建立免疫磁珠法分離,并培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤干細胞的方法.方法將術(shù)中取得的腦膠質(zhì)瘤標本,通過剪切、消化和吹打成單細胞懸液,篩網(wǎng)過濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133+細胞,用神經(jīng)干細胞無血清培養(yǎng)法培養(yǎng)出具有單細胞克隆能力的細胞球,取第3代進行誘導分化,分化前后用免疫細胞熒光化學方法鑒定**干細胞及分化后細胞.結(jié)果免疫磁珠分選出的CD133-細胞,可懸浮生長并形成神經(jīng)干細胞樣細胞球,有較強的增殖能力,干細胞標志物巢蛋白(nestin)陽性,分化后細胞表達神經(jīng)元小管相關(guān)蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質(zhì)細胞膠質(zhì)纖維酸性蛋白質(zhì)(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白、CD133陰性,并具有**的核型.結(jié)論免疫磁珠分選法可避免原代培養(yǎng)中眾多細胞混雜牛長的發(fā)生,能夠從大量腫瘤細胞中分離出只占極少比例的**干細胞,細胞結(jié)合磁珠后在體外可以長期培養(yǎng)和傳代,進一步證實了**干細胞的存在,并為膠質(zhì)瘤干細胞的研究奠定基礎.應用免疫磁珠分離成人骨髓中STRO-1陽性細胞。浙江COIP免疫磁珠哪家好

磁珠分離細胞STRO-1+的DPSC、EMSC中HNK-1、Nestin的表達,進一步了解DPSC的表型特點及與EMSC的相關(guān)性,為今后研究提供較為純化的細胞來源。方法采用間接免疫磁珠分離法獲得DPSC、EMSC,間接免疫熒光雙標法檢測抗原HNK-1、Nestin的表達。結(jié)果磁珠分離前后進行細胞計數(shù),大約有5%的DPSC為STRO-1+的細胞,大約有1%的EMSC為STRO-1+的細胞;STRO-1+的DPSC免疫熒光檢測同時表達HNK-1(++)、Nestin(+),STRO-1+的EMSC免疫熒光檢測顯示也同時表達HNK-1(++)、Nestin(++)。結(jié)論免疫磁珠分離法獲得STRO-1+陽性的DPSC共表達EMSC的標記HNK-1和Nestin,進一步說明二者作為間充質(zhì)來源的干細胞,細胞表型具有繼承性。吉林anti-Flag COIP免疫磁珠生產(chǎn)廠家免疫磁珠技術(shù)檢測外周血中卵巢Cancer細胞。

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。當細胞在非變性條件下被裂解時，完整細胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來。當用預先固化在agarosebeads上的蛋白質(zhì)A的抗體免疫沉淀A蛋白，那么與A蛋白在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)B也能一起沉淀下來。再通過蛋白變性分離，對B蛋白進行檢測，進而證明兩者間的相互作用。這種方法得到的目的蛋白是在細胞內(nèi)與興趣蛋白天然結(jié)合的，符合體內(nèi)實際情況，得到的結(jié)果可信度高。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合；也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。

羥基淀粉沉淀去除臍血紅細胞和免疫磁珠(MACS)陽性選擇,建立富集,分離臍血CD34+細胞的簡易實用方法,通過造血祖細胞集落培養(yǎng)分析其在細胞因子作用下的增殖潛能,觀察羥基淀粉沉淀對造血細胞增殖功能的影響.方法:采用羥基淀粉沉淀和改進的MACS富集,分離臍血CD34+細胞,以甲纖半固體造血細胞培養(yǎng)法觀察其粒-單系細胞(CFU-GM)和紅系爆式集落(BFU-E)的數(shù)量和特性.結(jié)果:臍血分離前,CD34+細胞純度為1.5%～3%,MACS分離后其純度可達85%,羥基淀粉沉淀和MACS分離可達91%;CD34+造血祖細胞培養(yǎng)有明顯的增殖,采用IL-3,IL-6,SCF,GM-CSF,EPO等細胞因子組合擴增培養(yǎng)9～14d,CD34+細胞在液體培養(yǎng)中有明顯擴增,MACS分離后CD34+細胞總數(shù)增加39倍,羥基淀粉沉淀和MACS分離可增加45倍.結(jié)論:應用羥基淀粉沉淀和改進的MACS系統(tǒng)可有效富集,分離臍血CD34+細胞,羥基淀粉沉淀對CD34+細胞的富集,分離無影響;臍血細胞分離后作造血祖細胞培養(yǎng),可產(chǎn)生豐富的CFU-GM和BFU-E,說明羥基淀粉沉淀分離的CD34+細胞的增殖功能優(yōu)于MACS分離CD34+細胞的增殖功能.BEENbio Anti Myc Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。

分離轉(zhuǎn)基因小鼠骨髓造血干細胞.運用針對小鼠干細胞表面特異表達的干細胞抗原-1(stemcellantigen-1,Sca-1)的單克隆抗體和包被于磁顆粒表面的第二抗體,采用磁吸附細胞分選方法(MACS)分離小鼠骨髓造血干細胞,用流式細胞術(shù)(FACS)檢測MACS分離后骨髓細胞中干細胞(Sca-1陽性細胞)比例,監(jiān)測細胞分選效果.結(jié)果顯示MACS分離后骨髓細胞中Sca-1陽性細胞所占比例達85%以上,涂片觀察發(fā)現(xiàn)細胞組成和細胞形態(tài)學特征與FACS所得結(jié)果一致.MACS可以從轉(zhuǎn)基因小鼠全骨髓細胞中分離出Sca-1陽性的骨髓造血干細胞,細胞純度可達85%以上.BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。上海anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門

免疫磁珠的制備及其富集,分離單增李斯特菌的研究。浙江COIP免疫磁珠哪家好

免疫磁珠分離法純化抗血清的實驗條件,并與A蛋白親和層析法比較純化效果,以求得到一種簡便,快速,高效的純化IgG方法.結(jié)果表明:從5只新西蘭兔獲得210 mL試管凝集效價高達1:5 120的兔抗鰻弧菌抗血清,磁珠與IgG結(jié)合10 min達到平衡,其比較大結(jié)合量為0.227 mg/mL;免疫磁珠分離法與A蛋白親和層析法得到的IgG純度都很高,經(jīng)過SDS-PAGE電泳都只得到25 ku和55 ku左右的兩條帶;免疫磁珠分離法得到的抗體ELISA效價高于A蛋白親和層析法;免疫磁珠分離法反應所需時間(10 min)小于A蛋白親和層析法所需的20 min,其得率(11.5 mg/mL)也高于A蛋白親和層析法的10.25 mg/mL.浙江COIP免疫磁珠哪家好

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