精原干細胞(spermatogonialstemcells,SSCs)富集純化是利用SSCs進行基因修飾新方法等研究的前提基礎(chǔ)。采用免疫磁珠分選法,使用干細胞抗體CD90.2進行小鼠SSCs的純化富集,并采用流式細胞分析法和定量PCR驗證了磁珠分選效率。流式細胞分析結(jié)果:免疫磁珠分選后SSCs純度為50.11%。熒光定量PCR檢測結(jié)果:磁珠分選后支持細胞特異表達基因GATA4***下調(diào)(6倍)、SSCs表達基因GFRα-1上調(diào)(6.5倍)、生殖干細胞特異表達基因OCT4極***上調(diào)(5.9倍),3個基因相對表達量的變化說明,免疫磁珠分選效率為6倍。流式細胞分析法所產(chǎn)生的偏差可能是受到了未解離磁珠及SSCs本身轉(zhuǎn)基因熒光的影響。H9亞型禽流感病毒免疫磁珠分離方法初步建立。北京COIP免疫磁珠銷售

免疫磁珠法(MiniMACS)在分離純化外周血CD4+和CD8+T淋巴細胞亞群中的應(yīng)用.方法:應(yīng)用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞(Peripheralbloodmononucleatecells,PBMC),采用MiniMACS分別分離和純化39例標本外周血PBMC中的CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞,并經(jīng)流式細胞儀分析細胞純度和臺盼藍染色的方法對細胞活力進行評估.結(jié)果:MiniMACS分離外周血CD4+T淋巴細胞前,后細胞純度分別為(37.38±5.74)%,(97.75±1.03)%(P〈0.001),CD8+T淋巴細胞分離純化前后細胞純度分別為(20.11±6.83)%,(96.85±1.86)%(P〈0.001);外周血分離前PBMC細胞活力為(97.66±2.73)%,純化為CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞后細胞活力分別為(97.44±3.08)%,(98.05±2.92)%(P〉0.05).結(jié)論:MiniMACS可以高度富集CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞且不改變細胞的活力.陜西COIP免疫磁珠供應(yīng)商免疫磁珠法分離膽囊CancerCD133陽性細胞及其生物學特性鑒定。

免疫磁性細胞分選系統(tǒng)分離純化骨髓衍生肝干細胞亞群c-Kit^+lin^-。方法:實驗于2006—07/08在南方醫(yī)科大學實驗動物中心完成。6~8周齡的SPF級純系BALB,C雄性小鼠10只,體質(zhì)量18~20g。收集小鼠股骨骨髓細胞,利用免疫磁性細胞分選系統(tǒng),通過兩步法分選純化c-Kit^+lin^-:將獲取的lin^-細胞懸液8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按80μL/10^7加入Buffer重懸細胞。按20μL/10^7加生物素抗體磁珠,混勻,4℃冰箱孵育15min,按1 mL/10^7加入Buffer洗細胞1次,8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按500μL/10^8加入Buffer重懸細胞。Buffer 500μL潤MS柱,懸液過柱后,Buffer 500μL/次洗柱3次,柱子脫離磁場,加1mL Buffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit^+lin^-細胞,收集到c-kit^+lin-細胞,細胞計數(shù)。取2.0x108個細胞分成10等份,流式細胞儀分析c-Kit^+lin^-細胞純度,計算回收率,評估純化效率,苔盼蘭染色檢測純化前后的細胞活力。計算活細胞的百分率。細胞純度和細胞回收率的計算:細胞純度:分離產(chǎn)物中的陽性細胞數(shù),分離細胞的總細胞數(shù)×100%,細胞回收率:分離產(chǎn)物中的陽性細胞數(shù),起始標本陽性細胞總數(shù)×100%。

碳二亞胺/N-羥基琥珀酰亞胺(EDC/NHS)方法在羧基磁珠表面偶聯(lián)抗體,制備可高效分離細胞的免疫磁珠.方法用EDC和NHS活化磁珠表面羧基,活化的羧基再與抗體上氨基進行反應(yīng),從而將抗體偶聯(lián)于磁珠表面,獲得免疫磁珠.使用高性能納米粒度分析儀(HPPS),二辛可酸(BCA)蛋白定量試劑盒,流式細胞儀,透射電鏡(TEM)表征磁珠的粒徑,磁珠表面聯(lián)接的抗體量及其免疫活性.結(jié)果HPPS檢測磁珠平均水力學粒徑為110nm;磁珠表面偶聯(lián)52.4μg抗CD11a+抗體/mg磁珠.經(jīng)磁分離后細胞的流式分析結(jié)果表明,CD11a+免疫磁珠可以有效分離髓系白血病細胞系(KG-1a)細胞,免疫磁珠均勻結(jié)合于細胞表面,且不影響細胞的活性.結(jié)論成功制備可用于細胞分離且不影響分離后細胞活性的新型免疫磁珠.BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠全國招商代理。

免疫磁珠法分離,并培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤干細胞的方法.方法將術(shù)中取得的腦膠質(zhì)瘤標本,通過剪切,消化和吹打成單細胞懸液,篩網(wǎng)過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133^+細胞,用神經(jīng)干細胞無血清培養(yǎng)法培養(yǎng)出具有單細胞克隆能力的細胞球,取第3代進行誘導(dǎo)分化,分化前后用免疫細胞熒光化學方法鑒定**干細胞及分化后細胞.結(jié)果免疫磁珠分選出的CD133^+細胞,可懸浮生長并形成神經(jīng)干細胞樣細胞球,有較強的增殖能力,干細胞標志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細胞表達神經(jīng)元小管相關(guān)蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質(zhì)細胞膠質(zhì)纖維酸性蛋白質(zhì)(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白,CD133^+陰性,并具有**的核型.結(jié)論免疫磁珠分選法可避免原代培養(yǎng)中眾多細胞混雜生長的發(fā)生,能夠從大量腫瘤細胞中分離出只占極少比例的**干細胞,細胞結(jié)合磁珠后在體外可以長期培養(yǎng)和傳代,進一步證實了**干細胞的存在,并為膠質(zhì)瘤干細胞的研究奠定基礎(chǔ).免疫磁珠法分離白血病轉(zhuǎn)基因小鼠骨髓造血干細胞。甘肅蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠銷售

用免疫磁珠法檢測抗白念珠*烯醇化酶抗體。北京COIP免疫磁珠銷售

核酸提取磁珠通過對磁珠進行一定的包被（如硅基、氨基、羧基等），從而可以實現(xiàn)對核酸的高通量、自動化提取，這一技術(shù)產(chǎn)生于20世紀80年代，已經(jīng)有了成熟的試劑盒并形成為產(chǎn)業(yè)。隨著基因檢測、個性化給藥、產(chǎn)前診斷等的普及，在生物行業(yè)各領(lǐng)域都追求高通量、自動化的***，傳統(tǒng)DNA提取方法的局限愈來愈明顯，而磁珠法DNA提取的優(yōu)勢則愈來愈明顯：①能夠?qū)崿F(xiàn)自動化、大批量操作，已有96孔的核酸自動提取儀，用一個樣品的提取時間即可實現(xiàn)對96個樣品的處理，符合生物學高通量的操作要求，使得傳染性疾病爆發(fā)時能夠進行快速及時的應(yīng)對，這一特點使得傳統(tǒng)方法望塵莫及；②操作簡單、用時短，整個提取流程只有四步，大多可以在36-40分鐘內(nèi)完成；③安全無毒，不使用傳統(tǒng)方法中的苯、氯仿等有毒試劑，對實驗操作人員的傷害減少到**少，完全符合現(xiàn)代環(huán)保理念；④磁珠與核酸的特異性結(jié)合使得提取的核酸純度高、濃度大。北京COIP免疫磁珠銷售

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