從臍血中分離,培養(yǎng)血管內(nèi)皮祖細胞,研究內(nèi)皮祖細胞的生長特性和誘導分化條件.方法:應用MACS磁球抗體標記法純化臍血中的CD133+細胞,通過流式細胞儀,免疫細胞化學,免疫熒光等技術及形態(tài)學(光鏡,電鏡)觀察研究內(nèi)皮祖細胞;將細胞接種于添加(或未添加)VEGF,bFGF,干細胞因子(SCF)的含20%胎牛血清(FBS)的IMDM培養(yǎng)基中,觀察內(nèi)皮祖細胞的生長特性.結果:分離新鮮臍血所得CD133陽性細胞占單個核細胞的(1.41±1.14)%,經(jīng)流式細胞儀鑒定CD133+細胞純度為75%-85%;將分離細胞接種于纖維連接蛋白包被的24孔板內(nèi),培養(yǎng)1-2h即有細胞貼壁,7-10d可見貼壁細胞呈鋪路石樣排列;14d后細胞出現(xiàn)小圓形,梭形等多樣性變化,可見***管腔樣結構,電鏡觀察可見胞漿內(nèi)典型的Weibel-Palade小體;在VEGF,bFGF,SCF存在條件下,檢測貼壁細胞培養(yǎng)14d后細胞表面抗原表達情況:與培養(yǎng)開始時相比,祖細胞標志CD133和CD34陽性率呈明顯下降趨勢,分別由(77.0±3.3)%和(93.1±4.7)%降至(1.6±2.2)%和(37.4±4.9)%,P<0.05,內(nèi)皮細胞特異性標志Flk-1表達明顯增加,由(22.3±3.3)%增至(94.3±4.1)%,P<0.05,同時vWF抗原呈強陽性表達,陽性率為(77.9±3.3)%.BEENbio Anti Flag Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。北京protein A/G COIP免疫磁珠送貨上門

Anti Myc COIP磁珠

產(chǎn)品價格

產(chǎn)品描述

BEENbio Anti Myc COIP磁珠在大小為2um的納米磁珠上供價結合了大量的小鼠Anti Myc 單克隆抗體，與傳統(tǒng)的Anti Myc COIP瓊脂糖凝膠比較，抗體結合能力相同，背景更低，由于采用磁性分離，使得每次COIP可以節(jié)省40%的時間。

產(chǎn)品特性

儲存條件

4^oC長期穩(wěn)定

使用說明

磁珠的準備

重懸Anti Myc 免疫磁珠，取10 μL加入到500 μL TBS，洗滌3次，分離磁珠，棄上清。

樣品的結合（binding）

在上述沉淀中加入500 μL細胞裂解液，室溫緩慢孵育2小時或者4°C條件下過夜，分離磁珠，棄上清。

注意：結合過程中，磁珠可能會出現(xiàn)聚團或呈片狀，屬于正?，F(xiàn)象，不會影響實驗結果。

洗滌（washing）：0.5 mL TBS緩沖液洗滌四次，每次5min，分離磁珠，棄上清。

洗脫（elution）:上述所得沉淀中加 入50 μL 1×蛋白上樣緩沖液，煮沸5 min，冷卻后分離磁珠，吸取上清液，進行SDS-PAGE檢測。

天津anti-Flag COIP免疫磁珠市場報價納米免疫磁珠富集單核增生李斯特菌的研究。

磁珠與抗體偶聯(lián)的比較好條件,制備抗單增李斯特菌免疫磁珠;將免疫磁珠與顯色培養(yǎng)法結合,初步建立起利用免疫磁珠分離技術對單增李斯特菌進行分離鑒定的檢測方法.從而為食品中單增李斯特菌的檢測提供一種快速,高效和靈敏的檢測新方法.方法:以單增李斯特菌體作為免疫抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔抗單增李斯特菌多克隆抗體,鑒定多抗活性以及與單增李斯特菌體的結合能力;用激光粒度儀和透射電鏡分析不同活性基團修飾磁珠的粒徑大小和分散性,選擇性質(zhì)穩(wěn)定的磁珠用以制備免疫磁珠;設計正交試驗,摸索pH,溫度,時間對氨基修飾磁珠與多抗偶聯(lián)的影響,選擇比較好條件制備免疫磁珠并用于捕獲單增李斯特菌;設計不同的偶聯(lián)緩沖溶液,偶聯(lián)時間,偶聯(lián)溫度,通過比較羧基修飾磁珠與抗體偶聯(lián)后上清中剩余的抗體量來確定比較好偶聯(lián)條件,運用制備的免疫磁珠對樣品中的單增李斯特菌進行捕獲,并與顯色平板結合試驗,鑒定制備的免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.

骨髓間充質(zhì)干細胞在一定條件下可分化成為多種結締組織細胞,也可分化成神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞.目的:觀察采用免疫磁珠法分離成人骨髓來源神經(jīng)干細胞的生物學特征.設計,時間及地點:以患者自身骨髓組織為觀察對象的實驗,于2003-03/2007-06在菏澤市立醫(yī)院檢驗科完成.材料:骨髓組織來自菏澤市立醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的中風,老年性癡呆,帕金森病,腦缺血等神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者.方法:利用免疫磁珠表面的特異性抗體與骨髓組織中神經(jīng)干細胞抗原相結合,在磁場作用下使結合磁珠與其他細胞分離,從而獲得神經(jīng)干細胞,再將所分離的純化神經(jīng)干細胞接種到含體積分數(shù)為0.20胎牛血清的EaglesMEM培養(yǎng)液,再在培養(yǎng)基中加入堿性成纖維因子和表皮生長因子進行原代培養(yǎng).主要觀察指標:采用免疫組織化學染色與免疫熒光染色鑒定細胞,并采用流式細胞術測定細胞DNA含量.結果:在相差顯微鏡下觀察培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞,細胞形態(tài)豐滿,胞核及核仁清晰可見,神經(jīng)突起粗大,網(wǎng)絡稠密.免疫組織化學和免疫熒光染色顯示,細胞神經(jīng)元特異性烯醇化酶,神經(jīng)蛋白,膠質(zhì)纖維酸性蛋白酶,微管相關蛋白為陽性.傳代后的細胞用流式細胞術測定DNA含量為正常二倍體,無誘發(fā)突變.免疫磁珠法分離純化人腎CancerCD133~+細胞實驗研究。

分離轉(zhuǎn)基因小鼠骨髓造血干細胞.運用針對小鼠干細胞表面特異表達的干細胞抗原-1(stemcellantigen-1,Sca-1)的單克隆抗體和包被于磁顆粒表面的第二抗體,采用磁吸附細胞分選方法(MACS)分離小鼠骨髓造血干細胞,用流式細胞術(FACS)檢測MACS分離后骨髓細胞中干細胞(Sca-1陽性細胞)比例,監(jiān)測細胞分選效果.結果顯示MACS分離后骨髓細胞中Sca-1陽性細胞所占比例達85%以上,涂片觀察發(fā)現(xiàn)細胞組成和細胞形態(tài)學特征與FACS所得結果一致.MACS可以從轉(zhuǎn)基因小鼠全骨髓細胞中分離出Sca-1陽性的骨髓造血干細胞,細胞純度可達85%以上.BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。吉林anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠性能

H9亞型禽流感病毒免疫磁珠分離方法初步建立。北京protein A/G COIP免疫磁珠送貨上門

常見問題及對策

5： 磁珠在使用過程中出現(xiàn)結塊現(xiàn)象？

磁珠在使用時如果出現(xiàn)結塊現(xiàn)象一般較難振蕩打散，容易導致分 布不均，出現(xiàn)該問題的原因是磁珠在磁場中放置太久而使磁珠牢固的 結合在一起。用超聲波水浴處理 2min 即可打散磁珠使其重新分散， 但應注意超聲處理也會使磁珠在樣品溶液中捕獲的抗體脫落，所以磁珠在加樣后洗脫前不宜使用該方法。

緩沖液匯總

Co-IP & CHIP磁珠緩沖液匯總：

細胞裂解液：正常RIPA 細胞裂解緩沖液(一般是公司購買)

抗體磁珠結合buffer：PBST(1*PBS + 1% Triton X-100)

Washing buffer: PBST(1*PBS + 1% Triton X-100)

抗原與抗體/磁珠復合物binding buffer：可以用RIPA 細胞裂解緩沖液代替

Washing buffer: PBST(1*PBS + 1% Triton X-100)

6、Elution buffer: (1)變性洗脫緩沖液，直接加入1*蛋白loading buffer, 98^oC 5 min后棄去磁珠后，收集上清液檢測。（2）非變性洗脫緩沖液：Elution buffer: 0.1 M -0.2 M Glycine, 0.1%-0.5% Triton 100 or Tween 20, pH 2.5-3.1。

上海普平生物科技有限公司致力于化工，以科技創(chuàng)新實現(xiàn)***管理的追求。普平生物擁有一支經(jīng)驗豐富、技術創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團隊，以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供科研試劑、耗材、儀器，納米脂質(zhì)體，細胞、分子、蛋白實驗，科研項目。普平生物致力于把技術上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對用戶產(chǎn)品上的貼心，為用戶帶來良好體驗。普平生物始終關注化工行業(yè)。滿足市場需求，提高產(chǎn)品價值，是我們前行的力量。