁珠法富集循環(huán)腫瘤細(xì)胞研究進(jìn)展。廣東anti-Myc COIP免疫磁珠市場報(bào)價(jià)
抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,并進(jìn)行初步應(yīng)用。方法采用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備抗熒光素單克隆抗體;制備腹水,經(jīng)50%硫酸銨粗提后,再經(jīng)陰離子交換樹脂DE52進(jìn)一步純化單克隆抗體;采用氧化共沉淀法制備納米磁性粒子;乳液聚合法制備羧基磁性微球;用碳二亞胺將抗熒光素單克隆抗體共價(jià)偶聯(lián)于磁性微球表面,制備抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠。用制備的免疫磁珠檢測乙肝表面抗原,并與市售ELISA試劑盒的檢測結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果共獲得5株雜交瘤細(xì)胞株,其中1F12細(xì)胞株分泌的抗體效價(jià)、相對(duì)親和力較高,特異性較好;純化的1F12株單抗的純度達(dá)95%,蛋白含量為2.4mg/ml,ELISA效價(jià)為106,相對(duì)親和力為0.2mg/L,與FITC標(biāo)記的BSA可特異性結(jié)合;納米磁性粒子的平均粒徑為150nm,鐵含量為71.63%;羧基磁性微球的平均粒徑為210nm,羧基含量約為2.15mmol/g;每克羧基磁性微球可結(jié)合抗熒光素單克隆抗體約12mg,制備的免疫磁珠可有效結(jié)合熒光素標(biāo)記的蛋白。應(yīng)用抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠檢測乙型肝炎表面抗原的靈敏度高于ELISA試劑,檢測限達(dá)0.1ng/ml。結(jié)論成功制備了抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,其具有應(yīng)用于免疫檢測分析的價(jià)值。廣東anti-Myc COIP免疫磁珠市場報(bào)價(jià)
上海普平生物科技有限公司是一家上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓;實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、化工原料及產(chǎn)品的銷售;計(jì)算機(jī)軟件開發(fā);計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)工程;從事貨物及技術(shù)進(jìn)出口業(yè)務(wù)。 的公司,是一家集研發(fā)、設(shè)計(jì)、生產(chǎn)和銷售為一體的專業(yè)化公司。普平生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì),以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供科研試劑、耗材、儀器,納米脂質(zhì)體,細(xì)胞、分子、蛋白實(shí)驗(yàn),科研項(xiàng)目。普平生物不斷開拓創(chuàng)新,追求出色,以技術(shù)為先導(dǎo),以產(chǎn)品為平臺(tái),以應(yīng)用為重點(diǎn),以服務(wù)為保證,不斷為客戶創(chuàng)造更高價(jià)值,提供更優(yōu)服務(wù)。普平生物始終關(guān)注自身,在風(fēng)云變化的時(shí)代,對(duì)自身的建設(shè)毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使普平生物在行業(yè)的從容而自信。