免疫磁珠分離成人骨髓中STRO-1^+陽性細胞,獲得同質(zhì)性骨髓基質(zhì)干細胞.方法:實驗于2004-06/2005-06在東南大學修復重建外科研究所實驗室完成.采集正常自愿獻髓者骨髓,淋巴細胞分離液體離心純化分離后利用免疫磁珠分離出STRO-1^+細胞,研究其生長曲線,體外擴增能力,集落形成能力,細胞表型,細胞周期,成骨能力.結(jié)果:①利用免疫磁珠可從成人骨髓中獲取STRO-1^+細胞.經(jīng)體外培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)STRO-1^+細胞貼壁生長,相差顯微鏡下STRO-1^+細胞呈成纖維細胞梭形外觀.②生長曲線可分為細胞生長延滯期,對數(shù)生長期及穩(wěn)定期,細胞倍增時間為57h.③STRO-1^+細胞可以在體外擴增12周左右,形成的成纖維細胞集落數(shù),處于細胞分裂期的細胞數(shù),擴增倍數(shù)均低于傳統(tǒng)分離方法得到的骨髓基質(zhì)干細胞.④經(jīng)流式細胞儀檢測,STRO-1^+細胞穩(wěn)定地表達CD29,CD44,CD105,不表達造血細胞系的表面標記CD14,CD34,CD45,HLA-DR.⑤經(jīng)成骨培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)STRO-1^+的骨髓基質(zhì)干細胞具有很強的成骨分化能力.結(jié)論:利用免疫磁珠能夠從成人骨髓中快速分離,純化骨髓基質(zhì)干細胞,且具有高效,靈敏。利用人免疫球蛋白構(gòu)建免疫磁珠富集金葡菌條件優(yōu)化。北京anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠性能
羥基淀粉沉淀去除臍血紅細胞和免疫磁珠(MACS)陽性選擇,建立富集,分離臍血CD34+細胞的簡易實用方法,通過造血祖細胞集落培養(yǎng)分析其在細胞因子作用下的增殖潛能,觀察羥基淀粉沉淀對造血細胞增殖功能的影響.方法:采用羥基淀粉沉淀和改進的MACS富集,分離臍血CD34+細胞,以甲纖半固體造血細胞培養(yǎng)法觀察其粒-單系細胞(CFU-GM)和紅系爆式集落(BFU-E)的數(shù)量和特性.結(jié)果:臍血分離前,CD34+細胞純度為1.5%~3%,MACS分離后其純度可達85%,羥基淀粉沉淀和MACS分離可達91%;CD34+造血祖細胞培養(yǎng)有明顯的增殖,采用IL-3,IL-6,SCF,GM-CSF,EPO等細胞因子組合擴增培養(yǎng)9~14d,CD34+細胞在液體培養(yǎng)中有明顯擴增,MACS分離后CD34+細胞總數(shù)增加39倍,羥基淀粉沉淀和MACS分離可增加45倍.結(jié)論:應用羥基淀粉沉淀和改進的MACS系統(tǒng)可有效富集,分離臍血CD34+細胞,羥基淀粉沉淀對CD34+細胞的富集,分離無影響;臍血細胞分離后作造血祖細胞培養(yǎng),可產(chǎn)生豐富的CFU-GM和BFU-E,說明羥基淀粉沉淀分離的CD34+細胞的增殖功能優(yōu)于MACS分離CD34+細胞的增殖功能.安徽anti-Myc COIP免疫磁珠銷售BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠全國招商代理。
免疫共沉淀(COIP)優(yōu)點
(1)相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的,處于天然狀態(tài);
(2)蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進行的,可以避免人為的影響;
(3)可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復合物。
免疫共沉淀(COIP)缺點
(1)可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用;
(2)兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合,而可能有第三者在中間起橋梁作用;
(3)必須在實驗前預測目的蛋白是什么,以選擇***檢測的抗體,所以,若預測不正確,實驗就得不到結(jié)果,方法本身具有冒險性。
(4)靈敏度沒有親和色譜高。
從臍血中分離,培養(yǎng)血管內(nèi)皮祖細胞,研究內(nèi)皮祖細胞的生長特性和誘導分化條件.方法:應用MACS磁球抗體標記法純化臍血中的CD133+細胞,通過流式細胞儀,免疫細胞化學,免疫熒光等技術(shù)及形態(tài)學(光鏡,電鏡)觀察研究內(nèi)皮祖細胞;將細胞接種于添加(或未添加)VEGF,bFGF,干細胞因子(SCF)的含20%胎牛血清(FBS)的IMDM培養(yǎng)基中,觀察內(nèi)皮祖細胞的生長特性.結(jié)果:分離新鮮臍血所得CD133陽性細胞占單個核細胞的(1.41±1.14)%,經(jīng)流式細胞儀鑒定CD133+細胞純度為75%-85%;將分離細胞接種于纖維連接蛋白包被的24孔板內(nèi),培養(yǎng)1-2h即有細胞貼壁,7-10d可見貼壁細胞呈鋪路石樣排列;14d后細胞出現(xiàn)小圓形,梭形等多樣性變化,可見***管腔樣結(jié)構(gòu),電鏡觀察可見胞漿內(nèi)典型的Weibel-Palade小體;在VEGF,bFGF,SCF存在條件下,檢測貼壁細胞培養(yǎng)14d后細胞表面抗原表達情況:與培養(yǎng)開始時相比,祖細胞標志CD133和CD34陽性率呈明顯下降趨勢,分別由(77.0±3.3)%和(93.1±4.7)%降至(1.6±2.2)%和(37.4±4.9)%,P<0.05,內(nèi)皮細胞特異性標志Flk-1表達明顯增加,由(22.3±3.3)%增至(94.3±4.1)%,P<0.05,同時vWF抗原呈強陽性表達,陽性率為(77.9±3.3)%.BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。
BEENbio鏈霉親和素磁珠本產(chǎn)品是由磁性納米顆粒與高純度的鏈霉親和素共價偶聯(lián)而成。這種微球能用于捕獲生物素標記的底物,如抗原、抗體和核酸等。鏈霉親和素(streptavidin)與生物素(biotin)的結(jié)合是***的非共價生物交互作用之一,因此,這也是親和層析法所使用的一種強大工具。生物分子可以與生物素輕松融合,而層析基質(zhì)上固定的鏈霉親和素配體可以與之結(jié)合,而且這種鏈霉親和素-生物素相互作用具有較低的非特異親和性,捕獲所需的底物能夠直接應用于后續(xù)實驗。本產(chǎn)品可廣泛應用于免疫學檢測、核酸純化、核酸固相雜交檢測、細胞分選等分子生物學實驗。利用BEENBIO免疫磁珠技術(shù)檢測大腸*細胞。湖北protein A/G COIP免疫磁珠供應商
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化工產(chǎn)業(yè)是國民經(jīng)濟的重要基礎(chǔ)行業(yè),與一國綜合國力和人們生活密切相關(guān)?;ぎa(chǎn)業(yè)由于規(guī)模體量大、產(chǎn)業(yè)鏈條長、資本技術(shù)密集、帶動作用廣、與大家生活息息相關(guān)等特征,受到各國的高度重視。雖然近年來我國化工行業(yè)整體規(guī)模飛速壯大,但有限責任公司(自然)企業(yè)競爭力、收入能力、人均收入等方面指標與發(fā)達地區(qū)差距較大,在人均收入等部分指標上我國部分企業(yè)不足全球優(yōu)先企業(yè)的1/10。加快提升企業(yè)重點競爭力,培育具有競爭優(yōu)勢的企業(yè)和企業(yè)集團,是我國化工產(chǎn)業(yè)必須要下大力氣補齊的短板??蒲性噭⒑牟?、儀器,納米脂質(zhì)體,細胞、分子、蛋白實驗,科研項目應用于國民經(jīng)濟和****的眾多領(lǐng)域中,成為我國化工體系中市場需求增長**快的領(lǐng)域之一,近年來很多產(chǎn)品的消費量年均增長都在10%以上。通過招商型的優(yōu)化和升級,化工行業(yè)已經(jīng)從初期的以“三廢治理”為主,發(fā)展為包括環(huán)保產(chǎn)品、環(huán)境服務、潔凈產(chǎn)品、廢物循環(huán)利用,跨行業(yè)、跨地區(qū),產(chǎn)業(yè)門類基本齊全的產(chǎn)業(yè)體系。北京anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠性能
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