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上海protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠哪家好

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-02-18

免疫磁珠細(xì)胞分選方法可以在幾分鐘內(nèi)從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中分離出很高純度的細(xì)胞。把細(xì)胞用超級(jí)順磁性的免疫磁珠特異性地標(biāo)記,磁性標(biāo)記完后,把這些細(xì)胞通過一個(gè)放在強(qiáng)而穩(wěn)定磁場(chǎng)中的分選柱。分選柱里的基質(zhì)造成一個(gè)高梯度磁場(chǎng)。被磁性標(biāo)記的細(xì)胞滯留在柱里而未被標(biāo)記的細(xì)胞則流出。當(dāng)分選柱移出磁場(chǎng)后,滯留柱內(nèi)的磁性標(biāo)記細(xì)胞就可以被洗脫出來,這樣就完全可以獲得標(biāo)記和未標(biāo)記的兩個(gè)細(xì)胞組份。超順磁性的磁珠的體積很小,其直徑約為50nm,體積約小于真核細(xì)胞的一百萬(wàn)份之一,可與病毒的大小相比。標(biāo)記細(xì)胞上的微型磁珠即使在掃描電鏡照片上也幾乎看不到。磁性抗體和磁性標(biāo)記物間的反應(yīng)可在幾分鐘內(nèi)完成。由于微型磁珠的體積極小,所以不會(huì)對(duì)細(xì)胞造成機(jī)械性壓力,而且使孵育時(shí)間短,操作過程快。免疫磁珠形成一個(gè)穩(wěn)定的膠體液,它們?cè)诖艌?chǎng)中既不沉淀又不凝聚。微型磁珠的大小和它的組成成份(氧化鐵和多糖)使其可被生物降解,且不會(huì)***細(xì)胞或影響細(xì)胞的功能和活力,細(xì)胞的生理功能也不變。磁珠不需要去除,因此,陽(yáng)性分選出的細(xì)胞(即磁性標(biāo)記細(xì)胞)可立即用于分析和隨后的實(shí)驗(yàn)。免疫磁珠純化人呼吸道合胞病毒F蛋白方法的建立。上海protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠哪家好

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在一定條件下可分化成為多種結(jié)締組織細(xì)胞,也可分化成神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞.目的:觀察采用免疫磁珠法分離成人骨髓來源神經(jīng)干細(xì)胞的生物學(xué)特征.設(shè)計(jì),時(shí)間及地點(diǎn):以患者自身骨髓組織為觀察對(duì)象的實(shí)驗(yàn),于2003-03/2007-06在菏澤市立醫(yī)院檢驗(yàn)科完成.材料:骨髓組織來自菏澤市立醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的中風(fēng),老年性癡呆,帕金森病,腦缺血等神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者.方法:利用免疫磁珠表面的特異性抗體與骨髓組織中神經(jīng)干細(xì)胞抗原相結(jié)合,在磁場(chǎng)作用下使結(jié)合磁珠與其他細(xì)胞分離,從而獲得神經(jīng)干細(xì)胞,再將所分離的純化神經(jīng)干細(xì)胞接種到含體積分?jǐn)?shù)為0.20胎牛血清的EaglesMEM培養(yǎng)液,再在培養(yǎng)基中加入堿性成纖維因子和表皮生長(zhǎng)因子進(jìn)行原代培養(yǎng).主要觀察指標(biāo):采用免疫組織化學(xué)染色與免疫熒光染色鑒定細(xì)胞,并采用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞DNA含量.結(jié)果:在相差顯微鏡下觀察培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)豐滿,胞核及核仁清晰可見,神經(jīng)突起粗大,網(wǎng)絡(luò)稠密.免疫組織化學(xué)和免疫熒光染色顯示,細(xì)胞神經(jīng)元特異性烯醇化酶,神經(jīng)蛋白,膠質(zhì)纖維酸性蛋白酶,微管相關(guān)蛋白為陽(yáng)性.傳代后的細(xì)胞用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定DNA含量為正常二倍體,無誘發(fā)突變.浙江protein A/G COIP免疫磁珠哪家好用免疫磁珠法檢測(cè)抗白念珠*烯醇化酶抗體。

常用的磁珠法DNA提取試劑盒,國(guó)外的有Dynal、Qiagen等,國(guó)內(nèi)將磁珠應(yīng)用于核酸提取的研究起源于02年左右,經(jīng)過近些年的反復(fù)試驗(yàn),形成了穩(wěn)定的核酸提取體系,并已被***用于一些疾?。ㄈ缫腋巍⒈?、結(jié)核菌)等的定量檢測(cè)(如惠爾納米的系列磁珠法核酸提取試劑盒)。國(guó)產(chǎn)磁珠法試劑盒與進(jìn)口產(chǎn)品相比,已不單單是只具有價(jià)格優(yōu)勢(shì),其產(chǎn)品的穩(wěn)定性、高效性、提取出的核酸的質(zhì)量與產(chǎn)量都足以與進(jìn)口磁珠法試劑盒媲美。但是進(jìn)口試劑盒長(zhǎng)期以來形成的完善的銷售渠道對(duì)國(guó)產(chǎn)試劑盒的推廣是一大挑戰(zhàn)。

核酸提取磁珠通過對(duì)磁珠進(jìn)行一定的包被(如硅基、氨基、羧基等),從而可以實(shí)現(xiàn)對(duì)核酸的高通量、自動(dòng)化提取,這一技術(shù)產(chǎn)生于20世紀(jì)80年代,已經(jīng)有了成熟的試劑盒并形成為產(chǎn)業(yè)。隨著基因檢測(cè)、個(gè)性化給藥、產(chǎn)前診斷等的普及,在生物行業(yè)各領(lǐng)域都追求高通量、自動(dòng)化的***,傳統(tǒng)DNA提取方法的局限愈來愈明顯,而磁珠法DNA提取的優(yōu)勢(shì)則愈來愈明顯:①能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化、大批量操作,已有96孔的核酸自動(dòng)提取儀,用一個(gè)樣品的提取時(shí)間即可實(shí)現(xiàn)對(duì)96個(gè)樣品的處理,符合生物學(xué)高通量的操作要求,使得傳染性疾病爆發(fā)時(shí)能夠進(jìn)行快速及時(shí)的應(yīng)對(duì),這一特點(diǎn)使得傳統(tǒng)方法望塵莫及;②操作簡(jiǎn)單、用時(shí)短,整個(gè)提取流程只有四步,大多可以在36-40分鐘內(nèi)完成;③安全無毒,不使用傳統(tǒng)方法中的苯、氯仿等有毒試劑,對(duì)實(shí)驗(yàn)操作人員的傷害減少到**少,完全符合現(xiàn)代環(huán)保理念;④磁珠與核酸的特異性結(jié)合使得提取的核酸純度高、濃度大。空腸彎曲菌免疫磁珠富集方法的建立。

免疫共沉淀檢測(cè)(CO-IP

BEENbio提供免疫共沉淀(CO-IP)檢測(cè)服務(wù)??蓪?duì)兩種已知蛋白是否存在相互作用進(jìn)行驗(yàn)證,也可以驗(yàn)證在總蛋白中是否含有與已知蛋白相互作用的未知蛋白。其實(shí)驗(yàn)方法為將靶蛋白(X)與目的蛋白(Y)在同一細(xì)胞內(nèi)孵育,形成“靶蛋白-目的蛋白”復(fù)合物。將靶蛋白的特異性抗體與復(fù)合物共孵育,形成“抗體-靶蛋白-目的蛋白”復(fù)合物,利用Proterin A/G純化。通過SDS-PAGE銀染,結(jié)合Western Blot及液相質(zhì)譜等對(duì)兩種蛋白之間是否存在相互作用進(jìn)行定性分析。

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從臍血中分離,培養(yǎng)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞,研究?jī)?nèi)皮祖細(xì)胞的生長(zhǎng)特性和誘導(dǎo)分化條件.方法:應(yīng)用MACS磁球抗體標(biāo)記法純化臍血中的CD133+細(xì)胞,通過流式細(xì)胞儀,免疫細(xì)胞化學(xué),免疫熒光等技術(shù)及形態(tài)學(xué)(光鏡,電鏡)觀察研究?jī)?nèi)皮祖細(xì)胞;將細(xì)胞接種于添加(或未添加)VEGF,bFGF,干細(xì)胞因子(SCF)的含20%胎牛血清(FBS)的IMDM培養(yǎng)基中,觀察內(nèi)皮祖細(xì)胞的生長(zhǎng)特性.結(jié)果:分離新鮮臍血所得CD133陽(yáng)性細(xì)胞占單個(gè)核細(xì)胞的(1.41±1.14)%,經(jīng)流式細(xì)胞儀鑒定CD133+細(xì)胞純度為75%-85%;將分離細(xì)胞接種于纖維連接蛋白包被的24孔板內(nèi),培養(yǎng)1-2h即有細(xì)胞貼壁,7-10d可見貼壁細(xì)胞呈鋪路石樣排列;14d后細(xì)胞出現(xiàn)小圓形,梭形等多樣性變化,可見***管腔樣結(jié)構(gòu),電鏡觀察可見胞漿內(nèi)典型的Weibel-Palade小體;在VEGF,bFGF,SCF存在條件下,檢測(cè)貼壁細(xì)胞培養(yǎng)14d后細(xì)胞表面抗原表達(dá)情況:與培養(yǎng)開始時(shí)相比,祖細(xì)胞標(biāo)志CD133和CD34陽(yáng)性率呈明顯下降趨勢(shì),分別由(77.0±3.3)%和(93.1±4.7)%降至(1.6±2.2)%和(37.4±4.9)%,P<0.05,內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)志Flk-1表達(dá)明顯增加,由(22.3±3.3)%增至(94.3±4.1)%,P<0.05,同時(shí)vWF抗原呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),陽(yáng)性率為(77.9±3.3)%.上海protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠哪家好

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標(biāo)簽: 免疫磁珠