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江蘇anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠經(jīng)銷商價(jià)格4折起

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-02-23

碳二亞胺/N-羥基琥珀酰亞胺(EDC/NHS)方法在羧基磁珠表面偶聯(lián)抗體,制備可高效分離細(xì)胞的免疫磁珠.方法用EDC和NHS活化磁珠表面羧基,活化的羧基再與抗體上氨基進(jìn)行反應(yīng),從而將抗體偶聯(lián)于磁珠表面,獲得免疫磁珠.使用高性能納米粒度分析儀(HPPS),二辛可酸(BCA)蛋白定量試劑盒,流式細(xì)胞儀,透射電鏡(TEM)表征磁珠的粒徑,磁珠表面聯(lián)接的抗體量及其免疫活性.結(jié)果HPPS檢測磁珠平均水力學(xué)粒徑為110nm;磁珠表面偶聯(lián)52.4μg抗CD11a+抗體/mg磁珠.經(jīng)磁分離后細(xì)胞的流式分析結(jié)果表明,CD11a+免疫磁珠可以有效分離髓系白血病細(xì)胞系(KG-1a)細(xì)胞,免疫磁珠均勻結(jié)合于細(xì)胞表面,且不影響細(xì)胞的活性.結(jié)論成功制備可用于細(xì)胞分離且不影響分離后細(xì)胞活性的新型免疫磁珠.BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠全國招商代理。江蘇anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠經(jīng)銷商價(jià)格4折起

探討小鼠脾臟CD8+T細(xì)胞的免疫磁珠負(fù)性分選方法,并對分選后所得細(xì)胞進(jìn)行純度、活力及功能檢測.方法以免疫磁珠負(fù)性分選法從小鼠脾臟細(xì)胞中分離CD8+T細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)檢測所得細(xì)胞的純度,臺(tái)盼藍(lán)檢測細(xì)胞活力并用ConA刺激檢測增殖能力.結(jié)果經(jīng)過流式細(xì)胞儀測定免疫磁珠負(fù)性分選后的小鼠脾臟CD8+T細(xì)胞純度達(dá)到(91.6±3.6)%,臺(tái)盼蘭染色細(xì)胞活力為(94.9±3.2)%,ConA刺激72h后有(56.3±1.7)%的細(xì)胞增殖.結(jié)論免疫磁珠負(fù)性分選法能夠分選出高純度的CD8+T細(xì)胞,并且不影響分選靶細(xì)胞的細(xì)胞活力和功能.江蘇anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠市場報(bào)價(jià)BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。

利用免疫磁珠法分選并鑒定人前列腺*類干細(xì)胞.方法利用免疫磁珠法從人前列腺*細(xì)胞株P(guān)C3中分選CD133+/CD44+細(xì)胞,通過免疫組化,流式細(xì)胞術(shù),CCK8,平板克隆形成實(shí)驗(yàn)及裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)鑒定其表面標(biāo)志物表達(dá)情況及**干細(xì)胞特性.結(jié)果經(jīng)免疫磁珠法分選所得CD133+/CD44+細(xì)胞比例為0.50%;免疫組化及流式顯示其CD44/CD133/整合素α2β1均高表達(dá);其細(xì)胞增殖和克隆形成率高于PC3細(xì)胞;以低密度注射時(shí),其裸鼠體內(nèi)成瘤率明顯高于PC3細(xì)胞.結(jié)論利用免疫磁珠法可從人前列腺*細(xì)胞株P(guān)C3中高效的分選出具有**干細(xì)胞生物學(xué)特性的前列腺*類干細(xì)胞.

免疫磁珠細(xì)胞分選方法可以在幾分鐘內(nèi)從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中分離出很高純度的細(xì)胞。把細(xì)胞用超級順磁性的免疫磁珠特異性地標(biāo)記,磁性標(biāo)記完后,把這些細(xì)胞通過一個(gè)放在強(qiáng)而穩(wěn)定磁場中的分選柱。分選柱里的基質(zhì)造成一個(gè)高梯度磁場。被磁性標(biāo)記的細(xì)胞滯留在柱里而未被標(biāo)記的細(xì)胞則流出。當(dāng)分選柱移出磁場后,滯留柱內(nèi)的磁性標(biāo)記細(xì)胞就可以被洗脫出來,這樣就完全可以獲得標(biāo)記和未標(biāo)記的兩個(gè)細(xì)胞組份。超順磁性的磁珠的體積很小,其直徑約為50nm,體積約小于真核細(xì)胞的一百萬份之一,可與病毒的大小相比。標(biāo)記細(xì)胞上的微型磁珠即使在掃描電鏡照片上也幾乎看不到。磁性抗體和磁性標(biāo)記物間的反應(yīng)可在幾分鐘內(nèi)完成。由于微型磁珠的體積極小,所以不會(huì)對細(xì)胞造成機(jī)械性壓力,而且使孵育時(shí)間短,操作過程快。免疫磁珠形成一個(gè)穩(wěn)定的膠體液,它們在磁場中既不沉淀又不凝聚。微型磁珠的大小和它的組成成份(氧化鐵和多糖)使其可被生物降解,且不會(huì)***細(xì)胞或影響細(xì)胞的功能和活力,細(xì)胞的生理功能也不變。磁珠不需要去除,因此,陽性分選出的細(xì)胞(即磁性標(biāo)記細(xì)胞)可立即用于分析和隨后的實(shí)驗(yàn)。免疫磁珠陰性法富集惡性胸腔積液中腫瘤細(xì)胞方法的建立。

羥基淀粉沉淀去除臍血紅細(xì)胞和免疫磁珠(MACS)陽性選擇,建立富集,分離臍血CD34+細(xì)胞的簡易實(shí)用方法,通過造血祖細(xì)胞集落培養(yǎng)分析其在細(xì)胞因子作用下的增殖潛能,觀察羥基淀粉沉淀對造血細(xì)胞增殖功能的影響.方法:采用羥基淀粉沉淀和改進(jìn)的MACS富集,分離臍血CD34+細(xì)胞,以甲纖半固體造血細(xì)胞培養(yǎng)法觀察其粒-單系細(xì)胞(CFU-GM)和紅系爆式集落(BFU-E)的數(shù)量和特性.結(jié)果:臍血分離前,CD34+細(xì)胞純度為1.5%~3%,MACS分離后其純度可達(dá)85%,羥基淀粉沉淀和MACS分離可達(dá)91%;CD34+造血祖細(xì)胞培養(yǎng)有明顯的增殖,采用IL-3,IL-6,SCF,GM-CSF,EPO等細(xì)胞因子組合擴(kuò)增培養(yǎng)9~14d,CD34+細(xì)胞在液體培養(yǎng)中有明顯擴(kuò)增,MACS分離后CD34+細(xì)胞總數(shù)增加39倍,羥基淀粉沉淀和MACS分離可增加45倍.結(jié)論:應(yīng)用羥基淀粉沉淀和改進(jìn)的MACS系統(tǒng)可有效富集,分離臍血CD34+細(xì)胞,羥基淀粉沉淀對CD34+細(xì)胞的富集,分離無影響;臍血細(xì)胞分離后作造血祖細(xì)胞培養(yǎng),可產(chǎn)生豐富的CFU-GM和BFU-E,說明羥基淀粉沉淀分離的CD34+細(xì)胞的增殖功能優(yōu)于MACS分離CD34+細(xì)胞的增殖功能.利用BEENBIO免疫磁珠技術(shù)檢測大腸*細(xì)胞。江蘇anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠市場報(bào)價(jià)

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免疫共沉淀(COIP)優(yōu)點(diǎn)

(1)相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的,處于天然狀態(tài);

(2)蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的,可以避免人為的影響;

(3)可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。

免疫共沉淀(COIP)缺點(diǎn)

(1)可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用;

(2)兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合,而可能有第三者在中間起橋梁作用;

(3)必須在實(shí)驗(yàn)前預(yù)測目的蛋白是什么,以選擇***檢測的抗體,所以,若預(yù)測不正確,實(shí)驗(yàn)就得不到結(jié)果,方法本身具有冒險(xiǎn)性。

(4)靈敏度沒有親和色譜高。 江蘇anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠經(jīng)銷商價(jià)格4折起

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標(biāo)簽: 免疫磁珠