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從臍血中分離,培養(yǎng)血管內(nèi)皮祖細胞,研究內(nèi)皮祖細胞的生長特性和誘導(dǎo)分化條件.方法:應(yīng)用MACS磁球抗體標記法純化臍血中的CD133+細胞,通過流式細胞儀,免疫細胞化學,免疫熒光等技術(shù)及形態(tài)學(光鏡,電鏡)觀察研究內(nèi)皮祖細胞;將細胞接種于添加(或未添加)VEGF,bFGF,干細胞因子(SCF)的含20%胎牛血清(FBS)的IMDM培養(yǎng)基中,觀察內(nèi)皮祖細胞的生長特性.結(jié)果:分離新鮮臍血所得CD133陽性細胞占單個核細胞的(1.41±1.14)%,經(jīng)流式細胞儀鑒定CD133+細胞純度為75%-85%;將分離細胞接種于纖維連接蛋白包被的24孔板內(nèi),培養(yǎng)1-2h即有細胞貼壁,7-10d可見貼壁細胞呈鋪路石樣排列;14d后細胞出現(xiàn)小圓形,梭形等多樣性變化,可見***管腔樣結(jié)構(gòu),電鏡觀察可見胞漿內(nèi)典型的Weibel-Palade小體;在VEGF,bFGF,SCF存在條件下,檢測貼壁細胞培養(yǎng)14d后細胞表面抗原表達情況:與培養(yǎng)開始時相比,祖細胞標志CD133和CD34陽性率呈明顯下降趨勢,分別由(77.0±3.3)%和(93.1±4.7)%降至(1.6±2.2)%和(37.4±4.9)%,P<0.05,內(nèi)皮細胞特異性標志Flk-1表達明顯增加,由(22.3±3.3)%增至(94.3±4.1)%,P<0.05,同時vWF抗原呈強陽性表達,陽性率為(77.9±3.3)%.BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。浙江protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠哪家好
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來。當用預(yù)先固化在agarosebeads上的蛋白質(zhì)A的抗體免疫沉淀A蛋白,那么與A蛋白在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)B也能一起沉淀下來。再通過蛋白變性分離,對B蛋白進行檢測,進而證明兩者間的相互作用。這種方法得到的目的蛋白是在細胞內(nèi)與興趣蛋白天然結(jié)合的,符合體內(nèi)實際情況,得到的結(jié)果可信度高。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合;也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。黑龍江蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠性能密度梯度離心聯(lián)合上皮細胞黏附分子免疫磁珠富集法檢測卵巢Cancer循環(huán)腫瘤細胞及其與腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性.
一種免疫磁珠及制作方法和用于檢測的方法及測試板,所述的免疫磁珠至少由磁性載體微球組成,該磁性載體微球結(jié)合有至少一種免疫配基;所述的磁性載體微球由磁性納米粒和高分子骨架材料組成,其**為金屬小顆粒,**外為高分子材料,**外層為帶有各種可以結(jié)合不同免疫配基功能基因的功能層;免疫磁珠的制作方法包括:磁珠預(yù)處理;活化磁珠;偶聯(lián)抗體的制作;對偶聯(lián)抗體用封閉液封閉;免疫磁珠純化等;用于檢測的方法是:利用免疫學反應(yīng)夾心法,競爭法以及間接法檢測不同物質(zhì)的存在,并在測試板上設(shè)置對照體系:測試板由包被試紙條,偶聯(lián)墊,樣品墊,吸水墊,覆蓋膜以及測試板外卡組成,它具有靈敏度高,定量準確,不受光學因素干擾,磁信號穩(wěn)定,不易衰減,試劑簡單,穩(wěn)定,低廉,檢測快速,適合現(xiàn)場檢測等特點.
產(chǎn)品價格
產(chǎn)品貨號
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規(guī)格
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價格
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BEENbio-PR003-0.4
|
0.4 mL
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1150 RMB
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BEENbio-PR003-1
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1 mL
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1780 RMB
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BEENbio-PR003-5
|
5 mL
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6825 RMB
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產(chǎn)品描述
BEENbio Anti HA COIP磁珠在大小為2um的納米磁珠上供價結(jié)合了大量的小鼠Anti HA單克隆抗體,與傳統(tǒng)的Anti HA COIP瓊脂糖凝膠比較,抗體結(jié)合能力相同,背景更低,由于采用磁性分離,使得每次COIP可以節(jié)省40%的時間。
產(chǎn)品特性
項目
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特性
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抗體亞型
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鼠源IgG1
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抗體純化方法
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Protein A 純化制備
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適用范圍
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免疫共沉淀(IP),HA tag蛋白純化
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推薦使用體積
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COIP: 500μl 細胞裂解液 使用 10μL磁珠
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融合蛋白結(jié)合容量
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大于1.1 mg HA tagged protein/mL 磁珠
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儲存條件
4oC長期穩(wěn)定
使用說明
磁珠的準備
重懸Anti HA 免疫磁珠,取10 μL加入到500 μL TBS,洗滌3次,分離磁珠,棄上清。
樣品的結(jié)合(binding)
在上述沉淀中加入500 μL細胞裂解液,室溫緩慢孵育2小時或者4°C條件下過夜,分離磁珠,棄上清。
注意:結(jié)合過程中,磁珠可能會出現(xiàn)聚團或呈片狀,屬于正?,F(xiàn)象,不會影響實驗結(jié)果。
洗滌(washing):0.5 mL TBS緩沖液洗滌四次,每次5min,分離磁珠,棄上清。
洗脫(elution):上述所得沉淀中加 入50 μL 1×蛋白上樣緩沖液,煮沸5 min,冷卻后分離磁珠,吸取上清液,進行SDS-PAGE檢測。 紅細胞膜免疫磁珠檢測成分血中抗A/抗B的研究。
產(chǎn)品價格
產(chǎn)品貨號
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規(guī)格
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價格
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BEENbio-PR004-0.4
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0.4 mL
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1150 RMB
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BEENbio -PR004-1
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1 mL
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1780 RMB
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BEENbio -PR004-5
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5 mL
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6825 RMB
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產(chǎn)品描述
BEENbio Anti Myc COIP磁珠在大小為2um的納米磁珠上供價結(jié)合了大量的小鼠Anti Myc 單克隆抗體,與傳統(tǒng)的Anti Myc COIP瓊脂糖凝膠比較,抗體結(jié)合能力相同,背景更低,由于采用磁性分離,使得每次COIP可以節(jié)省40%的時間。
產(chǎn)品特性
項目
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特性
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抗體亞型
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鼠源IgG1
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抗體純化方法
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Protein A 純化制備
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適用范圍
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免疫共沉淀(IP),Myc tag蛋白純化
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推薦使用體積
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COIP: 500μl 細胞裂解液 使用 10μL磁珠
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融合蛋白結(jié)合容量
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大于1.1 mg Myc tagged protein/mL 磁珠
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儲存條件
4oC長期穩(wěn)定
使用說明
磁珠的準備
重懸Anti Myc 免疫磁珠,取10 μL加入到500 μL TBS,洗滌3次,分離磁珠,棄上清。
樣品的結(jié)合(binding)
在上述沉淀中加入500 μL細胞裂解液,室溫緩慢孵育2小時或者4°C條件下過夜,分離磁珠,棄上清。
注意:結(jié)合過程中,磁珠可能會出現(xiàn)聚團或呈片狀,屬于正?,F(xiàn)象,不會影響實驗結(jié)果。
洗滌(washing):0.5 mL TBS緩沖液洗滌四次,每次5min,分離磁珠,棄上清。
洗脫(elution):上述所得沉淀中加 入50 μL 1×蛋白上樣緩沖液,煮沸5 min,冷卻后分離磁珠,吸取上清液,進行SDS-PAGE檢測。
BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。浙江anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠代理價格4折起
BEENbio Anti Flag Co-IP&CHIP磁珠全國招商代理。浙江protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠哪家好
免疫共沉淀檢測(CO-IP)
BEENbio提供免疫共沉淀(CO-IP)檢測服務(wù)。可對兩種已知蛋白是否存在相互作用進行驗證,也可以驗證在總蛋白中是否含有與已知蛋白相互作用的未知蛋白。其實驗方法為將靶蛋白(X)與目的蛋白(Y)在同一細胞內(nèi)孵育,形成“靶蛋白-目的蛋白”復(fù)合物。將靶蛋白的特異性抗體與復(fù)合物共孵育,形成“抗體-靶蛋白-目的蛋白”復(fù)合物,利用Proterin A/G純化。通過SDS-PAGE銀染,結(jié)合Western Blot及液相質(zhì)譜等對兩種蛋白之間是否存在相互作用進行定性分析。
服務(wù)優(yōu)勢
? 使用銀染技術(shù),靈敏度是考馬斯亮藍100倍,SDS-PAGE電泳結(jié)果更加清晰;
? 擁有液相質(zhì)譜及Fortebio等完整配套檢測設(shè)備,可對檢測結(jié)果進一步分析;
? 實驗重復(fù)進行兩次,排除隨機因素影響,結(jié)果更加可靠;
? 擁有蛋白、抗體等制備平臺,您只需提供序列便可完成全部實驗;
浙江protein A/G 免疫共沉淀免疫磁珠哪家好上海普平生物科技有限公司是一家上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司上海普平生物科技有限公司從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓;實驗室設(shè)備、化工原料及產(chǎn)品的銷售;計算機軟件開發(fā);計算機網(wǎng)絡(luò)工程;從事貨物及技術(shù)進出口業(yè)務(wù)。 的公司,致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實、誠實可信的企業(yè)。普平生物深耕行業(yè)多年,始終以客戶的需求為向?qū)?,為客戶提?**的科研試劑、耗材、儀器,納米脂質(zhì)體,細胞、分子、蛋白實驗,科研項目。普平生物致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來良好體驗。普平生物始終關(guān)注化工行業(yè)。滿足市場需求,提高產(chǎn)品價值,是我們前行的力量。