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吉林anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠性能

來源: 發(fā)布時間:2022-03-14

免疫共沉淀(COIP)實(shí)驗(yàn)過程
(1)轉(zhuǎn)染后24-48 h 可收獲細(xì)胞,加入適量細(xì)胞裂解緩沖液(含蛋白酶抑制劑),冰上裂解30min, 細(xì)胞裂解液于4°C, 最大轉(zhuǎn)速離心30 min后取上清;
(2)取少量裂解液以備Western blot分析,剩余裂解液加1μg相應(yīng)的抗體加入到細(xì)胞裂解液,4°C緩慢搖晃孵育過夜;
(3)取10μl protein A 瓊脂糖珠,用適量裂解緩沖液洗3 次,每次3,000 rpm離心3 min;
(4)將預(yù)處理過的10μl protein A 瓊脂糖珠加入到和抗體孵育過夜的細(xì)胞裂解液中4°C緩慢搖晃孵育2-4h,使抗體與protein A瓊脂糖珠耦聯(lián);
(5)免疫沉淀反應(yīng)后,在4°C 以3,000 rpm 速度離心3 min,將瓊脂糖珠離心至管底;將上清小心吸去,瓊脂糖珠用1ml裂解緩沖液洗3-4次;***加入15μl的2×SDS 上樣緩沖液,沸水煮5分鐘;
(6)SDS-PAGE, Western blotting或質(zhì)譜儀分析。
注意的問題:
(1)細(xì)胞裂解采用溫和的裂解條件,不能破壞細(xì)胞內(nèi)存在的所有蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用,多采用非離子變性劑(NP40或Triton X-100)。每種細(xì)胞的裂解條件是不一樣的,通過經(jīng)驗(yàn)確定。不能用高濃度的變性劑(0.2%SDS),細(xì)胞裂解液中要加各種酶抑制劑,如商品化的cocktailer。
(2)使用明確的抗體,可以將幾種抗體共同使用。
(3)使用對照抗體:

免疫磁珠法分離成人骨髓來源神經(jīng)干細(xì)胞的生物學(xué)特征。吉林anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠性能

免疫磁珠分選CD34+細(xì)胞及臍血中CD34+細(xì)胞含量的意義.[方法]臍血中分離單核細(xì)胞后,采用EasySep正選人CD34+免疫磁珠分選CD34+細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測分選前后CD34細(xì)胞的純度.[結(jié)果]分選前MNC中CD34+細(xì)胞純度為(1.14士0.71)%,分選后CD34+細(xì)胞純度達(dá)到(91.55士4.11)%.[結(jié)論]臍血作為CD347造血干/祖細(xì)胞的來源以及免疫磁珠方法在獲得高純度CD34+細(xì)胞中有重要的意義.

免疫磁珠分選CD34+細(xì)胞及臍血中CD34+細(xì)胞含量的意義.[方法]臍血中分離單核細(xì)胞 后,采用EasySep正選人CD34+免疫磁珠分選CD34+細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測分選前后CD34細(xì)胞的純度.[結(jié)果]分選前MNC中CD34+細(xì)胞 純度為(1.14士0.71)%,分選后CD34+細(xì)胞純度達(dá)到(91.55士4.11)%.[結(jié)論]臍血作為CD347造血干/祖細(xì)胞的來源以及免疫磁 珠方法在獲得高純度CD34+細(xì)胞中有重要的意義. 天津蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門抗原肽免疫磁珠檢測BLV抗體的研究。

人腦**組織中分離,培養(yǎng),純化和鑒定腦**干細(xì)胞(BTSCs),探討CD133免疫磁珠分選方法獲取BTSCs的可行性及BTSCs的生物學(xué)特性.方法:留取人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤新鮮標(biāo)本,分離獲得腦腫瘤細(xì)胞.應(yīng)用CD133免疫磁珠分選方法純化BTSCs;流式細(xì)胞儀檢測分選陽性率;神經(jīng)球計(jì)數(shù)法分析CD133+/-亞群細(xì)胞神經(jīng)球形成情況;免疫熒光方法檢測CD133+/-亞群細(xì)胞表面神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)標(biāo)記物CD133,神經(jīng)巢蛋白(nestin)表達(dá)情況;檢測CD133+/-亞群細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化后細(xì)胞表面分化標(biāo)記物β-TubulinⅢ,GFAP表達(dá)情況.結(jié)果:CD133+亞群細(xì)胞具有干細(xì)胞特性,可形成明顯的神經(jīng)球,具有自我更新和明顯的增殖能力,并且NSCs標(biāo)記物CD133,nestin表達(dá)陽性,經(jīng)誘導(dǎo)分化后分化標(biāo)記物β-TubulinⅢ,GFAP表達(dá)陽性;CD133-亞群細(xì)胞無上述特性.結(jié)論:CD133免疫磁珠分選方法獲得的CD133+亞群細(xì)胞即為BTSCs,該方法可以得到高純度的BTSCs,可以用于BTSCs的實(shí)驗(yàn)研究.

應(yīng)用免疫磁珠法分離篩選人乳牙牙髓干細(xì)胞,并做培養(yǎng)鑒定.方法采用STRO-1為標(biāo)記物以免疫磁珠分離篩選人乳牙牙髓干細(xì)胞,觀察細(xì)胞形態(tài)及生長情況,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表型,并檢測細(xì)胞體外多向分化能力.結(jié)果應(yīng)用免疫磁珠法篩選人乳牙牙髓細(xì)胞可獲得乳牙牙髓干細(xì)胞,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理證明看其生長速度慢于牙髓細(xì)胞,細(xì)胞表型分析證實(shí)CD29,CD105高表達(dá),CD34,CD45低表達(dá).礦化誘導(dǎo)和成脂誘導(dǎo)證實(shí)STRO-1+乳牙牙髓細(xì)胞具有干細(xì)胞多向分化的能力.結(jié)論免疫磁珠法是有效的分離純化人乳牙牙髓干細(xì)胞的方法.所分離的細(xì)胞具有干細(xì)胞的表型特點(diǎn)及多向分化能力.BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。

核酸提取磁珠通過對磁珠進(jìn)行一定的包被(如硅基、氨基、羧基等),從而可以實(shí)現(xiàn)對核酸的高通量、自動化提取,這一技術(shù)產(chǎn)生于20世紀(jì)80年代,已經(jīng)有了成熟的試劑盒并形成為產(chǎn)業(yè)。隨著基因檢測、個性化給藥、產(chǎn)前診斷等的普及,在生物行業(yè)各領(lǐng)域都追求高通量、自動化的***,傳統(tǒng)DNA提取方法的局限愈來愈明顯,而磁珠法DNA提取的優(yōu)勢則愈來愈明顯:①能夠?qū)崿F(xiàn)自動化、大批量操作,已有96孔的核酸自動提取儀,用一個樣品的提取時間即可實(shí)現(xiàn)對96個樣品的處理,符合生物學(xué)高通量的操作要求,使得傳染性疾病爆發(fā)時能夠進(jìn)行快速及時的應(yīng)對,這一特點(diǎn)使得傳統(tǒng)方法望塵莫及;②操作簡單、用時短,整個提取流程只有四步,大多可以在36-40分鐘內(nèi)完成;③安全無毒,不使用傳統(tǒng)方法中的苯、氯仿等有毒試劑,對實(shí)驗(yàn)操作人員的傷害減少到**少,完全符合現(xiàn)代環(huán)保理念;④磁珠與核酸的特異性結(jié)合使得提取的核酸純度高、濃度大。BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。上海蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠供應(yīng)商

免疫磁珠分選兔前軟骨干細(xì)胞及細(xì)胞研究平臺的建立。吉林anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠性能

建立有效的人類神經(jīng)干細(xì)胞分離純化系統(tǒng)和方法.方法:無菌取孕24周流產(chǎn)胎兒的室下區(qū)腦組織,制備細(xì)胞懸液,用磁性微珠標(biāo)記的CD133單克隆抗體與細(xì)胞孵育,通過磁分選器分離出CD133(+)和CD133(-)細(xì)胞,通過體外培養(yǎng)并誘導(dǎo)分化,觀察CD133陽性細(xì)胞和陰性細(xì)胞的增殖情況及分化能力.結(jié)果:經(jīng)免疫磁珠分選的室下區(qū)腦組織中,CD133(+)細(xì)胞占胚胎腦組織細(xì)胞的2%左右,該細(xì)胞體外擴(kuò)增能力強(qiáng),細(xì)胞呈球形生長,并易聚集成團(tuán),培養(yǎng)5d,10d,15d,20d進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞增長率分別為1.79%,4.82%,7.21%,14.66%,誘導(dǎo)分化后的細(xì)胞經(jīng)染色鑒定可分化為神經(jīng)元,神經(jīng)膠質(zhì)等多種神經(jīng)細(xì)胞,陰性細(xì)胞擴(kuò)增能力弱,活細(xì)胞計(jì)數(shù)以死細(xì)胞數(shù)量居多,大約705,另外一些細(xì)胞貼壁分化.結(jié)論:免疫磁珠法簡便,有效,經(jīng)免疫磁珠分離的神經(jīng)干細(xì)胞在體外能進(jìn)一步培養(yǎng)擴(kuò)增并分化.吉林anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠性能

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標(biāo)簽: 免疫磁珠