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吉林anti-HA COIP免疫磁珠哪家好

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-03-13

免疫磁珠法(MiniMACS)在分離純化外周血CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞亞群中的應(yīng)用.方法:應(yīng)用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheralbloodmononucleatecells,PBMC),采用MiniMACS分別分離和純化39例標(biāo)本外周血PBMC中的CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞,并經(jīng)流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞純度和臺(tái)盼藍(lán)染色的方法對(duì)細(xì)胞活力進(jìn)行評(píng)估.結(jié)果:MiniMACS分離外周血CD4+T淋巴細(xì)胞前,后細(xì)胞純度分別為(37.38±5.74)%,(97.75±1.03)%(P〈0.001),CD8+T淋巴細(xì)胞分離純化前后細(xì)胞純度分別為(20.11±6.83)%,(96.85±1.86)%(P〈0.001);外周血分離前PBMC細(xì)胞活力為(97.66±2.73)%,純化為CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞后細(xì)胞活力分別為(97.44±3.08)%,(98.05±2.92)%(P〉0.05).結(jié)論:MiniMACS可以高度富集CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞且不改變細(xì)胞的活力.密度梯度離心聯(lián)合上皮細(xì)胞黏附分子免疫磁珠富集法檢測(cè)卵巢Cancer循環(huán)腫瘤細(xì)胞及其與腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性.吉林anti-HA COIP免疫磁珠哪家好

一種免疫磁珠及制作方法和用于檢測(cè)的方法及測(cè)試板,所述的免疫磁珠至少由磁性載體微球組成,該磁性載體微球結(jié)合有至少一種免疫配基;所述的磁性載體微球由磁性納米粒和高分子骨架材料組成,其**為金屬小顆粒,**外為高分子材料,**外層為帶有各種可以結(jié)合不同免疫配基功能基因的功能層;免疫磁珠的制作方法包括:磁珠預(yù)處理;活化磁珠;偶聯(lián)抗體的制作;對(duì)偶聯(lián)抗體用封閉液封閉;免疫磁珠純化等;用于檢測(cè)的方法是:利用免疫學(xué)反應(yīng)夾心法,競(jìng)爭(zhēng)法以及間接法檢測(cè)不同物質(zhì)的存在,并在測(cè)試板上設(shè)置對(duì)照體系:測(cè)試板由包被試紙條,偶聯(lián)墊,樣品墊,吸水墊,覆蓋膜以及測(cè)試板外卡組成,它具有靈敏度高,定量準(zhǔn)確,不受光學(xué)因素干擾,磁信號(hào)穩(wěn)定,不易衰減,試劑簡(jiǎn)單,穩(wěn)定,低廉,檢測(cè)快速,適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)等特點(diǎn).甘肅COIP免疫磁珠哪家好紅細(xì)胞膜免疫磁珠檢測(cè)成分血中抗A/抗B的研究。

COIP實(shí)驗(yàn)步驟
第三步:免疫共沉淀
根據(jù)不同的抗體結(jié)合方式,這里的免疫共沉淀步驟會(huì)稍有不同,但是本質(zhì)是一樣的,都是為了形成抗原-蛋白復(fù)合物。
如果直接使用 Protein A/G 結(jié)合的 beads,先進(jìn)行細(xì)胞裂解液/蛋白混合物與抗體的孵育,再加入 beads 將蛋白-抗體復(fù)合物拉下來。
如果使用了交聯(lián)劑將抗體與 Protein A/G 固定,或者直接將抗體固定在 beads,則將固定抗體的 beads 與細(xì)胞裂解液或則蛋白混合物一起孵育。
增加在洗脫之前的洗滌次數(shù)或在免疫共沉淀緩沖液中加入 Triton X-100 ,可以降低非特異性結(jié)合,以防止蛋白在陰性對(duì)照樹脂實(shí)驗(yàn)樣品中被檢測(cè)到。
第四步:洗脫與檢測(cè)
***一步則是使用洗脫緩沖液將互作蛋白復(fù)合物洗脫,并通過 Western Blot 或者 Mass spectra 檢測(cè)鑒定蛋白。當(dāng)?shù)鞍谆蚩贵w對(duì)低 pH 的緩沖液敏感,可使用中性 pH 值的洗脫緩沖液。
注意事項(xiàng):
如后續(xù)需進(jìn)行酶活或功能性分析,則需使用兼容下游檢測(cè)的 Elution buffer 進(jìn)行洗脫。
對(duì)于交聯(lián)劑結(jié)合的 beads,為了保持抗體偶聯(lián)樹脂的活性,應(yīng)立即再生和存儲(chǔ)樹脂,保證抗體可以重復(fù)利用。

Anti Flag COIP磁珠

產(chǎn)品價(jià)格


產(chǎn)品貨號(hào)
規(guī)格
價(jià)格
Beenbio -PR002-0.4
0.4 mL
1150 RMB
Beenbio -PR002-1
mL
1780 RMB
Beenbio -PR002-5
5 mL
6825 RMB


產(chǎn)品描述

BEENbio Anti Flag COIP磁珠在大小為1um的納米磁珠上供價(jià)結(jié)合了大量的小鼠Anti Flag單克隆抗體,與傳統(tǒng)的Anti Flag COIP瓊脂糖凝膠比較,抗體結(jié)合能力相同,背景更低,由于采用磁性分離,使得每次COIP可以節(jié)省40%的時(shí)間。


產(chǎn)品特性


項(xiàng)目
特性
抗體亞型
鼠源IgG1
抗體純化方法
Protein A 純化制備
適用范圍
免疫共沉淀(IP),Flag tag蛋白純化
推薦使用體積
COIP: 500μl 細(xì)胞裂解液 使用 10μL磁珠
融合蛋白結(jié)合容量
大于1.1 mg Flag tagged protein/mL 磁珠



儲(chǔ)存條件

4oC長(zhǎng)期穩(wěn)定,


使用說明

磁珠的準(zhǔn)備

重懸Anti Flag 免疫磁珠,取10 μL加入到500 μL TBS,洗滌3次,分離磁珠,棄上清。

樣品的結(jié)合(binding)

在上述沉淀中加入500 μL細(xì)胞裂解液,室溫緩慢孵育2小時(shí)或者4°C條件下過夜,分離磁珠,棄上清。

結(jié)合過程中,磁珠可能會(huì)出現(xiàn)聚團(tuán)或呈片狀,屬于正?,F(xiàn)象,不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

洗滌(washing):0.5 mL TBS緩沖液洗滌四次,每次5min,分離磁珠,棄上清。

洗脫(elution):上述所得沉淀中加 50 μL 1×蛋白上樣緩沖液,煮沸5 min,冷卻后分離磁珠,吸取上清液,進(jìn)行SDS-PAGE檢測(cè)。 免疫磁珠技術(shù)應(yīng)用于肺Cancer中的研究進(jìn)展。

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時(shí),完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來。當(dāng)用預(yù)先固化在agarosebeads上的蛋白質(zhì)A的抗體免疫沉淀A蛋白,那么與A蛋白在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)B也能一起沉淀下來。再通過蛋白變性分離,對(duì)B蛋白進(jìn)行檢測(cè),進(jìn)而證明兩者間的相互作用。這種方法得到的目的蛋白是在細(xì)胞內(nèi)與興趣蛋白天然結(jié)合的,符合體內(nèi)實(shí)際情況,得到的結(jié)果可信度高。這種方法常用于測(cè)定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合;也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。用免疫磁珠法檢測(cè)抗白念珠*烯醇化酶抗體。河南protein A/G COIP免疫磁珠供應(yīng)商

BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。吉林anti-HA COIP免疫磁珠哪家好

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上海普平生物科技有限公司致力于化工,是一家招商型公司。公司業(yè)務(wù)分為科研試劑、耗材、儀器,納米脂質(zhì)體,細(xì)胞、分子、蛋白實(shí)驗(yàn),科研項(xiàng)目等,目前不斷進(jìn)行創(chuàng)新和服務(wù)改進(jìn),為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。公司將不斷增強(qiáng)企業(yè)重點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)力,努力學(xué)習(xí)行業(yè)知識(shí),遵守行業(yè)規(guī)范,植根于化工行業(yè)的發(fā)展。普平生物立足于全國(guó)市場(chǎng),依托強(qiáng)大的研發(fā)實(shí)力,融合前沿的技術(shù)理念,飛快響應(yīng)客戶的變化需求。

標(biāo)簽: 免疫磁珠