碳二亞胺/N-羥基琥珀酰亞胺(EDC/NHS)方法在羧基磁珠表面偶聯(lián)抗體,制備可高效分離細(xì)胞的免疫磁珠.方法用EDC和NHS活化磁珠表面羧基,活化的羧基再與抗體上氨基進(jìn)行反應(yīng),從而將抗體偶聯(lián)于磁珠表面,獲得免疫磁珠.使用高性能納米粒度分析儀(HPPS),二辛可酸(BCA)蛋白定量試劑盒,流式細(xì)胞儀,透射電鏡(TEM)表征磁珠的粒徑,磁珠表面聯(lián)接的抗體量及其免疫活性.結(jié)果HPPS檢測(cè)磁珠平均水力學(xué)粒徑為110nm;磁珠表面偶聯(lián)52.4μg抗CD11a+抗體/mg磁珠.經(jīng)磁分離后細(xì)胞的流式分析結(jié)果表明,CD11a+免疫磁珠可以有效分離髓系白血病細(xì)胞系(KG-1a)細(xì)胞,免疫磁珠均勻結(jié)合于細(xì)胞表面,且不影響細(xì)胞的活性.結(jié)論成功制備可用于細(xì)胞分離且不影響分離后細(xì)胞活性的新型免疫磁珠.免疫磁珠負(fù)性富集結(jié)合免疫熒光抗體技術(shù)檢測(cè)卵巢Cancer患者外周血CTCs的方法建立和應(yīng)用。甘肅protein A/G COIP免疫磁珠性能

免疫磁珠法(MACS)：免疫磁珠法是2O世紀(jì)80年代出現(xiàn)的技術(shù)方法。1983年Ugelstad提出將免疫磁珠用于細(xì)胞分選，1990年，Mihenyi建立了MACS。這一方法的**是在磁珠表面包被具免疫反應(yīng)性的抗體進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，在細(xì)胞表面形成玫瑰花結(jié)，這些結(jié)合了磁珠的細(xì)胞一旦置于強(qiáng)大的磁場(chǎng)下，就會(huì)與其他未被結(jié)合的細(xì)胞分群，具***順磁場(chǎng)的磁珠脫離磁場(chǎng)后立即消失磁性，這樣就可以篩選或去除所標(biāo)記的細(xì)胞，從而達(dá)到陽(yáng)性或陰性選擇細(xì)胞的目的。這一技術(shù)已經(jīng)***運(yùn)用于細(xì)胞及分子生物學(xué)，分離基因、靶細(xì)胞及造血干細(xì)胞等。其分離效果得到了免疫熒光、PCR、FISH及FACS等方法的確認(rèn)。免疫磁珠可以有效地分選細(xì)胞，從而決定了這一方法在神經(jīng)干細(xì)胞分選中應(yīng)用的技術(shù)可行性。安徽蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠市場(chǎng)報(bào)價(jià)BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。

免疫磁性細(xì)胞分選系統(tǒng)分離純化骨髓衍生肝干細(xì)胞亞群c-Kit^+lin^-。方法:實(shí)驗(yàn)于2006—07/08在南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心完成。6~8周齡的SPF級(jí)純系BALB,C雄性小鼠10只,體質(zhì)量18~20g。收集小鼠股骨骨髓細(xì)胞,利用免疫磁性細(xì)胞分選系統(tǒng),通過(guò)兩步法分選純化c-Kit^+lin^-:將獲取的lin^-細(xì)胞懸液8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按80μL/10^7加入Buffer重懸細(xì)胞。按20μL/10^7加生物素抗體磁珠,混勻,4℃冰箱孵育15min,按1 mL/10^7加入Buffer洗細(xì)胞1次,8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按500μL/10^8加入Buffer重懸細(xì)胞。Buffer 500μL潤(rùn)MS柱,懸液過(guò)柱后,Buffer 500μL/次洗柱3次,柱子脫離磁場(chǎng),加1mL Buffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit^+lin^-細(xì)胞,收集到c-kit^+lin-細(xì)胞,細(xì)胞計(jì)數(shù)。取2.0x108個(gè)細(xì)胞分成10等份,流式細(xì)胞儀分析c-Kit^+lin^-細(xì)胞純度,計(jì)算回收率,評(píng)估純化效率,苔盼蘭染色檢測(cè)純化前后的細(xì)胞活力。計(jì)算活細(xì)胞的百分率。細(xì)胞純度和細(xì)胞回收率的計(jì)算:細(xì)胞純度:分離產(chǎn)物中的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù),分離細(xì)胞的總細(xì)胞數(shù)×100%,細(xì)胞回收率:分離產(chǎn)物中的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù),起始標(biāo)本陽(yáng)性細(xì)胞總數(shù)×100%。

從臍血中分離,培養(yǎng)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞,研究?jī)?nèi)皮祖細(xì)胞的生長(zhǎng)特性和誘導(dǎo)分化條件.方法:應(yīng)用MACS磁球抗體標(biāo)記法純化臍血中的CD133+細(xì)胞,通過(guò)流式細(xì)胞儀,免疫細(xì)胞化學(xué),免疫熒光等技術(shù)及形態(tài)學(xué)(光鏡,電鏡)觀察研究?jī)?nèi)皮祖細(xì)胞;將細(xì)胞接種于添加(或未添加)VEGF,bFGF,干細(xì)胞因子(SCF)的含20%胎牛血清(FBS)的IMDM培養(yǎng)基中,觀察內(nèi)皮祖細(xì)胞的生長(zhǎng)特性.結(jié)果:分離新鮮臍血所得CD133陽(yáng)性細(xì)胞占單個(gè)核細(xì)胞的(1.41±1.14)%,經(jīng)流式細(xì)胞儀鑒定CD133+細(xì)胞純度為75%-85%;將分離細(xì)胞接種于纖維連接蛋白包被的24孔板內(nèi),培養(yǎng)1-2h即有細(xì)胞貼壁,7-10d可見(jiàn)貼壁細(xì)胞呈鋪路石樣排列;14d后細(xì)胞出現(xiàn)小圓形,梭形等多樣性變化,可見(jiàn)***管腔樣結(jié)構(gòu),電鏡觀察可見(jiàn)胞漿內(nèi)典型的Weibel-Palade小體;在VEGF,bFGF,SCF存在條件下,檢測(cè)貼壁細(xì)胞培養(yǎng)14d后細(xì)胞表面抗原表達(dá)情況:與培養(yǎng)開(kāi)始時(shí)相比,祖細(xì)胞標(biāo)志CD133和CD34陽(yáng)性率呈明顯下降趨勢(shì),分別由(77.0±3.3)%和(93.1±4.7)%降至(1.6±2.2)%和(37.4±4.9)%,P<0.05,內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)志Flk-1表達(dá)明顯增加,由(22.3±3.3)%增至(94.3±4.1)%,P<0.05,同時(shí)vWF抗原呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),陽(yáng)性率為(77.9±3.3)%.免疫磁珠的制備及其富集,分離單增李斯特菌的研究。

利用免疫磁珠法分選并鑒定人前列腺*類干細(xì)胞.方法利用免疫磁珠法從人前列腺*細(xì)胞株P(guān)C3中分選CD133+/CD44+細(xì)胞,通過(guò)免疫組化,流式細(xì)胞術(shù),CCK8,平板克隆形成實(shí)驗(yàn)及裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)鑒定其表面標(biāo)志物表達(dá)情況及**干細(xì)胞特性.結(jié)果經(jīng)免疫磁珠法分選所得CD133+/CD44+細(xì)胞比例為0.50%;免疫組化及流式顯示其CD44/CD133/整合素α2β1均高表達(dá);其細(xì)胞增殖和克隆形成率高于PC3細(xì)胞;以低密度注射時(shí),其裸鼠體內(nèi)成瘤率明顯高于PC3細(xì)胞.結(jié)論利用免疫磁珠法可從人前列腺*細(xì)胞株P(guān)C3中高效的分選出具有**干細(xì)胞生物學(xué)特性的前列腺*類干細(xì)胞.BEENbio protein A/G Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。安徽蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠供應(yīng)商

免疫磁珠陰性法富集惡性胸腔積液中腫瘤細(xì)胞方法的建立。甘肅protein A/G COIP免疫磁珠性能

Anti HA COIP磁珠

產(chǎn)品價(jià)格

產(chǎn)品描述

BEENbio Anti HA COIP磁珠在大小為2um的納米磁珠上供價(jià)結(jié)合了大量的小鼠Anti HA單克隆抗體，與傳統(tǒng)的Anti HA COIP瓊脂糖凝膠比較，抗體結(jié)合能力相同，背景更低，由于采用磁性分離，使得每次COIP可以節(jié)省40%的時(shí)間。

產(chǎn)品特性

儲(chǔ)存條件

4^oC長(zhǎng)期穩(wěn)定

使用說(shuō)明

磁珠的準(zhǔn)備

重懸Anti HA 免疫磁珠，取10 μL加入到500 μL TBS，洗滌3次，分離磁珠，棄上清。

樣品的結(jié)合（binding）

在上述沉淀中加入500 μL細(xì)胞裂解液，室溫緩慢孵育2小時(shí)或者4°C條件下過(guò)夜，分離磁珠，棄上清。

注意：結(jié)合過(guò)程中，磁珠可能會(huì)出現(xiàn)聚團(tuán)或呈片狀，屬于正?，F(xiàn)象，不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

洗滌（washing）：0.5 mL TBS緩沖液洗滌四次，每次5min，分離磁珠，棄上清。

洗脫（elution）:上述所得沉淀中加 入50 μL 1×蛋白上樣緩沖液，煮沸5 min，冷卻后分離磁珠，吸取上清液，進(jìn)行SDS-PAGE檢測(cè)。 甘肅protein A/G COIP免疫磁珠性能

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