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天津anti-HA COIP免疫磁珠性能

來源: 發(fā)布時間:2022-03-04

Anti Myc COIP磁珠

產品價格


產品貨號
規(guī)格
價格
BEENbio-PR004-0.4
0.4 mL
1150 RMB
BEENbio -PR004-1
mL
1780 RMB
BEENbio -PR004-5
5 mL
6825 RMB


產品描述

BEENbio Anti Myc COIP磁珠在大小為2um的納米磁珠上供價結合了大量的小鼠Anti Myc 單克隆抗體,與傳統(tǒng)的Anti Myc COIP瓊脂糖凝膠比較,抗體結合能力相同,背景更低,由于采用磁性分離,使得每次COIP可以節(jié)省40%的時間。


產品特性


項目
特性
抗體亞型
鼠源IgG1
抗體純化方法
Protein A 純化制備
適用范圍
免疫共沉淀(IP),Myc   tag蛋白純化
推薦使用體積
COIP: 500μl 細胞裂解液 使用 10μL磁珠
融合蛋白結合容量
大于1.1 mg Myc   tagged protein/mL 磁珠



儲存條件

4oC長期穩(wěn)定


使用說明

磁珠的準備

重懸Anti Myc 免疫磁珠,取10 μL加入到500 μL TBS,洗滌3次,分離磁珠,棄上清。

樣品的結合(binding)

在上述沉淀中加入500 μL細胞裂解液,室溫緩慢孵育2小時或者4°C條件下過夜,分離磁珠,棄上清。

注意:結合過程中,磁珠可能會出現(xiàn)聚團或呈片狀,屬于正?,F(xiàn)象,不會影響實驗結果。

洗滌(washing):0.5 mL TBS緩沖液洗滌四次,每次5min,分離磁珠,棄上清。

洗脫(elution):上述所得沉淀中加 50 μL 1×蛋白上樣緩沖液,煮沸5 min,冷卻后分離磁珠,吸取上清液,進行SDS-PAGE檢測。


基于免疫磁珠分散聚集狀態(tài)檢測病原體與Cancer癥標志物。天津anti-HA COIP免疫磁珠性能

CoIP :實驗原理
一切從 CoIP 的原理談起:免疫共沉淀是一種以抗體和抗原識別專一性為基礎,用于研究蛋白質相互作用的經典方法。
實驗步驟
第一步:樣品制備
首先進行樣品制備,以提取出想要研究的蛋白,由于不同類型的細胞裂解條件有所差異,這里不展開介紹。
注意事項:
細胞裂解要采用溫和的裂解條件,避免破壞細胞內存在的蛋白間相互作用,裂解、洗滌時需使用非變性裂解液,如 NP-40 和 Triton X-100。
此外,由于不同細胞裂解條件不一樣,建議通過預實驗來確定比較好條件。
第二步:固定抗體
在共沉淀之前,先將固相基質與抗體共同孵育,從而使兩者結合,常用的固相基質有瓊脂糖 Agarose 和磁珠 Magnetic beads。
瓊脂糖 Agarose 具有簡單易用,直徑大,結合力強,多孔易吸附的特點;磁珠具有直徑小,背景低,抗體消耗少的特點,但操作時需借助磁力架。
注意事項:
抗體的選擇十分重要,選經過 IP 驗證的抗體,可以減少假陽性概率。
同時,要注意抗體/緩沖液的比例,抗體稀釋過度不利于后續(xù)抗原抗體結合;而抗體過多就不能完全沉降在固相基質上,殘存于上清。
操作時,為了避免損傷 beads,使用大口徑或截短***頭進行加樣。
天津anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。

免疫磁珠法分離細胞是基于細胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性單抗相結合,在外加磁場中,通過抗體與磁珠相連的細胞被吸附而滯留在磁場中,無該種表面抗原的細胞由于不能與連接著磁珠的特異性單抗結合而沒有磁性,不在磁場中停留,從而使細胞得以分離。免疫磁珠應用分為正選法和負選法:正選法-磁珠結合的細胞就是所要分離獲得的細胞負選法-磁珠結合不需要的細胞,游離于上清液的細胞為所需細胞,一般而言,負選法比正選法的磁珠用量大磁珠:大小在0.1-0.45mm包被了生產的高質量單抗磁珠已為白細胞亞群的分選所優(yōu)化將包被了特異性單抗的BDIMag磁珠加入細胞懸液,磁珠特異性地與有相應抗原的細胞亞群結合,通過分離得到的連有磁珠的細胞可直接用于功能試驗和用流式細胞儀檢測。

BEENbio鏈霉親和素磁珠本產品是由磁性納米顆粒與高純度的鏈霉親和素共價偶聯(lián)而成。這種微球能用于捕獲生物素標記的底物,如抗原、抗體和核酸等。鏈霉親和素(streptavidin)與生物素(biotin)的結合是***的非共價生物交互作用之一,因此,這也是親和層析法所使用的一種強大工具。生物分子可以與生物素輕松融合,而層析基質上固定的鏈霉親和素配體可以與之結合,而且這種鏈霉親和素-生物素相互作用具有較低的非特異親和性,捕獲所需的底物能夠直接應用于后續(xù)實驗。本產品可廣泛應用于免疫學檢測、核酸純化、核酸固相雜交檢測、細胞分選等分子生物學實驗。BEENbio Anti Flag Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。

用多聚抗原肽(multipleantigenpeptides,MAP)包被磁珠制備單表位抗體的方法.方法:通過Fmoc法固相化學合成UreB的8分支單表位MAP,將其作為免疫原免疫小鼠,獲得多克隆抗血清.將MAP以共價偶聯(lián)的方式包被磁珠制備免疫磁珠(immunomagneticbeads,IB),通過IB從多克隆抗血清中純化單表位抗體,熒光偏振(fluorescencepolarization,FP)法鑒定抗體的特異性,SDS-PAGE鑒定抗體純度,紫外分光光度法測定其回收率.結果:合成的MAP具有較強的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗體滴度高達1∶12800.MAP制備免疫磁珠的比較好包被濃度為100mg/L,包被效率比較高可達79%.應用MAP免疫磁珠從抗血清中純化得到的單表位抗體,經鑒定與其他抗原表位無反應性,其純度為95%,抗體的回收率為5.8%.結論:MAP包被的磁珠可快速分離純化出針對某一抗原表位的特異性抗體,其性質類似單克隆抗體.這一方案在快速制備少量高特異性抗體中具有廣闊的應用前景.免疫磁珠法分離成人骨髓來源神經干細胞的生物學特征。湖北protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠批量定制

自制免疫磁珠在前列腺tumor組織干細胞提取中的應用。天津anti-HA COIP免疫磁珠性能

建立檢測人血清抗白***烯醇化酶(Eno)IgG類抗體的免疫磁珠法,并評估其在***血癥診斷中的價值。方法將Eno重組蛋白耦聯(lián)至磁性微珠上,以辣根過氧化物酶(HRP)標記的羊抗人IgG為二抗,優(yōu)化免疫磁珠法的反應條件,考察其精密度和特異性。收集經血培養(yǎng)確診的***血癥患者(n=113)、***定植者(n=50)、細菌菌血癥患者(n=30)和健康人對照者(n=100)血清,用免疫磁珠法測定抗Eno抗體,并與ELISA法結果進行比較。結果免疫磁珠法測定抗Eno抗體的批內、批間變異系數(shù)(CV)分別為8.2%和14.2%,重組Eno抗原對相應抗體的阻斷率為91.6%。以吸光度(A)值0.29為cutoff值時,診斷***血癥的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值分別為80.5%、92.3%、90.1%和84.5%。免疫磁珠法的敏感性和特異性與ELISA法比較無統(tǒng)計學差異,但檢測流程從37℃2.5h縮短至常溫1h。結論免疫磁珠法檢測抗EnoIgG類抗體簡便、快捷、可靠,在侵襲性******研究中具有潛在的應用價值。天津anti-HA COIP免疫磁珠性能

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標簽: 免疫磁珠