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常見問題及對策
5: 磁珠在使用過程中出現(xiàn)結(jié)塊現(xiàn)象?
磁珠在使用時如果出現(xiàn)結(jié)塊現(xiàn)象一般較難振蕩打散,容易導(dǎo)致分 布不均,出現(xiàn)該問題的原因是磁珠在磁場中放置太久而使磁珠牢固的 結(jié)合在一起。用超聲波水浴處理 2min 即可打散磁珠使其重新分散, 但應(yīng)注意超聲處理也會使磁珠在樣品溶液中捕獲的抗體脫落,所以磁珠在加樣后洗脫前不宜使用該方法。
緩沖液匯總
Co-IP & CHIP磁珠緩沖液匯總:
細胞裂解液:正常RIPA 細胞裂解緩沖液(一般是公司購買)
抗體磁珠結(jié)合buffer:PBST(1*PBS + 1% Triton X-100)
Washing buffer: PBST(1*PBS + 1% Triton X-100)
抗原與抗體/磁珠復(fù)合物binding buffer:可以用RIPA 細胞裂解緩沖液代替
Washing buffer: PBST(1*PBS + 1% Triton X-100)
6、Elution buffer: (1)變性洗脫緩沖液,直接加入1*蛋白loading buffer, 98oC 5 min后棄去磁珠后,收集上清液檢測。(2)非變性洗脫緩沖液:Elution buffer: 0.1 M -0.2 M Glycine, 0.1%-0.5% Triton 100 or Tween 20, pH 2.5-3.1。
基于免疫磁珠分散聚集狀態(tài)檢測病原體與Cancer癥標(biāo)志物。安徽anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠經(jīng)銷商價格4折起
磁珠分離細胞STRO-1+的DPSC、EMSC中HNK-1、Nestin的表達,進一步了解DPSC的表型特點及與EMSC的相關(guān)性,為今后研究提供較為純化的細胞來源。方法采用間接免疫磁珠分離法獲得DPSC、EMSC,間接免疫熒光雙標(biāo)法檢測抗原HNK-1、Nestin的表達。結(jié)果磁珠分離前后進行細胞計數(shù),大約有5%的DPSC為STRO-1+的細胞,大約有1%的EMSC為STRO-1+的細胞;STRO-1+的DPSC免疫熒光檢測同時表達HNK-1(++)、Nestin(+),STRO-1+的EMSC免疫熒光檢測顯示也同時表達HNK-1(++)、Nestin(++)。結(jié)論免疫磁珠分離法獲得STRO-1+陽性的DPSC共表達EMSC的標(biāo)記HNK-1和Nestin,進一步說明二者作為間充質(zhì)來源的干細胞,細胞表型具有繼承性。安徽anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠經(jīng)銷商價格4折起免疫磁珠負性富集結(jié)合免疫熒光抗體技術(shù)檢測卵巢Cancer患者外周血CTCs的方法建立和應(yīng)用。
利用免疫磁珠法分選并鑒定人前列腺*類干細胞.方法利用免疫磁珠法從人前列腺*細胞株P(guān)C3中分選CD133+/CD44+細胞,通過免疫組化,流式細胞術(shù),CCK8,平板克隆形成實驗及裸鼠成瘤實驗鑒定其表面標(biāo)志物表達情況及**干細胞特性.結(jié)果經(jīng)免疫磁珠法分選所得CD133+/CD44+細胞比例為0.50%;免疫組化及流式顯示其CD44/CD133/整合素α2β1均高表達;其細胞增殖和克隆形成率高于PC3細胞;以低密度注射時,其裸鼠體內(nèi)成瘤率明顯高于PC3細胞.結(jié)論利用免疫磁珠法可從人前列腺*細胞株P(guān)C3中高效的分選出具有**干細胞生物學(xué)特性的前列腺*類干細胞.
常見問題及對策
3: 如何避免磁珠在儲存或使用過程中可能出現(xiàn)的聚集情況?
磁珠應(yīng)保存在2~8℃,使用時應(yīng)避免由于污染而導(dǎo)致的不可逆聚 集,或因干燥而導(dǎo)致的聚集。磁珠在低pH的洗脫緩沖液中發(fā)生聚集屬 于正?,F(xiàn)象,不影響磁珠的正常使用。在Binding buffer和Elution buffer中添加終濃度為0.1%(v/v)的非離子型去垢劑(如NP-40、 Tween-20 或 Triton X-100)可有效防止磁珠聚集。經(jīng)過低pH洗脫操 作的磁珠可以用結(jié)合緩沖液洗滌至中性,然后用含有0.1% (v/v)Tween-20的Tris buffer(pH7.5)振蕩重懸磁珠,并用超聲波水浴 處理2min,即可使磁珠恢復(fù)均勻狀態(tài),以上處理均不影響磁珠的抗體 結(jié)合效率。
4: 如何解決磁珠易粘附管壁的現(xiàn)象?
建議使用低吸附率的耗材進行磁珠操作。另外,在緩沖液中添加 0.01%~0.1%(v/v)的非離子型去垢劑(如NP-40、Tween-20或 Triton X-100)可以有效降低磁珠對耗材的粘附。
BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠蛋白相互作用。
探討小鼠脾臟CD8+T細胞的免疫磁珠負性分選方法,并對分選后所得細胞進行純度、活力及功能檢測.方法以免疫磁珠負性分選法從小鼠脾臟細胞中分離CD8+T細胞,流式細胞術(shù)檢測所得細胞的純度,臺盼藍檢測細胞活力并用ConA刺激檢測增殖能力.結(jié)果經(jīng)過流式細胞儀測定免疫磁珠負性分選后的小鼠脾臟CD8+T細胞純度達到(91.6±3.6)%,臺盼蘭染色細胞活力為(94.9±3.2)%,ConA刺激72h后有(56.3±1.7)%的細胞增殖.結(jié)論免疫磁珠負性分選法能夠分選出高純度的CD8+T細胞,并且不影響分選靶細胞的細胞活力和功能.自制免疫磁珠在前列腺tumor組織干細胞提取中的應(yīng)用。天津anti-Flag COIP免疫磁珠送貨上門
BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。安徽anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠經(jīng)銷商價格4折起
產(chǎn)品貨號
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規(guī)格
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價格
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BEENbio-PR001-0.4
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0.4 mL
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455 RMB
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BEENbio-PR001-1
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1 mL
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654 RMB
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BEENbio-PR001-5
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5ml
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2616 RMB
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產(chǎn)品描述
BEENbio Protein A/G Co-IP & CHIP磁珠在大小為2um的納米磁珠上供價結(jié)合了大量的Protein A/G蛋白,與傳統(tǒng)的Protein A/G 免疫共沉淀瓊脂糖凝膠比較,抗體結(jié)合能力相同,背景更低的特點,由于采用磁性分離,使得每次Co-IP 和 CHIP可以節(jié)省40%的時間。
產(chǎn)品特性
項目
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特性
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磁珠大小
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1 μm
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磁珠濃度
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10 mg/mL
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IgG 結(jié)合量
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0.5 mg/mL
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適用范圍
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CoIP,CHIP
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穩(wěn)定性
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pH 6-8, 4℃長期穩(wěn)定
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適用抗體種屬
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廣譜抗體種屬
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儲存條件
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4oC,避光
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儲存條件
pH 6-8, 4oC長期穩(wěn)定,禁止產(chǎn)品凍結(jié)。
上海普平生物科技有限公司致力于化工,是一家招商型公司。公司業(yè)務(wù)分為科研試劑、耗材、儀器,納米脂質(zhì)體,細胞、分子、蛋白實驗,科研項目等,目前不斷進行創(chuàng)新和服務(wù)改進,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。公司從事化工多年,有著創(chuàng)新的設(shè)計、強大的技術(shù),還有一批**的專業(yè)化的隊伍,確保為客戶提供良好的產(chǎn)品及服務(wù)。普平生物憑借創(chuàng)新的產(chǎn)品、專業(yè)的服務(wù)、眾多的成功案例積累起來的聲譽和口碑,讓企業(yè)發(fā)展再上新高。